汪小慶，周德群，張小雷，李樹(shù)紅**

（1.云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)與種質(zhì)資源研究所，云南 昆明 650223；2.昆明理工大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院，云南 昆明 650093）

離褶傘屬（Lyophyllum P.Karst，1881）隸屬于擔(dān)子菌門（Basidomycota）、傘菌綱（Agariomycetes）、傘菌目（A－garicales）、離褶傘科 （Lyophyllaceae）[1]。全球該屬真菌已有239個(gè)記錄名稱，我國(guó)有19個(gè)種[2]。離褶傘真菌是典型的具褶類群，廣泛分布于世界各地。該屬真菌大多數(shù)種既具有食用價(jià)值又具有較高的藥用價(jià)值，如L.decastes、L.shimeji和L.fumosum等都是美味的食用菌，L.decastes和L.semitale等也具有抗腫瘤活性和降低血糖的作用[3,4]。國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)其進(jìn)行了許多的研究，但闡述該屬真菌自然分類系統(tǒng)及該屬和屬下各分類單元系統(tǒng)位置的文獻(xiàn)比較少。本文綜述了離褶傘屬的分類研究概況，對(duì)該屬真菌分類研究進(jìn)行了展望。

1 離褶傘屬真菌的分類研究概況

1.1 國(guó)外離褶傘屬真菌的分類研究

離褶傘屬真菌的分類一直以來(lái)都備受爭(zhēng)議，國(guó)內(nèi)外學(xué)者就其分類問(wèn)題的研究也從未間斷。國(guó)外自Karsten開(kāi)始，對(duì)離褶傘屬真菌的研究從未間斷過(guò)。離褶傘屬的形態(tài)分類研究主要依據(jù)子實(shí)體的外部形態(tài)特征和內(nèi)部顯微特征。外部形態(tài)特征主要包括子實(shí)體中等至大型，肉質(zhì)；叢生或單生；菌褶白色，直生或短延生[5]；顯微特征主要包括孢子、擔(dān)子和囊狀體的形狀、大小，以及它們?cè)诨瘜W(xué)試劑中的特征及顏色變化。最初，擔(dān)子的嗜鐵鹽特性和產(chǎn)白色嗜藍(lán)孢子[6]是作為離褶傘屬分類的重要依據(jù)[7]。Singer根據(jù)子實(shí)體生長(zhǎng)習(xí)性以及傷變特性[6]，將離褶傘屬真菌劃分為3個(gè)組：子實(shí)體受傷后變黑的種劃分為sect.Lyophyllum；子實(shí)體受傷后不變色，形狀介于口蘑形和杯傘形之間的種劃分為sect.Difformia；形狀近似金錢菌形的種劃分為sect.Tephrophana。而對(duì)于該屬下組的劃分，不同的學(xué)者有不同的觀點(diǎn)，例如Moser認(rèn)為應(yīng)把Tephrophana組提升到屬的水平（Tephrocybe屬）[8]，Bon則認(rèn)為應(yīng)該把Tephrophana組提升到科的水平（Tephrocybeae）[9]。如L.carbonarium后來(lái)被命名為T.anthracophilum，而根據(jù)新的命名法則，又將其改為L(zhǎng).carbonarium；L.palustris目前的合法名稱為T.palustris。Moncalvo等根據(jù)菌落培養(yǎng)特征提出，根據(jù)形態(tài)特征原歸于Lyophyllum組下的L.semitale和Tephrophana組下的L.atratum兩個(gè)種，其菌落培養(yǎng)特征更接近于Difformia組的菌落培養(yǎng)特征，且得到了相應(yīng)分子數(shù)據(jù)的支持[10]。Difformia組所涉及的種隨著研究的深入，研究者認(rèn)為該屬僅包括L.decastes complex，而且結(jié)合培養(yǎng)特征認(rèn)為此復(fù)合群至少有5個(gè)分類單元[11]。飽受爭(zhēng)議的L.connatum，因菌褶遇FeSO4變色且孢子成橢圓形曾被排除于Lyophyllum屬而歸于杯傘屬，但最終的合法名稱又改為L(zhǎng).connatum[12,13]。由于環(huán)境可塑性以及趨同進(jìn)化，相同物種在形態(tài)上可能存在較大差異性，或者不同物種在形態(tài)上頗為相似，這給形態(tài)分類工作帶來(lái)較大的困難，致使原來(lái)作為分類依據(jù)的形態(tài)學(xué)特征可能受到挑戰(zhàn)，分類學(xué)家也試圖尋找新的分類特征[14]。Buchalo和Diduk在顯微鏡下研究了離褶傘屬的菌絲飾紋，發(fā)現(xiàn)這個(gè)形態(tài)特征可能會(huì)成為形態(tài)分類中較好的特征，但由于需要專門技術(shù)以及高昂的研究費(fèi)用，該研究最終也沒(méi)有得到更多的關(guān)注[15]。Hofstetter等[16]提出，生態(tài)環(huán)境在離褶傘分類中沒(méi)有得到有效利用，該觀點(diǎn)也得到了Matheny等[17]的認(rèn)同。關(guān)于離褶傘屬組下物種的分類地位更是時(shí)有變動(dòng)，即使是作為模式種的L.leucophaeatum，它的形態(tài)特征更接近麗蘑屬，因此國(guó)際命名委員會(huì)提議將L.semitale作為該屬的模式種[18]。

關(guān)于離褶傘屬擔(dān)子具有嗜鐵鹽顆粒的特征也受到挑戰(zhàn)?；陔x褶傘屬真菌擔(dān)子上具有嗜鐵鹽顆粒和產(chǎn)白色嗜藍(lán)孢子的特性而與其他口蘑類真菌區(qū)分開(kāi)來(lái)，獨(dú)立成屬。但是隨著研究的深入，研究人員發(fā)現(xiàn)Tricholoma和Termitomyces中的很多種都具此特征，鑒于分子和形態(tài)特征，Bon將L.favrei和L.ochraceum移至麗蘑屬[19]。

1.2 國(guó)內(nèi)離褶傘屬真菌的分類研究

從1973至今，我國(guó)有許多的科技工作者在菌種分離、生理學(xué)及馴化栽培等方面展開(kāi)過(guò)廣泛的研究，以期實(shí)現(xiàn)工廠化人工栽培，但進(jìn)展不快，這與人們對(duì)該屬真菌種質(zhì)資源遺傳背景認(rèn)識(shí)不清晰有關(guān)[20]。在分類學(xué)方面，偶見(jiàn)零星報(bào)道。據(jù)報(bào)道我國(guó)離褶傘屬真菌有19種，但在對(duì)這些種名進(jìn)行考證時(shí)發(fā)現(xiàn)，有的作者引用了過(guò)時(shí)的名稱，按照新的分類系統(tǒng)，這些名稱已不再使用；有的作者引用的是其它種類的同物異名，按最新國(guó)際植物命名法規(guī)要求，這類名稱已被其它合法名稱替代[21]，如L.aggregatum目前的合法名稱為L(zhǎng).decastes，L.fallax目前的合法名稱為C.fallax，L.ulmarium目前的合法名稱為Hypsizygus tessulatus。到目前為止，國(guó)內(nèi)仍然沒(méi)有任何一家單位和個(gè)人針對(duì)中國(guó)離褶傘屬真菌進(jìn)行系統(tǒng)學(xué)研究。

2 離褶傘屬的分子分類研究

近些年隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，生物學(xué)技術(shù)得到廣泛應(yīng)用，基因或者基因片段用于構(gòu)建物種系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)和物種鑒定受到重視。隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA（RAPD）、擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性（ALFP）、核糖體內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)（ITS）、核糖體大亞基（nrLSU）、線粒體小亞基（mtSSU）等分子標(biāo)記技術(shù)在離褶傘屬真菌的分類研究上運(yùn)用比較廣泛[16,22]。李林玉等通過(guò)對(duì)云南離褶傘屬資源遺傳多樣性的RAPD分析表明，離褶傘屬真菌不但具有種間多樣性還具有種內(nèi)遺傳多樣性[22]。Moncalvo等基于ITS和培養(yǎng)特征對(duì)離褶傘屬下的Difformia組進(jìn)行系統(tǒng)學(xué)研究，結(jié)果表明，Difformia組不是單系群[10]。 Hofstetter等利用ITS、nrLSU、mtSSU基因片段，通過(guò)獨(dú)立和聯(lián)合分析法，對(duì)離褶傘科的系統(tǒng)發(fā)育做了研究，結(jié)果表明，離褶傘科是復(fù)系群；離褶傘屬及屬下的Difformia、 Lyophyllum、Tephrophana都是復(fù)系群，不是自然的分類階元；離褶傘屬與麗蘑屬的自然分類界限不清晰[14]。

3 存在的主要問(wèn)題及展望

就我國(guó)目前關(guān)于離褶傘屬真菌的分類研究而言，總體來(lái)說(shuō)是滯后且存在較多的問(wèn)題。首先，國(guó)內(nèi)對(duì)該屬真菌的研究主要集中在生理學(xué)及馴化栽培等方面，尚未有人做過(guò)專屬性的研究工作，文獻(xiàn)中對(duì)該屬真菌鑒別的描述過(guò)于簡(jiǎn)單，不利于物種的鑒別；其次，該屬真菌同物異名的現(xiàn)象較為普遍，誤定及未定名的現(xiàn)象也時(shí)有發(fā)生；再者，該屬真菌現(xiàn)有的分類單元不能充分反映我國(guó)離褶傘屬真菌的資源多樣性。根據(jù)國(guó)外的研究現(xiàn)狀，離褶傘屬組及組下物種的劃分仍是比較具有爭(zhēng)議的。分類學(xué)界限不同，反映出分類學(xué)家對(duì)重要分類學(xué)特征觀點(diǎn)的分歧，因此需要更加自然的分類系統(tǒng)，更好的反映離褶傘屬真菌資源及其多樣性。作為形態(tài)分類研究，人為主觀性的存在是很難避免的一個(gè)問(wèn)題，而多數(shù)離褶傘屬真菌的形態(tài)特征界限不是很清晰，這就容易導(dǎo)致種名的誤定。相比形態(tài)學(xué)的分類研究，分子分類相對(duì)更方便、快捷，但GenBank中離褶傘屬真菌的序列不夠完善，很多種甚至沒(méi)有相應(yīng)的序列或完整序列，這給進(jìn)一步的分類和系統(tǒng)學(xué)研究帶來(lái)很大的困難。

我國(guó)多元的生態(tài)氣候孕育了豐富的離褶傘屬真菌資源，這便于研究材料的采集，有助于該類群的分類研究。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展并與形態(tài)分類結(jié)合應(yīng)用，將有利于修正誤定的分類單元名稱，澄清離褶傘屬真菌分類上的混亂，完善離褶傘屬分類系統(tǒng)，切實(shí)反映我國(guó)離褶傘屬真菌資源的物種多樣性和獨(dú)特性。

[1]Kirk PM,Cannon PF,Minter DW,et al.Dictionary of the fungi 10th edition[M].Trombridge：Cromwell Press,2008.

[2]李曉，李玉.中國(guó)離褶傘屬真菌研究進(jìn)展[J].食用菌學(xué)報(bào)，2009,16(3)：75-79.

[3]Ukawa Y,Hisamatsu M,Ito H.Antitumor effects of(1→3)-beta-D-glucan and (1→6)-beta-D-glucan purified from newly cultivated mushroom,Hatake shimeji(Lyophyllum decastes Sing.)[J].J.Biosci.Bioeng.,2000,90 (1):98-104.

[4]陳芝蘭，何建清，唐曉琴.墨染離褶傘的分離培養(yǎng)試驗(yàn)初報(bào)[J].食用菌，2003，25(6)：12-27.

[5]Singer R.The Agaricales in modern taxonomy:3nd edncramer[M].Vaduz：Cramer,1975.

[6]Singer R.The Agaricales in modern taxonomy：4th edn[M].K?nigstein:Koeltz Scientific Books,1986.

[7]Clémencon,H.Type studies and typifications in Lyophyllum(Agaricales).I.Staining species[J].Mycotaxon,1982(15)：67-94.

[8]Moser M.Die Rhrlinge und Bl?tterpilze:5th Edition[M].Stuttgart:G-ustav Fischer,1983.

[9]Bon M.Flore mycologique d’Europe(5).Les collybio-marasmio?-des et ressemblants[J].Documents mycologiques-mémoires hors série,1999,5 （1）：87-132.

[10]Moncalvo JM,Rehner SA,Vilgalys R.Systematics of Lyophyllum section Difformia based on evidence from culture studies and ribosomal DNA sequences[J].Mycologia,1993,85(5):788-794.

[11]Moncalvo JM,Clémenξon H.Enzymic studies as an aid to the taxonomy of the Lyophyllum decastes complex[J].Mycological Research,1994,98 (4):375-383.

[12]Moncalvo JM,Vilgalys R,Redhead SA,et al.One hundred and seventeen clades of euagarics[J].Molecular Phylogenetics and Evolution,2002,23(3):357-400.

[13]Maeta K,Koike A,Mukaiyama H,et al.Preparation and crossing of mating-capable monokaryons via protoplasting of the dikaryotic mycelia of a mycorrhizal mushroom,Lyophyllum shimeji[J].Journal of Wood Science,2008,54(4):337-340.

[14]Avise JC,Robinson TJ.Hemiplasy:A new term in the lexicon of phylogenetics[J].Systematic Biology,2008,57 (3):503-507.

[15]Buchalo AS，Diduk MY.Micromorphological Characteristics of culinary-medicinal mushroom and fungi cultures[J].International Journal of Medicinal Mushrooms,2005,7(12):249-261.

[16]Hofstetter V,Clemencon H.Phylogenetic analyses of the Lyophylleae(Agaricales,Basidiomycota)based on nuclear and mitochondrial rDNA sequences[J].Mycological Research,2002,106(9):1043-1058.

[17]Matheny PB,Curtis JC,Hofstter V,et al.Major clades of Agaricales:a multilocus phylogenetic overview[J].Mycologia,2006,98(6):982-995.

[18]Norvell LL.Report of the nomenclature committee for fungi:15[J].Taxon,2010,59(3):291-293.

[19]Bon M.Tricholomatales (Marasmiaceae,Lyophyllaceae et Dermolomataceae)[J].Documents Mycologiques,1999,29 (fasc.115):33-34.

[20]魏生龍，王治江，于海萍，等.荷葉離褶傘生物學(xué)特性研究[J].菌物學(xué)報(bào)，2006，25(1)：101-108.

[21]戴玉成，楊祝良.中國(guó)藥用真菌名錄及部分名稱的修訂[J].菌物學(xué)報(bào)，2008，27(6)：801-824.

[22]李林玉，李榮春，金航，等.云南離褶傘屬資源遺傳多樣性的RAPD分析[J].菌物學(xué)報(bào)，2005（24）：78-81.