賈立偉

(吉林省輝南縣動物疫病預(yù)防控制中心，吉林通化 135100)

2012年11月，吉林省輝南縣某豬場，在育肥豬中發(fā)生了以體溫升高、呼吸困難、具有肺炎和胸膜炎典型癥狀和病變的傳染病。本人進(jìn)行了病原分離鑒定，防治措施有效。

1 病料采集及準(zhǔn)備

采集重癥患豬的肺臟、淋巴結(jié)作為病料，特制的牛心浸汁瓊脂平板(含10%滅能的馬血清及100ug/ml NAD)，特制的牛心浸汁液體培養(yǎng)基(含10%滅能的馬血清及100ug/ml NAD)、微量發(fā)酵管等作為培養(yǎng)基及設(shè)備。

2 分離鑒定

2.1 細(xì)菌分離培養(yǎng)

將病料接種于特制的牛心浸汁瓊脂平板，置燭缸內(nèi)，37℃培養(yǎng)24 h，觀察培養(yǎng)結(jié)果。(1)取純培養(yǎng)的菌落，涂片作常規(guī)革蘭氏染色鏡檢。(2)在一系列生化培養(yǎng)基中加入NAD，接入濃厚待檢菌，37℃培養(yǎng)18 h，觀察結(jié)果。(3)用不加入NAD和馬血清的牛心浸汁瓊脂平板，將待檢物均勻涂布于瓊脂面上，用能夠產(chǎn)生生長因子的金黃色葡萄球菌菌株培養(yǎng)物劃線接種，37℃培養(yǎng)過夜，觀察衛(wèi)星生長現(xiàn)象。(4)在加NAD的牛心浸汁瓊脂培養(yǎng)基中加入5%脫纖綿羊血制成平板，接種培養(yǎng)物后經(jīng)37℃培養(yǎng)18 h，觀察溶血情況。

2.2 藥敏試驗(yàn)

將菌落用滅菌生理鹽水洗脫，取0.2ml，在特制的牛心浸汁瓊脂平板上均勻涂布，選用氟苯尼考，強(qiáng)力霉素，恩諾沙星。青霉素。丁胺卡那霉素，環(huán)丙沙星，泰樂菌素7種藥敏紙片均勻貼在平板上，置37℃培養(yǎng)24h，觀察抑菌環(huán)大小。

3 結(jié)果

3.1 細(xì)菌的分離培養(yǎng)

見有1～1.5mm圓形、中間凸起、邊緣整齊、灰白色半透明粘液型菌落。

3.2 形態(tài)學(xué)檢查

分離菌株24 h培養(yǎng)物為革蘭氏染色陰性，兩極著染略深的小球桿菌。

3.3 生化試驗(yàn)結(jié)果

該分離菌株對葡萄糖、麥芽糖、蔗糖和果糖發(fā)酵產(chǎn)酸，尿素酶試驗(yàn)陽性反應(yīng)呈粉紅色，可在濃厚菌接種后8 min出現(xiàn)，隨后越來越明顯。

3.4 衛(wèi)星生長現(xiàn)象

金黃色葡萄球菌生長線附近生長較好，離線越遠(yuǎn)生長越差。

3.5 溶血試驗(yàn)

該分離菌株為典型的β溶血。

3.6 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

高度敏感的有氟苯尼考、強(qiáng)力霉素；中度敏感的有丁胺卡那霉素、泰樂菌素；低敏感的有恩諾沙星、環(huán)丙沙星、青霉素。

綜合臨床癥狀及實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果，確診為豬傳染性胸膜肺炎。

4 綜合防治措施

(1)該病主要通過空氣傳播，合理調(diào)節(jié)飼養(yǎng)密度，搞好豬舍環(huán)境衛(wèi)生保持良好的通風(fēng)和適宜的溫度，也是預(yù)防豬傳染性胸膜肺炎發(fā)生的重要因素。

(2)治療方法。使用自家血清同時(shí)配合敏感抗生素治療效果良好：自家血清制備用已康復(fù)的病豬屠宰時(shí)無菌操作采集血清，將血清進(jìn)行滅活細(xì)菌、病毒脫毒處理，并做無菌檢驗(yàn)和動物試驗(yàn)。

(3)預(yù)防措施。使用自家油乳劑滅活苗預(yù)防效果良好：自家疫苗制備方法 ①用分離菌種接種于特制的牛心浸汁液體培養(yǎng)基37℃100r/min的搖床震蕩培養(yǎng)過夜，使菌液的含菌量為5.0×109個(gè)/ml，加入0.2%的福爾馬林充分混勻，37℃滅活48h，加適量tween80成水相。②將10號白油，span80/硬脂酸鋁按一定比例混合15磅、30min高壓滅菌即為油相，將油相加入高速組織搗碎機(jī)，然后緩慢加入一定量的細(xì)菌液乳化5min，分裝密封即可。