周曉娜, 李靜平, 楊麗娟, 牛紅萍
(云南中醫(yī)學(xué)院, 云南 昆明 650500)
本實驗成功地建立了家兔盆腔粘連模型動物模型。通過肉眼觀察、病理學(xué)、血液檢查等觀察盆腔粘連模型的復(fù)制,發(fā)現(xiàn)盆腔粘連病變組織造模方法、感染方式、病變特點與盆腔粘連相似,值得進(jìn)一步借鑒使用?,F(xiàn)報道如下:
1.1 實驗動物 家兔,體重2.5~3 kg,雌性,未孕。10只,由云南省中醫(yī)學(xué)院動物房提供。
1.2 主要器材 醫(yī)用脫脂棉:徐州利爾康衛(wèi)生材料有限公司出品;醫(yī)用逢合針:,批號P-1010509,上海醫(yī)用逢合針廠有限公司;醫(yī)用非吸收性外科縫合線:批號100412,揚州市金環(huán)醫(yī)療器械廠;持針鉗、眼科鑷等手術(shù)器械均為上海醫(yī)療器械(集團(tuán))有限公司手術(shù)器械廠;手術(shù)刀片,上海第二醫(yī)科大學(xué)杜行醫(yī)用器械廠;0號砂紙。
1.3 藥品 戊巴比妥鈉鹽:DS179,北京鼑國昌盛生物技術(shù)有限責(zé)任公司;75%乙醇消毒液:批號100810,昆明南天化工藥業(yè)有限公司出品;0.9%氯化鈉注射液:批號D101123N1,昆明南疆制藥有限公司;碘酊:批號100401,昆明利健消毒制品有限公司;2%強化戊二醛消毒劑,批號20100519,上海利康消毒高科技有限公司。
健康成熟的家兔10只,用3%戊巴比妥鈉鹽溶液麻醉家兔,去毛備皮,在無菌條件下于下腹正中切開2 cm,暴露兩側(cè)宮角及輸卵管,以0號細(xì)砂紙摩擦子宮及輸卵管的漿膜層,致漿膜層明顯擦傷出血。于60瓦日光燈下(距宮角及輸卵管20 cm)干燥20 min,還納于腹腔,逐層縫合。術(shù)后第14天剖腹,肉眼觀察盆腔是否有粘連帶形成,病理檢查是否有炎癥病變和血液檢查盆腔微循環(huán)情況。再向輸卵管-卵巢方向注射5%鎂藍(lán)溶液,同時捏緊子宮兩側(cè),觀察輸卵管通暢程度(輸卵管通暢的判斷:通暢—注入鎂藍(lán)液無壓力,見傘端有鎂藍(lán)液溢出,輸卵管無局部膨大;不暢—注入鎂藍(lán)液有壓力,輸卵管先膨大,再見有鎂藍(lán)液溢出;阻塞—注入鎂藍(lán)液壓力大,輸卵管不脹,無鎂藍(lán)液自傘端溢出,有時見宮角部有藍(lán)染。如壺腹部膨大而傘端無鎂藍(lán)液溢出則為輸卵管遠(yuǎn)端阻塞)[1~2]。
3.1 肉眼觀察盆腔粘連情況 術(shù)后第14天剖腹,肉眼發(fā)現(xiàn)子宮、輸卵管、大網(wǎng)膜全部粘連在一起,大量纖維結(jié)締組織合成,部分輸卵管增粗,整個盆腔損傷、充血,有膿性分泌物覆蓋。
3.2 病理改變 取增粗的輸卵管及盆腔結(jié)締組織作病理檢查,光鏡下見大量纖維結(jié)締組織明顯增生,血管擴(kuò)張充血,見大量炎性細(xì)胞,有淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞;輸卵管管腔擴(kuò)大,黏膜皺襞和肌層充血、水腫。電鏡下細(xì)胞核核膜不清,染色質(zhì)內(nèi)線粒體腫脹,線粒體固縮。無纖毛細(xì)胞胞膜破壞,線粒體固縮,胞核密度模糊不清。
3.3 觀察血液流變學(xué) 測家兔的血液黏度、血漿黏度及血沉和正常家兔比有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),說明盆腔內(nèi)血液微循環(huán)障礙、組織缺氧。
3.4 觀察輸卵管通暢程度 雙側(cè)輸卵管通暢1只;雙側(cè)通而不暢1只,雙側(cè)阻塞2只,一側(cè)通暢、一側(cè)阻塞2只;一側(cè)通暢,一側(cè)通而不暢2只。一側(cè)通而不暢,一側(cè)阻塞2只。
4.1 技術(shù)要求 此模型制作過程中,在摩擦漿膜層時,因家兔盆腔組織脆弱,故要求用力輕,不能損傷子宮和輸卵管肌肉層,盡量不影響輸卵管管腔和子宮腔的組織結(jié)構(gòu),以達(dá)到只是盆腔粘連而無宮腔粘連的目的;摩擦面要覆蓋整個子宮及輸卵管的漿膜層,使整個盆腔全部粘連。如果需要的粘連面積小,則可以減少摩擦面積。
4.2 造模機(jī)制 盆腔粘連形成主要是由于損傷引起漿膜表面的炎性反應(yīng)伴間質(zhì)喪失,產(chǎn)生炎性細(xì)胞和血液滲出。滲出物在3天以上不溶解,其中發(fā)生纖維細(xì)胞增生,引起粘連形成[1]。
4.3 意義 異物刺激的機(jī)械損傷是引起盆腔粘連的原因之一。盆腔粘連發(fā)生在2/3開腹術(shù)患者中。目前多認(rèn)為是由手術(shù)創(chuàng)傷、感染、異物反應(yīng)、組織缺血等引起的炎癥反應(yīng)[3]。該方法可造成明確的盆腔粘連模型,或并伴有輸卵管的異常。該復(fù)制方法簡便易行,成功率高,可復(fù)制性強,筆者曾用此方法復(fù)制模型來觀察多途徑中藥外治法治療盆腔粘連的作用,效果滿意。進(jìn)一步證實了模型的可重復(fù)性和實用性。盆腔粘連目前是臨床常見疾病,復(fù)制該模型為臨床深入開展盆腔粘連的治療提供借鑒方法。
[1]尤昭玲.婦產(chǎn)科實驗動物學(xué)[M].北京:中國中醫(yī)藥出版社,2007:93~94.
[2]黃河玲 兔慢性輸卵管炎動物模型的建立[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2000,20(9):1982~1983.
[3]張巧利,呂淑蘭,余姍姍.腹腔粘連、慢性盆腔痛與粘連松解術(shù).中國婦幼健康研究[J],2006,17(3):224~226.