趙麗麗，朱洪權(quán)，李愛麗＊

（1.吉林大學(xué)第二醫(yī)院 神經(jīng)內(nèi)科，吉林 長春130041；2.吉林大學(xué)第二醫(yī)院 檢驗(yàn)科，吉林 長春130041）

腦梗死是目前嚴(yán)重危害老年人健康的疾病之一，具有發(fā)病率高、致殘率高、病死率高、復(fù)發(fā)率高及并發(fā)癥多的“四高一多”的特點(diǎn)，而且最近幾年腦梗死發(fā)病有明顯年輕化趨勢。目前腦梗死已嚴(yán)重威脅人類健康，對人類健康及家庭社會經(jīng)濟(jì)造成很大負(fù)擔(dān)，因此做好腦梗死的診治有著極其重要的意義。神經(jīng)營養(yǎng)因子作用于神經(jīng)系統(tǒng)，影響神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞生長、分化及存活，bFGF是其中的一種神經(jīng)營養(yǎng)因子。近年來，bFGF在腦梗死診斷方面的研究成果引起廣泛的關(guān)注。

1 bFGF的分布和生物學(xué)特性

bFGF由Gospodarowicz等［1］首先從牛腦垂體中分離純化而來，屬陽離子單鏈多肽，呈堿性，等電點(diǎn)9.6，對熱和酸敏感，酸性（pH＝2.0）或56℃條件下作用2h可使其失活。隨后，人、兔、鼠等動物體內(nèi)均被發(fā)現(xiàn)有bFGF存在，它們之間有30%－70%的同源性［2］。bFGF的分布極為廣泛，腦、心、肝、腎、腎上腺、骨、眼、胎盤等組織中均有bFGF存在，單核巨噬細(xì)胞、膠質(zhì)細(xì)胞、毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、肝細(xì)胞、星形細(xì)胞和成纖維細(xì)胞等細(xì)胞中也有分布。免疫組織化學(xué)方法測出神經(jīng)元細(xì)胞體、軸突和樹突近端、星形膠質(zhì)細(xì)胞等處均有bFGF分布［3］。高表達(dá)區(qū)是大腦半球、丘腦、嗅球；低表達(dá)區(qū)為橋腦、延髓、海馬等。在生理狀態(tài)下，血清和體液中幾乎沒有bFGF存在，但是當(dāng)腦缺血缺氧造成局部血腦屏障（Blood－brain barrier，BBB）損傷后，其通透性增加，bFGF便可以通過病變組織進(jìn)入外周血中［4］，bFGF沒有信號肽，主要以自分泌或旁分泌的形式出現(xiàn)在胞外，但也可通過細(xì)胞損傷或死亡釋放出來與其靶細(xì)胞上的受體結(jié)合而發(fā)揮作用［5］。bFGF與受體結(jié)合后通過多條信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路將信號傳入細(xì)胞核內(nèi)，參與調(diào)節(jié)靶細(xì)胞許多反應(yīng)，是許多細(xì)胞過程如生長、增殖、分化和存活的調(diào)節(jié)者。bFGF與受體結(jié)合后，啟動內(nèi)源性酪氨酸酶激活、酪氨酸的自身磷酸化。酪氨酸酶的激活屬于快速效應(yīng)，包括誘導(dǎo)肌醇磷脂（PIP2），釋放乙酸甘油和三磷酸肌醇，最后導(dǎo)致蛋白激酶的激活和胞內(nèi)Ca＋的釋放；酪氨酸自身磷酸化屬于慢性效應(yīng)，包括誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)特殊蛋白質(zhì)與受體的結(jié)合，啟動包括絲裂原激活的蛋白酶（MAPK）在內(nèi)的磷酸化級聯(lián)，最終激活轉(zhuǎn)錄因子。bFGF是一種多效能生長因子，具有對抗細(xì)胞內(nèi)鈣超載、抑制細(xì)胞凋亡，清除自由基、拮抗興奮性氨基酸毒性及抗氧化等多種生物學(xué)活性［6－8］。bFGF通過以上多種機(jī)制促進(jìn)細(xì)胞增殖分化［9－11］、組織增生和血管形成［12］，并參與炎癥反應(yīng)和創(chuàng)傷愈合［13］。

2 缺血腦組織bFGF的含量變化

有研究表明，在一側(cè)大腦中動脈永久性閉塞（MCAO）及局灶性缺血再灌注（I/R）大鼠模型中，通過免疫印跡檢測出大鼠缺血半暗帶區(qū)域bFGF表達(dá)增加，并持續(xù)到梗死后的14天。此外，本研究還表明梗死后血管內(nèi)皮生長因子（VEGF），和血管生成素 （Ang－2）也不同程度增加［14］。在人類有關(guān)腦缺血組織bFGF表達(dá)的研究也得到了相似結(jié)論，Horrigan［15］等從10例卒中后存活24h－43d的患者腦組織中取出壞死12h以內(nèi)的腦組織，用Westem blot分析研究，發(fā)現(xiàn)腦梗死組織中心和半暗帶的灰質(zhì)和白質(zhì)中bFGF的mRNA和蛋白表達(dá)，與對側(cè)正常的腦組織比較均明顯增加。石蠟包埋切片，采用間接免疫過氧化物酶染色法，結(jié)果顯示在神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞中都有bFGF的存在。用原位雜交法檢測10例患者的缺血腦組織，bFGFmRNA的集中定量表達(dá)研究發(fā)現(xiàn)，與正常形態(tài)的對側(cè)腦組織和梗死腦組織相比較，缺血半暗帶的bFGFmRNA表達(dá)顯著增高。因此，腦缺血刺激bFGF表達(dá)增加，bFGF等多種生長因子可能與梗死半暗帶特定的細(xì)胞表面受體結(jié)合，觸發(fā)信號級聯(lián)反應(yīng)，通過直接或間接途徑刺激其他神經(jīng)營養(yǎng)因子合成釋放，參與腦梗死的病理生理過程［16］。

3 bFGF通過血腦屏障的機(jī)制

劉穎［17］等采用抗BBB抗體的免疫組化方法顯示大鼠持續(xù)性局灶性腦缺血（pMCAO）后不同時(shí)間BBB結(jié)構(gòu)的改變。采用125I標(biāo)記bFGF示蹤法顯示靜脈注射125I－bFGF后腦組織C射線計(jì)數(shù)變化表示bFGF通透性的變化。結(jié)果顯示在動脈栓塞后0.5 h抗BBB免疫組化染色顯示毛細(xì)血管壁的結(jié)構(gòu)已發(fā)生改變，即使到了14d時(shí)大量新生毛細(xì)血管出現(xiàn)在梗死區(qū)周圍，但是抗BBB抗體免疫組化仍為陰性，表明此時(shí)血管壁尚未達(dá)到完全修復(fù)。從梗死后2h開始125I－bFGF通透有明顯的增加，持續(xù)到梗死后14d，125I－bFGF主要出現(xiàn)在基底節(jié)及梗死累及的島葉和頂葉皮層.這也從相反的角度證明，當(dāng)腦缺血缺氧造成BBB損傷后，其通透性增加，bFGF便可以通過受損BBB進(jìn)入外周血中，因此檢測外周血清bFGF水平有助于腦梗死的診斷。

4 腦梗死患者血清bFGF的含量變化

宋水江［18］等采用酶聯(lián)免疫吸附法（EL1SA）檢測55例急性期腦梗死患者和32例其他疾病對照組患者及30例健康人為對照組測量血清bFCF含量，結(jié)果顯示，腦梗死患者血清bFGF水平明顯增高，且與梗死灶大小關(guān)系密切，恢復(fù)期時(shí)血清bFGF水平雖較急性期明顯下降，但與健康對照組和其他疾病對照組相比，差異仍顯著。此后有學(xué)者進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，腦梗死發(fā)病24h內(nèi)患者血清bFGF水平較對照組明顯增高，且在第3天達(dá)到高峰，并維持相對高值達(dá)14天，此外，根據(jù)腦梗死患者梗死灶的大小不同，將腦梗死患者分為三組，同時(shí)研究結(jié)果表明，患者血清bFGF水平與梗死灶大小程正相關(guān)［19］，這一方面可能與血管內(nèi)皮損傷后血管平滑肌細(xì)胞死亡而導(dǎo)致上調(diào)表達(dá)的bFGF釋放有關(guān)；另一方面，缺血區(qū)細(xì)胞上調(diào)表達(dá)bFGF，而血腦屏障的破壞可使梗死灶及其周圍細(xì)胞上調(diào)表達(dá)的bFGF，由于細(xì)胞死亡或亞急性損傷而釋放增加，而病灶越大血腦屏障破壞越嚴(yán)重、激活的膠質(zhì)細(xì)胞也越多。腦梗死患者血清中bFGF含量動態(tài)變化說明bFGF在腦梗死的病理生理中承擔(dān)著重要角色，監(jiān)測內(nèi)源性bFGF的含量變化有助于疾病的診斷及病情程度的預(yù)判。

5 腦缺血和腦梗死對血清bFGF含量的影響

李建生［20］等學(xué)者曾做如下研究：將青年SD大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分組，老齡SD大鼠按體重分層隨機(jī)法分組，分為假手術(shù)組，缺血（I）3h，I/R1、3、6、12d組，每組6只，采用免疫祖化法測定各組大鼠腦中bFGF蛋白表達(dá)程度，結(jié)果顯示，青年和老年組bFGF蛋白表達(dá)同步增強(qiáng)，I/R3d達(dá)峰值后逐漸減弱，老齡組I/R6dbFGF蛋白表達(dá)與青年組同時(shí)間點(diǎn)無差異外，余各組時(shí)間點(diǎn)bFGF的蛋白表達(dá)均較青年組明顯減弱。牛麗紅［21］將急性腦梗死患者90例按入院時(shí)血糖、口服糖耐量試驗(yàn)（oral glucose tolerance test，OGTT）及糖尿病史等分為糖尿病性急性 腦 梗 死 組 （Diabetes－Acute cerebral infarction group，DACI組）；糖調(diào)節(jié)異常性急性腦梗死組（Impaired glucose regulation一Acute cerebral infarction group，IGACI組）；正常血糖性急性腦梗死組（Normal blood glucose－Acute cerebral infarction group，NGACI組），各組均30例。對急性腦梗死各組及正常對照組（Normal－Control group，NC組）30例均采用ELISSA檢測其外周血清中bFGF的含量，來比較DACI組、IGACI組、NGACI組及NC組血清bFGF表達(dá)水平的差異。結(jié)果顯示DACI組、IGACI組、NGACI組較NC組血清bFGF水平顯著升高，說明腦缺血可以誘導(dǎo)bFGF表達(dá)增強(qiáng)，這符合動物實(shí)驗(yàn)結(jié)論；DACI組、IGACI組血清bFGF水平無顯著性差異，說明bFGF表達(dá)水平與血糖水平無顯著相關(guān)性；DACI組、IGACI組血清bFGF水平顯著低于NGACI組，說明高血糖可加重急性腦梗死，造成bFGF的表達(dá)不足。有研究發(fā)現(xiàn)，無論在急性期還是恢復(fù)期，有高血壓史腦梗死組與無高血壓史腦梗死組之間bFGF水平差異無明顯，相關(guān)分析提示血清bFGF含量與血脂無明顯相關(guān)性，這表明bFGF與高血壓、高血脂關(guān)系不密切［18］。這提示我們應(yīng)用bFGF評價(jià)腦梗死嚴(yán)重程度時(shí)，需要考慮到患者年齡、性別、基礎(chǔ)疾病、免疫力及其他狀況，不同病理生理狀態(tài)的腦梗死患者其血清bFGF升高幅度可能有差異，因某些因素都可能影響患者血清bFGF水平。

5 無癥狀性腦梗死

無癥狀性腦梗死［22］包括無臨床短暫性腦缺血發(fā)作或腦梗死病史，而CT或（和）MRI等影像學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)有腦梗死灶，或有臨床腦梗死病史，但CT或（和）MRI發(fā)現(xiàn)了與臨床表現(xiàn)無關(guān)的非責(zé)任病灶。對于無癥狀性腦梗死，我們是否可以在適當(dāng)時(shí)間點(diǎn)通過檢測血清bFGF來及時(shí)診斷本病，提高腦梗死患者檢出率，進(jìn)而早期治療，延緩病情進(jìn)展，提高患者生活質(zhì)量，這還需進(jìn)一步研究。

6 展望

隨著臨床研究進(jìn)展，血清bFGF含量在腦梗死診斷方面的應(yīng)用價(jià)值不斷被重視。血清bFGF檢測方便易行，為不便行頭部CT或MRI檢查患者提供了另一種檢測方法，也為判斷腦梗死病人是否為急性期階段提供了一個(gè)新的臨床指標(biāo)。盡管目前單一的使用bFGF診斷腦梗死的體系還沒有建立起來，但其在腦梗死診斷及病情評估方面有很好的應(yīng)用前景。因此，有必要進(jìn)行深入細(xì)致的研究，以進(jìn)一步明確血清bFGF在腦梗死診斷方面的標(biāo)準(zhǔn)及嚴(yán)重程度分級。

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