涂小紅 黃玉婷 蔡粵川 何躍 彭順林

慢性咽炎是一種臨床常見病、多發(fā)病,是咽部黏膜、黏膜下組織及淋巴組織的慢性炎癥。屬上呼吸道感染的一部分,臨床發(fā)病率高,易反復(fù)發(fā)作。動物模型作為人類疾病的替身在藥物療效評價上擔當著非常重要的角色,為了使動物模型與人類的疾病具有更高的臨床相似性,實驗動物的選擇、模型的建立及標本的制備就顯得格外重要。導(dǎo)師彭順林教授采用氨水和松節(jié)油復(fù)合因素塑造日本大耳白家兔慢性咽炎動物模型的方法,符合慢性咽炎動物模型的生物學(xué)特征,被廣泛應(yīng)用于咽炎動物模型的制備,現(xiàn)將彭順林教授的咽炎造模法與其他慢性咽炎造模法總結(jié)如下:

1 彭順林教授關(guān)于慢性咽炎獨特的造模方法

1.1 造模方法

彭順林[2]教授選用日本大耳白家兔為實驗動物,隨機分組后,造模組與實驗組第1 ～ 15 日均用2.5%氨水噴咽部,在第8 日于兔咽部粘膜下注射0.5mL 松節(jié)油。造模組于造模的第16日處死;自然恢復(fù)組第16 ～ 25 日讓其自然恢復(fù),第26日處死;治療組第16～25日咽部噴治療藥物,第26日處死;空白對照組第1～15日用蒸餾水(與造模組同體積)噴咽部,第16～25用蒸餾水噴咽部,第26日處死。

1.2 標本的制備

將家兔股動脈放血處死后,取咽部組織立即投入10%甲醛液內(nèi)固定,繼之經(jīng)由低到高各級酒精脫水,二甲苯透明,石蠟包埋連續(xù)切片(厚度6 üm),每10 張隨機取樣片一張,每只動物標本共計3 張,然后脫蠟染色,HE、常規(guī)蘇木精、伊紅染色,在光學(xué)顯微鏡下觀察。[2]

2 其他有關(guān)慢性咽炎的造模方法

關(guān)于慢性咽炎造模大多采用氨水噴咽、松節(jié)油咽部粘膜下注射的方法,在造模過程中,實驗者根據(jù)自己的需求調(diào)整氨水的濃度,每次使用的劑量及造模時間。而實驗組基本采用蒸餾水或生理鹽水噴咽。王潁[1]用2.5%氨水噴兔咽部1 次,每次用噴霧器噴3 撳(每撳約0.08ml);空白對照組噴3撳生理鹽水,各組均連續(xù)噴13天。造模第8天,除空白對照組外,其余各組大鼠用扁桃體注射針將松節(jié)油注射于兔咽部黏膜下,每只動物注射0.5ml。造模第14天,兔咽部組織呈慢性充血狀態(tài),暗紅色、黏液性分泌物增多,明顯腫脹為造模成功。高瑞寧[3]組用喉頭噴霧器于動物咽部噴15%氨水,每次噴3掀,每天上、下午各1次,連續(xù)3 d,造成急性咽炎模型?？瞻讓φ战M動物噴等量蒸餾水。于第4天各組動物按表1劑量相應(yīng)給藥,每天1次,連續(xù)3 d天。第7 d斷尾取血涂片,各組動物取血涂片后,股動脈放血處死動物,立即取咽部黏膜及其下組織,進行肉眼觀察,并10%中性福爾馬林溶液固定,進行病理組織學(xué)檢查。

3 體會與展望

本人跟隨導(dǎo)師彭順林教授坐診兩年余,診治咽炎患者上千例,其中以慢性咽炎者居多,以異物感、咽干、咽癢、咽痛、咳嗽、咳痰為主,病情易反復(fù)發(fā)作,遷延不愈。雖不危及生命,但卻不同程度影響患者的工作、學(xué)習及生活。近年來,醫(yī)家對咽炎模型的實驗研究較多,但大多都在彭氏[2]造模法的基礎(chǔ)上進行改造創(chuàng)新,彭氏造模法即用氨水在咽部噴霧和松節(jié)油在其粘膜下注射的方法研制慢性咽炎的動物模型。氨水是堿性刺激物質(zhì),局部噴霧能刺激咽部粘膜,使之充血水腫,反復(fù)刺激能使粘膜逐漸轉(zhuǎn)化為慢性炎癥。松節(jié)油是一種油質(zhì)化學(xué)因子,在咽粘膜下注射,讓組織對其緩慢吸收,能達到對咽局部持續(xù)刺激的作用,符合人慢性咽炎的發(fā)病因素。故未來我們在慢性咽炎造模方式上可繼續(xù)采用彭氏造模法,并不斷完善及創(chuàng)新,使其更符合人類發(fā)病特征。

[1] 王潁.陳皮利咽合劑對慢性咽炎模型家兔全血黏度咽黏膜的影響[J].中醫(yī)雜志2013,6(54):12.

[2] 彭順林,鐘渠,熊大經(jīng),等.慢性咽炎動物模型研究[J].成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,1999,22(1):51.

[3] 高瑞寧.清咽噴霧劑對急性咽炎治療作用的實驗研究[J].中醫(yī)研究,2009,22(1).