柏學(xué)敏，文麗麗，呂文軍

（黑龍江省黑河市藥品檢驗所，黑龍江 黑河 164300）

·論著·

HPLC法測定復(fù)方金剛烷胺氨基比林片中氨基比林的溶出度

柏學(xué)敏，文麗麗，呂文軍

（黑龍江省黑河市藥品檢驗所，黑龍江 黑河 164300）

目的 建立一種用高效液相色譜法測定復(fù)方金剛烷胺氨基比林片中氨基比林溶出度的方法。方法以水為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為100 r·min－1，30 min時取樣。選用色譜柱SunfireC18（250 mm×4.6 mm，5 μm）;流動相為甲醇－水（56:44）;檢測波長:273 nm;流速:1.0 mL/min。結(jié)果氨基比林在11.9～71.47 μg/mL濃度范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系（r= 0.9999）。平均回收率為99.05%。結(jié)論本方法簡單、快速、結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

復(fù)方金剛烷胺氨基比林片;氨基比林;高效液相色譜法;溶出度

復(fù)方金剛烷胺氨基比林片為復(fù)方制劑，其組份為每片內(nèi)含鹽酸金剛烷胺0.1 g，氨基比林0.15 g，馬來酸氯苯那敏0.002 g。國家藥品標(biāo)準(zhǔn)復(fù)方金剛烷胺氨基比林片檢查項中只要求符合片劑項下的有關(guān)規(guī)定，沒有溶出度檢查的要求［1］。為了進(jìn)一步量化檢驗指標(biāo)，更好的控制藥品內(nèi)在質(zhì)量，需要建立適當(dāng)?shù)姆椒z測溶出度。本文建立測定復(fù)方金剛烷胺氨基比林片溶出度的檢驗方法，并進(jìn)行了相關(guān)的方法學(xué)研究。此方法操作簡便，專屬性強(qiáng)，取得了較為滿意的結(jié)果。

1 儀器和試藥

D－800LS溶出試驗儀（天津大學(xué)精密儀器廠生產(chǎn)）;高效液相色譜儀（Waters e2695－2998）;色譜柱（Sunfire C18柱250 mm×4.6 mm，5 μm）。

復(fù)方金剛烷胺氨基比林片，市售;氨基比林對照品（批號:100503－200301）購于中國藥品生物制品檢定所;甲醇為色譜純，其他試劑均為分析純。

2 實驗方法與結(jié)果

2.1 供試品溶液的制備:取本品，照溶出度測定法（《中國藥典》2010年版附錄X C第一法）［2］，以水900 mL為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為100 r·min－1，依法操作30 min時，取溶液適量，濾過，精密量取續(xù)濾液5 mL置25 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。

2.2 對照品溶液的制備:精密稱取氨基比林對照品16.5 mg，置100 mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取5 mL，置25 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。

2.3 按照高效液相色譜法（《中國藥典》2010年版附錄V D第一法）測定［3］。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗，用十八烷基鍵合鍵合硅膠做為填充劑;流動相:甲醇－水（56:44）;柱溫:30℃;檢測波長:273 nm;流速:1.0 mL/min;取供試品溶液和對照品溶液各20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。按外標(biāo)法以峰面積計算每片中氨基比林的溶出量，限度為標(biāo)示量的80%，應(yīng)符合規(guī)定。

3 溶出度方法學(xué)試驗

3.1 溶劑與輔料對氨基比林測定的干擾試驗:按處方量的比例，用溶劑制成不含主藥的空白樣品，注入液相色譜儀，記錄色譜峰，結(jié)果溶劑和輔料在氨基比林保留時間處無色譜峰出現(xiàn)，不干擾主成分測定。結(jié)果見圖1。

3.2 線性關(guān)系考察:精密稱取氨基比林對照品14.89 mg置25 mL量瓶中，用水溶解并稀釋到刻度，搖勻。配成0.6 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備液，精密量取1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL、6.0 mL，分別置于置50 mL量瓶中，用水稀釋到刻度，搖勻，配成系列濃度的對照品溶液，按上述色譜條件精密進(jìn)樣20 μL，以峰面積為縱坐標(biāo)，以濃度（μg/ mL）為橫坐標(biāo)，計算其回歸方程為Y=34678X－1374.3，r= 0.9999結(jié)果表明氨基比林為11.9～71.47 μg/mL濃度范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

3.3 精密度實驗:精密吸取對照品溶液（濃度為33 μg/ mL），重復(fù)進(jìn)樣5次，每次20 μL，測定氨基比林的峰面積，RSD為0.27%，說明該方法的精密度良好。3.4穩(wěn)定性實驗:取同一批次供試品溶液，按本文色譜條件于0、2、4、6、8、 10、12 h進(jìn)樣20 μL，測定氨基比林的峰面積，RSD為0.65%;表明供試品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定。

3.5 重復(fù)性試驗:精密稱取同一批號的復(fù)方金剛烷胺氨基比林片樣品6份，照上述方法測定含量，結(jié)果測得平均含量為99.6%，RSD為0.45%。

圖1復(fù)方金剛烷胺氨基比林片液相色譜圖

3.6 加樣回收試驗:精密稱取已知含量的樣品9份，每份約相當(dāng)于氨基比林75 mg，濾過。精密稱取15.12 mg氨基比林對照品，置100 mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取樣品溶液2 mL，分別加入對照品溶液6 mL、10 mL、14 mL置容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。分別取20 μL注入液相色譜儀，計算氨基比林低、中、高3種濃度回收率（n= 3）分別為98.97%（RSD=0.34%），99.25%（RSD= 0.56%），98.92%（RSD=0.66%）;平均回收率（n=9）為99.05%;說明此方法得到的測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

3.7 轉(zhuǎn)速的選擇:取本品以水為溶劑，分別以50、75、100 r· min－1進(jìn)行試驗，溶出結(jié)果見表1，結(jié)果表明50 r·min－1溶出較慢，100 r·min－1溶出較快，故確定轉(zhuǎn)速為100 r·min－1。

3.8 溶出行為考察:取本品6片，以水900 mL為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為100 r·min－1，依法操作分別在5、15、30、45、60 min取樣測定，計算不同時間的累積溶出百分率，溶出均一性見圖2。由溶出曲線可知，本品經(jīng)30 min時，氨基比林溶出度均達(dá)到標(biāo)示量的90%以上，溶出均一性較好，故將限度訂為30 min。

表1 同一溶劑不同轉(zhuǎn)速下的溶出量（%）

圖2 溶出曲線的均一性

4 樣品的測定

取3批樣品，照上述方法測定溶出度，結(jié)果見表2。

表2 樣品測定結(jié)果（%）

5 討論

5.1 檢測波長選擇時，在200～400 nm的波長范圍內(nèi)，對鹽酸金剛烷胺與氨基比林對照溶液進(jìn)行掃描，鹽酸金剛烷胺無吸收，選擇273 nm波長測定氨基比林。

5.2 本法采用轉(zhuǎn)籃法，和漿法分別比較后綜合考慮轉(zhuǎn)籃法比較適宜，能夠在30 min內(nèi)基本全部溶出，故選擇轉(zhuǎn)籃法。

5.3不同色譜柱的選擇分別采用5種不同生產(chǎn)廠家的色譜柱進(jìn)行考察，均符合試驗要求。

5.4 此方法操作簡便，專屬性強(qiáng)，可有效的控制藥品的質(zhì)量。通過對復(fù)方金剛烷胺氨基比林片溶出度測定方法的研究，為進(jìn)一步完善復(fù)方金剛烷胺氨基比林片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了參考。

［1］國家藥典委員會.國家藥品標(biāo)準(zhǔn)第十二冊［S］，2002:201.

［2］國家藥典委員會.《中國藥典》［S］.2010年版.二部，2010:85.

［3］國家藥典委員會.《中國藥典》［S］.2010年版.二部，2010:29.

Determination of Aminopyrine in Dissolution Test for Compound Amantadine Hydrochloride Tablets by HPLC

Bai Xuemin，WEN Lili，Lü Wenjun
（Heihe Institute for Drug Control Heilongjiang，Heihe164300，China）

ObjectiveTo establish a HPLC method for determination of Aminopyrine in dissolution test for Compound Amantadine Hydrochloride Tablets.Methods Dissolution medium was water and rotating speed was.After 30 min the dissolution sample were taken and analyzed by HPLC method.Select SunfireC18（250 mm×4.6 mm，5 μm）;the mobile phase was consisted ofmethanol－water（56: 44）;the detecting wavelength was 273 nm;and flow rate was 1.0 mL/min.Results There was a good linearity in the range of 11.9～71.47 μg/mL of Aminopyrine（r=0.9999）.The average recovery of Aminopyrine was 99.05%.Conclusion The method is simple，rapid and the result is accurate and reliable.

Compound amantadine hydrochloride tablets;Aminopyrine;HPLC;Dissolution

R392－33

A學(xué)科分類代碼31099

1001－8131（2012）04－0253－02

2012－04－01