卓 琦

吉首大學(xué) 城鄉(xiāng)資源與規(guī)劃學(xué)院武陵山區(qū)動物種質(zhì)資源研究所，湖南 張家界 427000

腫瘤轉(zhuǎn)移抑制因子Kisspeptin又稱親吻素或吻素，其前身又稱Metastin，是kiss基因所編碼的多肽產(chǎn)物，屬神經(jīng)內(nèi)分泌多肽激素。在脊椎動物中，具多個功能性配體。該激素最早由Lee et al（1996，1997）發(fā)現(xiàn)于乳腺癌細(xì)胞和黑色素瘤細(xì)胞系。1999年，編碼G蛋白偶聯(lián)受體-54（G protein-coupled receptor-54, GPR54）的gpr54基因相繼在大鼠和人類中被確認(rèn)，同時還確立了Kisspeptin為GPR54受體的天然配體（Kotani et al, 2001; Lee et al, 1999; Muir et al, 2001）。然而，該激素在脊椎動物生殖中的作用7年后才浮出水面。2003年，國外報道了Kisspeptin受體GPR54突變將導(dǎo)致小鼠喪失生殖功能，并引發(fā)低促性腺激素性功能減退癥，與此同時，敲除小鼠kiss或gpr54均將對下丘腦—垂體—性腺軸（BPG軸）功能造成嚴(yán)重影響，從而確立了Kisspeptin/GPR54系統(tǒng)在脊椎動物生殖中的重要地位（Funes et al,2003; Seminara, 2003; d’ Anglemont et al, 2007;Lapatto et al, 2007）。之后，Kisspeptin/GPR54系統(tǒng)成為了脊椎動物生殖內(nèi)分泌研究的熱點。研究者最早從人類中確立了Kisspeptin的4種成熟肽，即kisspeptin-54、-14、-13、-10，并認(rèn)為這4種成熟肽具有相同的生物活性（Kotani et al, 2001; Muir et al,2001; Ohtaki et al, 2001）。隨后又有學(xué)者報道了Kisspeptin-12和Kisspeptin-15的存在（Lee et al,2009）。Kisspeptin神經(jīng)元主要定位于弓狀核及前腹側(cè)室旁核，并發(fā)出軸突支配表達(dá)gpr54的GnRH神經(jīng)元（Irwig et al, 2005; Matsui et al, 2004）。

Kisspeptin/GPR54系統(tǒng)的發(fā)現(xiàn)極大地促進(jìn)了人們對生殖內(nèi)分泌調(diào)控的認(rèn)識，其中包括青春期啟動的分子定時、性類固醇激素對促性腺激素分泌的正/負(fù)反饋調(diào)控、性別二態(tài)性的發(fā)生機制、季節(jié)性繁殖的生殖內(nèi)分泌調(diào)控以及能量平衡和生殖的整合（Kauffman et al, 2007; Popa et al, 2008）等。本文綜合現(xiàn)有研究資料，就Kisspeptin調(diào)控魚類生殖內(nèi)分泌的研究進(jìn)行總結(jié)。

1 Kisspeptin在魚類生殖內(nèi)分泌調(diào)控中的研究概況

Kisspeptin/GPR54系統(tǒng)對魚類生殖神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)控的研究起步較晚。Parhar et al（2004）首次報道了gpr54和gnrh在羅非魚（Oreochromis niloticus）神經(jīng)元中存在共表達(dá)，為Kisspeptin/GPR54參與魚類生殖調(diào)控和青春期啟動，及其與促性腺激素釋放激素（GnRH）間存在的緊密聯(lián)系提供了第一證據(jù)。van Aerle et al（2008）首次采用生物信息學(xué)手段于斑馬魚（Danio rerio）、紅鰭東方鲀（Takifugu rubripes）、青斑河豚（Tetraodon nigroviridis）、青鳉（Oryzias latipes）及七鰓鰻（P. marinus）中確認(rèn)了kiss1基因及其表達(dá)產(chǎn)物Kiss1，Kanda et al（2008）又對青鳉kiss1基因及其表達(dá)產(chǎn)物Kiss1進(jìn)行了功能研究。還有學(xué)者分別從斑馬魚、青鳉以及歐洲海鱸（Dicentrarchus labrax）中鑒定了編碼Kisspeptin的兩種 kiss基因的存在并分別命名為 kiss1和 kiss2（Kitahashi et al, 2009; Felip et al, 2009），kiss2 表達(dá)產(chǎn)物 Kiss2多肽能夠刺激性成熟雄性斑馬魚垂體LHβ-亞單位和 FSHβ-亞單位 mRNA 的表達(dá)（Kitahashi et al, 2009）。Li et al（2009）對金魚（Carassius auratus）kisspeptin/GPR54的結(jié)構(gòu)與功能多樣性進(jìn)行了研究。Felip et al（2009）在歐洲海鱸中發(fā)現(xiàn)，Kiss1和Kiss2均可誘導(dǎo)LH和FSH的分泌。與此同時，魚類GPR54的兩種gpr54基因及其

表達(dá)受體也在斑馬魚中被確認(rèn)（Biran et al, 2008）。然而，單一魚類兩種配體及其兩種同源受體之間的相

互作用尚缺乏系統(tǒng)研究。到目前為止，斑馬魚（van Aerle et al, 2008; Kitahashi et al, 2009）、紅鰭東方

鲀、青斑河豚（van Aerle et al, 2008）、青鳉（Kanda et al, 2008; Kitahashi et al, 2009）、金魚（Li et al, 2009;Servili et al, 2011）、星點東方鲀（Takifugu niphobles）（Shahjahan et al, 2010）、斜帶石斑魚（Epinephelus coioides）（Shi et al, 2010）、日本鯖（Scomber japonicus ）（Selvaraj et al, 2010）、條紋鱸（Morone saxatilis ）（Zmora et al, 2012）、歐洲海鱸 （ Felip et al, 2009; Migaud et al, 2012）、塞內(nèi)加爾鰨（Solea senegalensis）（Mechaly et al, 2012）及刺魚（stickleback）編碼Kisspeptin的基因已被分離得到，所有這些魚類均具有kiss2，而斑馬魚、青鳉、金魚、條紋鱸、歐洲海鱸和日本鯖則同時還具有 kiss1（Felip et al, 2009; Kitahashi et al, 2009; Servili et al,2011; Yang et al, 2010）。還有證據(jù)顯示，kiss1和kiss2亦存在于軟骨魚類姥鯊（Callorhinchus milii）及七

鰓鰻中（Um et al, 2010），而在塞內(nèi)加爾鰨還檢測到了通過不同剪接方式形成的兩種 kiss2轉(zhuǎn)錄本亞型。此外，在非洲爪蟾（Xenopus tropicalis）中發(fā)現(xiàn)了 3種形式的 kiss基因，而在綠安樂蜥

（Anolis carolinensis）中僅發(fā)現(xiàn)了 kiss2的存在

（Akazome et al, 2010; Felip et al, 2009; Um et al,2010）。

2 Kisspeptin在魚類中的分布和定位

表達(dá) kisspeptin的神經(jīng)元在脊椎動物中多見于下丘腦不同的核以及其他腦區(qū)，且不同種類的分布、調(diào)控和功能也各異。近年來，研究者對魚類Kisspeptin的分布定位進(jìn)行了研究。kiss1原位雜交顯示，青鳉下丘腦中至少存在兩群表達(dá) kiss1的Kiss1神經(jīng)元群，分別位于腹側(cè)結(jié)節(jié)核（nucleus ventralis tuberis;NVT）及下丘腦后室周核（nucleus posterioris periventricularis; NPPv）（Kanda et al,2008；Oka, 2009），且NVT中的KISS1神經(jīng)元表現(xiàn)明顯的性別二態(tài)性，即，繁殖期雄魚Kiss1神經(jīng)元的數(shù)量要高于雌魚，而NPPv中的神經(jīng)元群數(shù)量則不表現(xiàn)性別二態(tài)性。同時，Kanda et al（2008）還考察了青鳉NVT及NPPv中的Kiss1神經(jīng)元群數(shù)量是否受性類固醇激素影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，NVT中的Kiss1神經(jīng)元群在切除卵巢后幾乎為零，在雌激素刺激下，可再次恢復(fù)正常，而NPPv中的Kiss1神經(jīng)元數(shù)量則不然，因此推測，kiss1表達(dá)于NVT中，而非NPPv，且NVT中的Kiss1神經(jīng)元受卵巢雌激素的正反饋調(diào)節(jié)。此外，雖然青鳉NVT中的Kiss1神經(jīng)元數(shù)量雄魚高于雌魚，而小鼠AVPV中Kiss1的神經(jīng)元數(shù)量卻為雌性高于雄性，該差別或可歸因于青鳉雄魚中所存在的正反饋調(diào)控。青鳉NPPv中kisspeptin神經(jīng)元群分布既不表現(xiàn)性別二態(tài)性，亦對性類固醇激素不敏感，因此，NPPv中的Kiss1神經(jīng)元可能不參與BPG軸調(diào)控，且在功能上有別于NVT的Kiss1神經(jīng)元群。此外，若在繁殖期間給予長光照射，雌、雄性青鳉NVT中Kiss1神經(jīng)元的數(shù)量將均顯著高于非繁殖期間短光照射時Kiss1神經(jīng)元的數(shù)量。所有這些結(jié)果均顯示，青鳉Kiss1神經(jīng)元參與了生殖功能的中樞神經(jīng)調(diào)控（Kanda et al, 2008）。有趣的是，Kitahashi et al（2009）還在斑馬魚和青鳉的韁核中發(fā)現(xiàn)了參與生殖調(diào)控的另一類Kiss1神經(jīng)元群，并命名為Kiss2神經(jīng)元，這類神經(jīng)元能表達(dá) kiss1同源平行進(jìn)化基因，且由于在其它硬骨魚類，如歐洲海鱸中也鑒定了Kiss2的存在，因此，kisspeptin及其相關(guān)肽的功能變得更加多樣化。進(jìn)化分析表明，kiss2似乎只存在于低等脊椎動物，目前，在高等脊椎動物中尚未發(fā)現(xiàn) kiss2的存在，有學(xué)者認(rèn)為kiss2在進(jìn)化過程中被丟失（Felip et al, 2009）。Li et al（2009）用定量Real-time PCR分析顯示，金魚 kiss1在視頂蓋—丘腦、腸道、腎和精巢等高度表達(dá)，而 kiss2則主要表達(dá)于下丘腦、端腦、視頂蓋、脂肪組織、腎、心以及性腺等。Selvaraj et al（2010）對日本鯖的定量Real-time PCR組織分布分析顯示，kiss1和kiss2在成年日本鯖的不同組織中都有表達(dá)，且這兩種轉(zhuǎn)錄本在脂肪組織中的表達(dá)水平均呈現(xiàn)性別二態(tài)性。Shahjahan et al（2010）發(fā)現(xiàn)星點東方魨 kiss2廣泛表達(dá)于腦、垂體和性腺等。Yang et al（2010）發(fā)現(xiàn)金魚kiss1雖廣泛表達(dá)于各種組織，但垂體水平的 kiss1轉(zhuǎn)錄本則僅定位于生長激素細(xì)胞，而未見于催乳激素細(xì)胞或促性腺激素細(xì)胞。Servili et al（2011）報道斑馬魚kiss1和kiss2分別表達(dá)不同的產(chǎn)物，同時，免疫組織化學(xué)結(jié)果也驗證了原位雜交數(shù)據(jù)，顯示 kiss1表達(dá)神經(jīng)元僅定位于韁核，而 kiss2表達(dá)神經(jīng)元則定位于下丘腦背側(cè)和腹側(cè)。Kiss1表達(dá)細(xì)胞僅伸入至腳間核和中縫核，且這些核中均具高豐度表達(dá)Kiss1的受體，相反，kiss2表達(dá)細(xì)胞多存在于下丘腦背側(cè)和腹側(cè)，并廣泛伸入至大腦皮層下層、視前區(qū)、丘腦、下丘腦的腹側(cè)和尾端以及中腦，且所有這些區(qū)域均強烈表達(dá)kiss2 mRNA。大量Kiss2神經(jīng)纖維支配著前腦腹側(cè)，與 GnRH3神經(jīng)元接觸密切，從而確立了斑馬魚腦中來自進(jìn)化上古老 kiss基因的兩種獨立kisspeptin系統(tǒng)結(jié)構(gòu)。Kanda et al（2012）再次驗證了金魚中Kiss1和Kiss2的存在，并發(fā)現(xiàn)Kiss1表達(dá)神經(jīng)元主要定位于韁核，Kiss2表達(dá)神經(jīng)元主要定位于側(cè)結(jié)節(jié)核（nucleus lateralis tuberis; NLT）和側(cè)隱核（nucleus recessus lateralis; NRL）。最近，Ogawa et al（2013）對魚類kisspeptin系統(tǒng)解剖學(xué)進(jìn)行了綜述，為進(jìn)一步認(rèn)識魚類多kisspeptin系統(tǒng)（Kiss1和Kiss2系統(tǒng)）的生理和進(jìn)化意義提供了較為全面的資料。

3 魚類Kisspeptin分子多態(tài)性

Kisspeptin是生殖神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)控中的新調(diào)控因子，在脊椎動物中，kiss基因的數(shù)目變化范圍為0～3。Kisspeptin分子多態(tài)性不僅表現(xiàn)于kiss所編碼的前激素原氨基酸組成的差別，也表現(xiàn)于前激素原及功能性成熟肽的長度差異。研究發(fā)現(xiàn)（Ohtaki et al,2001; Akazome, 2010），人類Kisspeptin成熟肽存在Kisspeptin-54、-14、-13、-10四種主要分子形態(tài)，同時，在其它脊椎動物中還存在 Kisspeptin-15和-12。在魚類中，Kanda et al（2008）首次從青鳉中分離了編碼Kisspeptin的kiss1 cDNA，該基因編碼100個氨基酸的前激素原，在氨基酸水平僅有10個氨基酸核心序列（KISS1-10），該核心序列在青鳉和哺乳動物 Kisspeptin之間保守。Kitahashi et al（2009）在青鳉和斑馬魚中發(fā)現(xiàn)的編碼Kisspeptin的新型基因kiss2則分別編碼序列長為125和115個氨基酸殘基的多肽，其預(yù)測的 10個氨基酸核心序列為 FNYNPFGLRF-NH2，而青鳉和斑馬魚 Kiss1的核心序列為YNLNSFGLRYNH2，即，kiss1和kiss2的表達(dá)產(chǎn)物中僅只有-N-N-FGLR-基序相同，進(jìn)一步分析顯示，Kiss2為RF-酰胺化合物，Kiss1為RY-酰胺化合物，而靈長類的Kisspeptin卻為RF-酰胺化合物。目前，Kiss1多為RY-酰胺型化合物而Kiss2則為RF-酰胺型化合物的原因尚不明確。Selvaraj et al（2010）報道，日本鯖Kiss1和Kiss2 cDNA分別編碼含105和123個氨基酸的多肽，其所推導(dǎo)的氨基酸序列與其他脊椎動物作相應(yīng)的序列比較后顯示，高度保守序列僅存在于 kisspeptin-10 區(qū)域（Kp-10），日本鯖 kiss1表達(dá)的 Kp-10（YNFN SFGLRY）和kiss2表達(dá)的Kp-10（FNFNPFG LRF）存在三個氨基酸的不同。Lee et al（2009）報道魚類存在兩種形式的 kisspeptin基因分別編碼 Kiss-1和Kiss-2，而非洲爪蟾則具有三種形式的kiss基因分別編碼Kiss-1a, Kiss-1b和Kiss-2。同時，非哺乳動物kiss1基因為哺乳動物kiss1基因的同源基因，而 kiss2基因則為一種新的形式，且在非洲爪蟾腦中編碼一個C-端酰胺化的十二肽（dodecapeptide），該結(jié)果首次確定了成熟形式Kiss-2產(chǎn)物于脊椎動物腦中的存在。Felip et al（2009）報道了硬骨魚歐洲海鱸的兩種不同kiss基因，即kiss1和kiss2，并發(fā)現(xiàn)kiss1編碼的多肽與嚙齒類kisspeptin-10完全相同，預(yù)測的Kiss2十肽（FNFNPFGLRF）則存在四個氨基酸的不同。Kitahashi et al（2009）還在鴨嘴獸（Ornithorhynchus anatinus）中鑒定了兩種推斷性的kisspeptin。Shahjahan et al（2010）報道，星點東方魨Kiss2前體含有104個氨基酸殘基，并具有一個推斷的kisspeptin-12肽（SKFNLNPFGLRF）。Mechaly et al（2011）通過分析塞內(nèi)加爾鰨kiss2基因結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)了其Kiss2的兩種不同剪接體，即Ss Kiss2-v1（該剪接體產(chǎn)生功能性的蛋白質(zhì)）和 Ss Kiss2-v2（該剪接體編碼平末端非功能性的蛋白質(zhì)），且與其它魚類相反，在該魚中僅存在 kiss2。此外，還有研究（Moon et al, 2009）報道了人工合成的在C-端具有苯丙酰胺殘基的人類kisspeptin-10（h-Kiss-10F）和非洲爪蟾 kisspeptin多肽（x-Kiss-12Y）。

4 Kisspeptin調(diào)控魚類生殖內(nèi)分泌的功能多樣性

分析顯示，kisspeptin涉及以及所推斷的功能，實質(zhì)上涵蓋了生殖生理的各個方面，包括調(diào)控大腦性別分化、青春期啟動定時、通過刺激GnRH神經(jīng)元所實施的對促性腺激素分泌的動態(tài)調(diào)控、傳導(dǎo)性類固醇激素的負(fù)饋調(diào)控、雌激素正反饋調(diào)控下的排卵前促性腺激素分泌高峰、生殖代謝調(diào)控、環(huán)境因子介導(dǎo)（特別是光周期對生殖功能的調(diào)控）等（d’Anglemont et al, 2010; Oakley et al, 2009; Pineda et al, 2010; Roa et al, 2008; Tena et al, 2012）。

4.1 Kisspeptin調(diào)控魚類青春期啟動

Kisspeptin調(diào)控高等脊椎動物青春期啟動的文獻(xiàn)相對較多，并已形成了Kisspeptin調(diào)控青春期啟動和青春期發(fā)育的共識。Parhar et al（2004）首次提出Kisspeptin/GPR54系統(tǒng)參與魚類生殖調(diào)控和青春期啟動。Carrillo et al（2009）認(rèn)為Kisspeptin系統(tǒng)、促性腺激素釋放激素、濾泡刺激素FSH、11-KT和瘦素（Leptin）是歐洲海鱸青春期啟動的潛在因子。Beck et al（2012）報道，外源性Kisspeptin不同程度地加快了鱸魚（Morone chrysops和Morone saxatilis）的青春期啟動及發(fā)育，并在幼魚精巢中呈現(xiàn)出以精子為主體的增加，該發(fā)現(xiàn)首次在魚類中描述了由Kisspeptin介導(dǎo)的魚類青春期啟動。Zmora et al（2012）也發(fā)現(xiàn)條紋鱸中，Kiss1和Kiss2在青春期前、后的表達(dá)存在差別。在脊椎動物中，Kisspeptin被認(rèn)為在調(diào)控青春期啟動中起著主要作用，然而，由于脊椎動物群體的高度多樣性以及現(xiàn)有資料的有限性，Kisspeptin在魚類中的功能以及該激素與其它激素的整合關(guān)系，目前尚不明確。大量資料顯示，Kisspeptin通路對青春期啟動及發(fā)育存在多重且復(fù)雜的調(diào)控機制，在整個青春期過渡期，不僅涉及到下丘腦Kisspeptin節(jié)律和Kisspeptin/GPR54傳導(dǎo)系統(tǒng)效率的提高，還涉及到Kiss1神經(jīng)元的巨大變化，這種變化表現(xiàn)在Kiss1神經(jīng)元數(shù)量的增加和與GnRH神經(jīng)元突軸聯(lián)系的增加（Pineda et al, 2010;Tena, 2010）。目前的研究顯示，Kisspeptin/GPR54通路涉及到了斑馬魚、鯔魚（Mugil cephalus）、黑頭呆魚（Pimephales promelas）、羅非魚和軍曹魚（Cobia）等的青春期啟動及發(fā)育（Martinez-Chavez et al, 2008; Mohamed et al, 2007; Biran et al, 2008;Filby et al, 2008; Nocillado et al, 2007；Akazome et al 2010）。但是，Kisspeptin在魚類青春期發(fā)育成熟中的主要作用位點和機制尚不完善，需要進(jìn)一步研究充實。

4.2 Kisspeptin介導(dǎo)魚類性類固醇激素對促性腺激素分泌的反饋調(diào)控

越來越多的證據(jù)顯示，Kisspeptin參與脊椎動物性類固醇激素對促性腺激素分泌的反饋調(diào)控。Kisspeptin神經(jīng)元被認(rèn)為在調(diào)控下丘腦-垂體-性腺軸的上游GnRH神經(jīng)元中起重要作用。有學(xué)者認(rèn)為Kisspeptin神經(jīng)元正是生殖內(nèi)分泌學(xué)苦苦尋找的HPG軸中性類固醇激素正負(fù)反饋環(huán)中失去的聯(lián)系（missing link）（Gottsch et al, 2009）。Kanda et al（2012）在金魚中發(fā)現(xiàn)，卵巢雌激素能明顯調(diào)控視前區(qū)Kiss2神經(jīng)元中的kiss2基因表達(dá)，且雙重原位雜交顯示這些神經(jīng)元可表達(dá)雌激素的三種受體，因此推測，在魚類中， Kiss2有可能參與性類固醇激素的反饋調(diào)控，而哺乳動物在kiss2被丟失后，kiss1在類固醇反饋調(diào)控中發(fā)揮作用。有資料顯示, 青鳉魚切除卵巢后，NVT中Kiss1神經(jīng)元數(shù)量顯著減少，用雌二醇處理則可完全逆轉(zhuǎn)該效應(yīng)，提示Kiss1神經(jīng)元參與了 BPG軸中性類固醇激素的正反饋調(diào)控（Oka, 2009）。同時，青鳉魚NPPv中Kiss1神經(jīng)元對雌二醇不敏感，說明NPPv中的Kiss1神經(jīng)元還具有生殖以外的其它功能。斑馬魚幼魚經(jīng)雌二醇處理后，下丘腦中 Kiss2神經(jīng)元數(shù)量增多，且 kiss1 mRNA表達(dá)豐度顯著增加，但增幅度低于 kiss2（Servili et al, 2011）。此外，赤點石斑魚在17α-甲基睪酮誘導(dǎo)性逆轉(zhuǎn)期間，處理第一周的 kiss2表達(dá)量降低，但在處理后第四周表達(dá)量顯著升高，且與下丘腦GnRH1的升高同步（Shi et al, 2010）。此外，斑馬魚對雌二醇敏感的Kiss2神經(jīng)元群和青鳉魚對雌二醇敏感的 Kiss1神經(jīng)元群有著相同的分布定位。這些證據(jù)均強烈提示，Kisspeptin參與了魚類性類固醇激素的反饋調(diào)控。

4.3 Kisspeptin調(diào)控魚類生殖表現(xiàn)不同的生物學(xué)活性

魚類 Kisspeptin存在兩種形式的 10肽，即Kiss1-10和Kiss2-10，目前，已有不少與魚類中編碼Kisspeptin的兩種10肽核心序列生物學(xué)活性相關(guān)的研究，包括歐洲海鱸（Felip et al, 2009）、斑馬魚（Kitahashi et al, 2009）和金魚（Li et al, 2009）等。在性成熟金魚中，腹腔注射Kiss1可明顯升高血清LH的水平，而Kiss2則不然（Li et al, 2009）。雌性青鳉腦區(qū)NVT中kiss1基因的表達(dá)對雌激素較敏感（Kanda et al, 2008）。因此，Kiss1在青鳉和金魚中是調(diào)控BPG軸的關(guān)鍵因子。在某些魚類中，Kiss2也參與了生殖調(diào)控，例如，F(xiàn)elip et al（2009）發(fā)現(xiàn)，對歐洲海鱸注射Kiss1和Kiss2后，Kiss2引起的血清中LH的升高是注射前的四倍，而Kiss1僅為兩倍；Kiss2引起的血清FSH的升高是注射前的兩倍，而Kiss1則不能引起血清FSH顯著升高；性成熟雄性鱸魚經(jīng)Kisspeptin處理后，僅Kiss2能引起血清LH的升高，而Kiss1則不能。而由于在刺魚、河豚、紅鰭東方鲀、塞內(nèi)加爾鰨及斜帶石斑魚等魚類中缺乏Kiss1，因此推測，Kiss2可能在這些魚類中起生殖調(diào)控作用。最近，已有學(xué)者采用Kiss110肽來探討Kisspeptin與魚類GPR54多種受體的親和力（Li et al, 2009; Felip et al, 2009; Biran et al, 2008），也證實較長的Kisspeptin對GPR54受體的親和力要高于較短的 Kisspeptin。配體受體選擇性研究則顯示，15肽（Kisspeptin-15）是魚類和非洲爪蟾GPR54-1受體的最有效配體（Lee et al, 2009；Um et al, 2010）。同時，Kisspeptin成熟肽與GPR54 受體的結(jié)合中，來自Kiss1的成熟肽激活GPR54-1受體的效果要優(yōu)于來自Kiss2的成熟肽，焦谷氨酰胺化的Kiss1-15肽（Kisspeptin-15）結(jié)合斑馬魚GPR54-1受體和非洲爪蟾GPR54-1b受體的親和力最強，而非洲爪蟾Kiss1a-14肽（Kisspeptin-14）結(jié)合非洲爪蟾GPR54-1a受體的親和力最強。另外，在魚類中，來自Kiss1較短的10肽（Kisspeptin-10）相對于較長的Kisspeptin成熟肽，對GPR54-1受體的親和力要低得多。此外，在魚類和非洲爪蟾中，Kiss2-12肽及Kiss2-10肽對GPR54-2多種受體具有相同的親和力，同時，Kiss2-12肽及來自Kiss1的多種肽對GPR54-2多種受體的親和力也無明顯差別。另外，人工合成的非洲爪蟾Kiss2-12肽，在C-端苯丙氨酸被酪氨酸替換后，將表現(xiàn)對非洲爪蟾GPR54-2和牛蛙（Rana catesbeiana）GPR54-2的最高親和力（Moon et al, 2009; Lee et al, 2009）。

4.4 Kisspeptin對魚類季節(jié)性繁殖的生殖內(nèi)分泌調(diào)控

大多數(shù)魚類繁殖表現(xiàn)明顯季節(jié)性，且受環(huán)境中光和溫度等因子的調(diào)控。越來越多的證據(jù)顯示Kisspeptin參與了魚類季節(jié)繁殖的生殖內(nèi)分泌調(diào)控。Selvaraj et al（2010）認(rèn)為日本鯖腦中的兩個kiss基因均參與了季節(jié)性性腺發(fā)育調(diào)控。Migaud et al（2012）證實雄性歐洲海鱸中的Kiss1和Kiss2表達(dá)具明顯季節(jié)性，且其升高與FSHβ和LHβ的升高同步，與精子、卵子發(fā)生及成熟存在必然聯(lián)系。Ando et al（2013）探討了星點東方鲀月光相關(guān)性產(chǎn)卵和排精的分子內(nèi)分泌基礎(chǔ)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，性成熟期間，雌、雄魚的 kiss2表達(dá)在眾多基因中占主導(dǎo)地位，從配子發(fā)生早期至產(chǎn)卵前、后，kiss基因表達(dá)均顯著升高，且雌魚Kisspeptin的表達(dá)量要高于雄魚，說明Kisspeptin在卵巢發(fā)育成熟和排卵中起重要作用。Zmora et al（2012）發(fā)現(xiàn)在條紋鱸性成熟期，兩種基因表達(dá)均劇烈升高，青春期Kiss2肽升高血漿LH水平及調(diào)控GnRH1表達(dá)的效果均優(yōu)于Kiss1，而性腺發(fā)育恢復(fù)期（recrudescence）Kiss1肽升高血漿 LH水平及調(diào)控 GnRH1表達(dá)的效果上要強于Kiss2，因此，條紋鱸Kiss1和Kiss2在調(diào)控生殖中的作用不同，且具性腺周期依賴性。Kanda et al（2012）發(fā)現(xiàn)，雌、雄金魚Kiss2在繁殖季節(jié)的表達(dá)量均顯著高于非繁殖季節(jié)。

4.5 Kisspeptin調(diào)控魚類性腺發(fā)育成熟

研究表明，斑馬魚Kisspeptin在孵化后第一周表達(dá)量很低，雌性表達(dá)量逐漸升高，并在受精后第十二周達(dá)到高峰，此時發(fā)育完成，卵細(xì)胞成熟，而雄性表達(dá)量則在受精后第六周達(dá)到高峰，與精子發(fā)生第一期相吻合，此后，表達(dá)下降（Biran et al,2008），該結(jié)果提示，Kisspeptin與斑馬魚雌、雄性腺發(fā)育成熟密切關(guān)聯(lián)。Clarkson et al（2008）也認(rèn)為Kisspeptin/GPR54信號傳遞對于排卵前GnRH神經(jīng)元的激活以及 LH分泌高峰的產(chǎn)生是必不可少的。Shahjahan et al（2010）認(rèn)為星點東方魨Kiss2通過Kiss2/GPR54系統(tǒng)刺激GnRH1的分泌，對于在產(chǎn)卵期調(diào)控生殖功能起重要作用。Selvaraj et al（2012）發(fā)現(xiàn)，在卵巢最后成熟和排卵過程中，鯖亞目（Scombroid）魚類腦中的 Kisspeptin和各種GnRH表達(dá)均升高，日本鯖（S. japonicus）腦中的kiss1及kiss2 mRNA表達(dá)水平在卵黃發(fā)生晚期很低而在GVM（germinal vesicle migration）期間顯著升高，kiss1 mRNA表達(dá)水平在卵水合期顯著下降而在排卵期和排卵后期再次升高，相反, kiss2 mRNA表達(dá)水平在排卵期和排卵后期顯著下降，從而提示，雌鯖魚中存在Kisspeptin和GnRH參與FOM（final ovarian maturation）和排卵的調(diào)控。Mechaly et al（2012）報道了塞內(nèi)加爾鰨在整個生殖周期中Kisspeptin等基因表達(dá)的變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，Kisspeptin及其受體表達(dá)存在時空及性別差異，且Kiss2是雄魚性腺發(fā)育啟動的主要調(diào)控因子，而Kiss2是雌魚卵巢成熟的重要調(diào)控因子，kiss2和 Kiss2受體基因表達(dá)在產(chǎn)卵季節(jié)前或在產(chǎn)卵季節(jié)達(dá)到最高。Beck et al（2012）發(fā)現(xiàn)，Kisspeptin處理性成熟白鱸（Morone chrysops）和條紋鱸可增加性腺重量、性體指數(shù)和精子細(xì)胞壓積，并使得白鱸卵細(xì)胞發(fā)育提前，且這些性腺改變發(fā)生在缺少任何光溫調(diào)控和激素注射的情況下，為未來在不同魚類中研究和驗證Kisspeptin系統(tǒng)奠定了分子基礎(chǔ)。

4.6 Kisspeptin調(diào)控GnRH和促性腺激素的分泌

Kisspeptin可通過Kiss/GPR54系統(tǒng)激活GnRH神經(jīng)元從而調(diào)控GnRH的合成和釋放（Gottsch et al,2004; Messager et al, 2005; Shahab et al, 2005）。極低劑量Kisspeptin可顯著促進(jìn)LH的分泌（Gottsch et al,2004; Irwig et al, 2005; Messager et al, 2005;Navarro et al, 2004; Plant et al, 2006; Shahab et al, 2005），同時，該促分泌作用，可通過GnRH拮抗物預(yù)處理而消除，從而證實Kisspeptin通過調(diào)控GnRH 神經(jīng)元而調(diào)控生殖軸 （Gottsch et al, 2004; Irwig et al,2005）。Kiss1-10可顯著促進(jìn)發(fā)育中、早期黑頭呆魚幼魚腦中g(shù)pr54-2b 和gnrh3基因的表達(dá)（Filby et al,2008）。斜帶石斑魚基因組僅含 kiss2，用 Kiss2-10肽處理性成熟雌魚可顯著促進(jìn)下丘腦gnrh1基因的表達(dá)（Shi et al, 2010）。在垂體水平，Kisspeptin誘導(dǎo)能夠促進(jìn)基因表達(dá)及激素分泌。例如，Kiss2-10可誘導(dǎo)雌性斑馬魚FSHβ和LHβ亞單位表達(dá)量的升高（Kitahashi et al, 2009）；Kiss2-10誘導(dǎo)青春期前歐洲海鱸LH和FSH釋放的效果優(yōu)于Kiss-10，同時，還可引起青春期雄魚 LH的分泌（Felip et al,2009）；Kiss1-10可顯著升高金魚血液中的LH水平，且呈劑量依賴性（Li et al, 2009），此外，Kiss1-10還能夠促進(jìn)催乳激素和生長激素的分泌（Yang et al,2009）。有學(xué)者認(rèn)為，Kisspeptin是促性腺激素分泌的主要調(diào)控因子（Tena, 2010）。Mechaly et al（2011）用特異性定量PCR分析顯示，在整個成熟期，塞內(nèi)加爾鰨Kiss2的兩種亞型在腦和性腺中的表達(dá)變化均存在差異，同時，Ss Kiss2-v1 mRNA在下丘腦中的快速升高，會導(dǎo)致垂體LH和FSH mRNA表達(dá)水平的同步升高。然而，在垂體水平，Kisspeptin對LH分泌的調(diào)控作用仍存在爭論，有研究顯示，Kisspeptin能直接刺激垂體LH的釋放（Gutiérrez et al, 2007; Suzuki et al, 2008），而另外一些學(xué)者則持相反意見（Matsui et al, 2004; Smith et al, 2008）。值得指出的是，Pasquier et al（2011）觀察到歐洲鰻鱺（Anguilla anguilla）Kiss受體在垂體有高豐度表達(dá)，并認(rèn)為Kisspeptin有可能直接作用于垂體，然而，Kisspeptin卻抑制了LH的分泌。

5 Kisspeptin調(diào)控魚類生殖內(nèi)分泌的機制

Biran et al（2008）分別用人及斑馬魚的Kisspeptin-10作為配體研究斑馬魚兩種GPR54受體的信號傳導(dǎo)路徑，結(jié)果顯示，GPR54-1主要通過PKC信號傳導(dǎo)通路傳導(dǎo)Kisspeptin活性，且該信號傳導(dǎo)類似于哺乳動物 Kisspeptin的信號傳導(dǎo)通路（Kotani et al, 2001），而GPR54-2則可通過PKC或PKA信號通路來傳導(dǎo)信號，實施功能調(diào)控。此外，人及斑馬魚的Kisspeptin-10均可同時激活斑馬魚的兩種 GPR54受體和人的 GPR54受體，同時，Kisspeptin-10的酰胺化是激活受體的必要條件。Filby et al（2008）在黑頭呆魚中克隆得到 GPR54受體以及GnRH2和GnRH3的基因，并對處于早中青春期的黑頭呆魚注射了哺乳動物Kisspeptin-10，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，涉及到類固醇激素信號通路的基因，如雌激素受體 1（ESR1）、雄激素受體（AR）和CYP19α2，在青春期啟動的魚腦中表達(dá)量均升高，且雌魚 GPR54基因的表達(dá)稍微提前，從而發(fā)現(xiàn)了黑頭呆魚Kisspeptin/GPR54系統(tǒng)的存在，并認(rèn)為其青春期性固醇醇激素正反饋調(diào)控通過Kisspeptin-GPR54-GnRH 通路實現(xiàn)。van Aerle et al（2008）也提供了魚類中存在Kiss1/Kiss1受體信號通路的證據(jù)，并認(rèn)為功能性Kiss1/ Kiss1受體信號通路在脊椎動物中是保守的。Moon et al（2009）發(fā)現(xiàn)，牛蛙GPR54對非洲爪蟾Kisspeptin高度敏感，并通過 PKC信號通路特異性報告信號的檢測，證實了Kisspeptin作為配體的bfGPR54受體與PKC相聯(lián)的信號通路。Zhao et al（2012）對Kisspeptin調(diào)控青鳉成魚端腦 GnRH3神經(jīng)元電活動的全腦電生理研究顯示，100 nmol/L Kisspeptin的簡單處理，將對下丘腦外GnRH神經(jīng)元群的電活動產(chǎn)生持續(xù)刺激性影響，劑量依賴分析表明，該神經(jīng)肽的激活范圍相對較窄，進(jìn)一步實驗表明，河豚毒素阻斷動作電位后，使用低 Ca2+/高M(jìn)g2+溶液阻斷突軸傳遞可抑制Kisspeptin對GnRH神經(jīng)元電活動的刺激作用，提示Kisspeptin可通過軸突間接調(diào)控端腦GnRH神經(jīng)元的興奮作用。Kisspeptin神經(jīng)元表達(dá)雌、雄激素受體，且在雌、雄個體中均為性類固醇激素直接作用的靶細(xì)胞。腦中Kisspeptin信號通路參與介導(dǎo)促性腺激素分泌的負(fù)反饋調(diào)節(jié)，產(chǎn)生排卵前的GnRH/LH高峰，在青春期觸發(fā)和指導(dǎo)性成熟節(jié)律，控制季節(jié)性生殖并在哺乳期抑制生殖活動，Kisspeptin信號通路可能在經(jīng)典的生殖神經(jīng)內(nèi)分泌領(lǐng)域以外同時行使其他功能（Oakley et al, 2009）。Oakley et al（2009）提出，Kisspeptin與GPR54結(jié)合后，激活G蛋白激活的磷酸酯酶C（PLCβ），通過Gαq/11介導(dǎo)的信號通路，進(jìn)行Kisspeptin信號傳遞，PLCβ激活后生成胞內(nèi)第二信使，即三磷酸肌醇（IP3）和甘油二酯（DAG）將分別介導(dǎo)胞內(nèi)Ca2+的釋放和蛋白激酶C（PKC）的激活。Zhang et al（2008）認(rèn)為第二信使產(chǎn)生后，DAG和（或）Ca2+進(jìn)一步激活瞬間受體電位通道蛋白（transient receptor potential canonical channel，PRPC）和抑制內(nèi)向整流性鉀通道（rectifying potassium channels）從而介導(dǎo)Kisspeptin刺激GnRH的分泌。

6 Kisspeptin的分子進(jìn)化

人類Kiss1基因編碼含有145個氨基酸的蛋白質(zhì)前體，該前體經(jīng)過酶催化裂解成氨基酸長度為-54、-14、-13或-10的多肽（Ohtaki et al, 2001），在其他動物中還發(fā)現(xiàn)了 Kisspeptin-15和Kisspeptin-12的存在。C-端的十肽即Kisspeptin-10相當(dāng)于轉(zhuǎn)移抑制因子蛋白序列 45～54位氨基酸（metastin 45-54），是保持生物效應(yīng)的最短序列，哺乳動物Kisspeptin-10除C-末端?；被嵬?，高度保守。斑馬魚和青鳉 Kiss1與嚙齒類動物Kisspeptin-10相比僅只有在第3位的一個氨基酸不同，而河豚Kisspeptin-10出現(xiàn)了在第1、3和5位氨基酸的替換（van Aerle et al, 2001）。之后，相繼在七鰓鰻、姥鯊（、斑馬魚、青鳉、歐洲海鱸、非洲爪蛙（Xenopus laevis）、非洲爪蟾及鴨嘴獸等水生動物中確立了Kiss2的存在（Um et al, 2010）。Shahjahan et al（2010）發(fā)現(xiàn)星點東方魨Kiss2的前體含有 104個氨基酸殘基，并具有一個推斷Kisspeptin-12肽（SKFNLNPFGLRF）。此外，還在非洲爪蟾中發(fā)現(xiàn)了Kiss1b（Lee et al, 2009），這些序列的氨基酸比對顯示，Kiss1及Kiss2在脊椎動物中除C-末端十肽高度保守外，蛋白前體的其它部分均存在高度變異。因此，Kiss1和Kiss2的分類主要依據(jù)C-末端氨基酸序列。Kiss1十肽在C-末端具有一個酰胺化的酪氨酸殘基或苯丙氨酸殘基，并在第3位表現(xiàn)變異，魚類中亮氨酸替換了第3位氨基酸，非洲爪蟾Kiss1b則是纈氨酸替換了第3位氨基酸，其它脊椎動物則是色氨酸替換第3位氨基酸，如非洲爪蟾Kiss1a第3位氨基酸即為色氨酸。此外，魚類Kiss1和非洲爪蟾Kiss1b蛋白前體中，與10肽相鄰的氨基酸序列與其它脊椎動物的氨基酸序列存在很大差異，不僅如此，魚類Kiss1和非洲爪蟾Kiss1b的蛋白質(zhì)前體10肽上游處具有一個5位氨基酸的雙堿基位點，這些雙堿基氨基酸緊隨著一個谷氨酸，表明魚類kiss1基因和非洲爪蟾kiss1b基因可編碼一個含有15個氨基酸的成熟肽，該15肽在N-端具有焦谷氨酰基化和C-端酪氨酰胺化位點。這些15肽（pentadecapeptides）是魚類和非洲爪蟾GPR54-1最有效的激活因子（Lee et al, 2009）。Kiss2十肽的氨基酸序列與Kiss1氨基酸序列分別在第1、3和5位存在3個氨基酸的差異。此外，一個堿性氨基酸即精氨酸出現(xiàn)在Kiss2十肽上游的3位氨基酸處，表明每種Kiss2 cDNA編碼一個新的12肽，其C-端的苯丙氨酸可以酰胺化（Lee et al, 2009），免疫親和純化在非洲爪蟾腦中證實Kiss2十二肽的存在（Um et al, 2010），同時，非洲爪蟾的Kiss1a通過C-端的酰胺化產(chǎn)生一個14肽（Um et al, 2010）。Kanda et al（2012）通過對金魚Kiss1和Kiss2的進(jìn)化分析后，認(rèn)為Kiss1和Kiss2具有共同的進(jìn)化起源，當(dāng)Kiss2在哺乳動物中丟失以后，Kiss1在類固醇反饋調(diào)控中發(fā)揮作用。

7 Kisspeptin與其他功能分子對魚類生殖內(nèi)分泌的協(xié)同調(diào)控

7.1 Kisspeptin與速激肽的協(xié)同調(diào)控

速激肽（tachykinin）是一個神經(jīng)肽類家族，包括P物質(zhì)（SP）、神經(jīng)激肽A（neurokinin A;NKA）、神經(jīng)激肽B（neurokinin B；NKB），分別由tac1基因（編碼SP與NKA）和tac2/3 基因（編碼NKB）所編碼。速激肽廣泛分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，起著神經(jīng)遞質(zhì)和神經(jīng)調(diào)控因子的作用。最近的研究顯示，NKB和Kisspeptin存在共表達(dá)，在生殖調(diào)控中起協(xié)同調(diào)控作用。有證據(jù)顯示，神經(jīng)激肽B是生殖神經(jīng)內(nèi)分泌的又一關(guān)鍵調(diào)控因子（Blaustein et al, 2010）。還有研究發(fā)現(xiàn)，弓形核KNDy（kisspeptin/neurokinin B/dynorphin）神經(jīng)元介導(dǎo)雌二醇的負(fù)反饋調(diào)控，同時還顯示，Kisspeptin、NKB和強啡肽（dynorphin）是促進(jìn)LH分泌并誘導(dǎo)LH分泌高峰的關(guān)鍵調(diào)控因子（Merkley et al, 2012）。目前，速激肽和Kisspeptin之間的關(guān)聯(lián)在魚類中報道較少，Ogawa et al（2012）認(rèn)為斑馬魚腦中的Kisspeptin和NKB 這兩個生殖調(diào)控的關(guān)鍵因子存在著獨立的傳導(dǎo)通路。魚類Kisspeptin與速激肽對生殖內(nèi)分泌的協(xié)同調(diào)控有待深入研究。

7.2 Kisspeptin與褪黑激素的協(xié)同調(diào)控

資料顯示，Kisspeptin作為光周期介導(dǎo)因子與褪黑激素（melatonin）共同實施光周期對魚類生殖的協(xié)同調(diào)控（Tena et al, 2012）。越來越多的證據(jù)顯示，光周期對生殖的調(diào)控涉及到Kisspeptin的直接和間接作用，且作為褪黑激素作用的介導(dǎo)因子，Kisspeptin在生殖的季節(jié)性調(diào)控中起中心作用（Revel et al, 2007）。在眾多環(huán)境因子中，光周期是最難改變的地理物理因子，因此，大多數(shù)季節(jié)性繁殖動物均以此來預(yù)測季節(jié)改變并啟動雌、雄配子的發(fā)生和確定產(chǎn)卵時間。然而，動物如何獲得每日和季節(jié)性改變的日長信息，并如何通過BPG軸進(jìn)行信息傳遞，目前還缺乏深入了解（Tena et al, 2012）。有證據(jù)顯示，褪黑激素在介導(dǎo)光周期調(diào)控垂體功能的神經(jīng)內(nèi)分泌通路中起中心作用并調(diào)控生殖的季節(jié)性，褪黑激素周期性的生成如同生物鐘和日歷，光周期決定褪黑激素信號的時間長度，而溫度則影響褪黑激素信號的幅度，兩者精確定義了日周期和年周期（Reiter, 1993）。有證據(jù)顯示，弓狀核kiss1基因的表達(dá)受褪黑激素調(diào)控，Kisspeptin處理將重新激活光周期抑制動物的生殖活動（Simonneaux et al, 2009）。然而，目前還不清楚褪黑激素是否通過直接作用于弓狀核Kiss1神經(jīng)元而介導(dǎo)其作用。Greives et al（2008）認(rèn)為，Kisspeptin通過直接改變kiss表達(dá)及改變Kiss1對性類固醇激素反饋調(diào)節(jié)的敏感性，來介導(dǎo)褪黑激素信號通路。在羅非魚中，長光周期抑制青春期啟動及Kisspeptin受體表達(dá)（Martinez et al, 2008）。Kanda et al（2008）報道，光周期與青鳉kiss1基因表達(dá)間存在顯著相關(guān)，表現(xiàn)為長光周期誘導(dǎo)NVT中Kiss1神經(jīng)元的數(shù)量要高于短光周期。作為中間系統(tǒng)，GnRH神經(jīng)元可整合和處理松果體所接受的光周期信息，Carnevali et al（2011）在斑馬魚中也證實，光周期調(diào)控生殖通過褪黑激素的夜間釋放而實現(xiàn)。原位雜交顯示斑馬魚和鱸魚的Kiss1神經(jīng)元存在于韁核，這一組織學(xué)定位提示，Kiss1神經(jīng)元極有可能肩負(fù)著環(huán)境和代謝信號的感覺職能（Escobar et al, 2010; Escobar et al,2011; Servili et al, 2011）。對斑馬魚褪黑激素作用的研究還顯示，褪黑激素能引起腦中kiss1、kiss2和gnrh3基因轉(zhuǎn)錄本的升高，以及l(fā)hβ的同步升高，且該升高與褪黑激素所誘導(dǎo)的生殖力增加密切相關(guān)（Carnevali et al, 2011）。所有這些結(jié)果均提示，褪黑激素有可能通過信號機制來調(diào)控魚類生殖，并通過Kisspeptin通路信號鏈刺激下丘腦GnRH神經(jīng)元開啟BPG軸，從而揭示，光周期通過褪黑激素調(diào)控Kiss1神經(jīng)元，從而驅(qū)動生殖軸實現(xiàn)Kisspeptin與褪黑激素協(xié)同調(diào)控魚類生殖。

7.3 Kisspeptin與 Leptin、Ghrelin 和 NPY代謝

信號對生殖的協(xié)同調(diào)控

大量代謝應(yīng)激模型研究顯示，代謝應(yīng)激對生殖有強烈抑制作用，代謝應(yīng)激時，Kisspeptin表達(dá)被顯著抑制。在能量平衡中起關(guān)鍵作用的 Leptin、Ghrelin 和 NPY直接或間接抑制 kiss基因表達(dá)（Pineda et al, 2010）。目前，魚類能量狀態(tài)和代謝因子對Kisspeptin表達(dá)的影響還未十分明了，Mechaly et al（2011）發(fā)現(xiàn)，禁食可引起塞內(nèi)加爾鰨kiss2mRNA表達(dá)顯著升高，且該升高與垂體中LHβ和FSHβ的升高同步，從而為Kiss2參與魚類生殖能量代謝調(diào)控提供了第一證據(jù)。然而，Kisspeptin對魚類生殖代謝的調(diào)控仍有待進(jìn)一步研究。

8 展望

目前，生殖神經(jīng)內(nèi)分泌研究的三大熱點為：雌二醇的作用神經(jīng)機制（neural mechanisms of action of estradiol）、GnRH的調(diào)控（GnRH regulation）及生殖神經(jīng)內(nèi)分泌表觀遺傳學(xué)（epigenetics of reproductive neuroendocrinology）（ Blaustein,2010）。這三大熱點為研究者提供了新視野，特別是在GnRH調(diào)控領(lǐng)域中，Kisspeptin是生殖內(nèi)分泌的重要角色，神經(jīng)激肽B是參與青春期啟動和生殖調(diào)控的又一關(guān)鍵因子，而促性腺激素抑制激素（GnIH）的發(fā)現(xiàn)以及RF酰胺-相關(guān)肽（RFamide-related peptide）作為GnIH對促性腺激素神經(jīng)元的直接調(diào)控作用引起了魚類生殖內(nèi)分泌研究的興趣，也為魚類生殖內(nèi)分泌研究提供了新的空間。Kisspeptin的發(fā)現(xiàn)給經(jīng)典神經(jīng)內(nèi)分泌學(xué)帶來了一場革命，國內(nèi)、外很多學(xué)者相繼躋身這一領(lǐng)域。2005年，Seminara（2005）在《臨床內(nèi)分泌與代謝雜志》上以“我們所有人應(yīng)記住我們的第一個吻”為題發(fā)表了編輯部文章，激發(fā)了廣大研究者的興趣，之后，Kauffman（2010）于2010年發(fā)表了題為“Kisspeptin時代的來臨”的文章，并對Kisspeptin在性別差別、發(fā)育和青春期啟動所起的作用進(jìn)行了綜述，從而在全世界吹響了研究Kisspeptin的號角。根據(jù)現(xiàn)有資料，Kisspeptin在魚類中一些功能才突顯雛形，一些還未明了，有待進(jìn)一步深入研究，同時，不同魚類之間還表現(xiàn)Kisspeptin的功能差異性，特別是Kisspeptin對魚類生殖的調(diào)控仍有待進(jìn)一步實驗和數(shù)據(jù)的驗證和補充。值得注意的是，目前，不僅魚類Kisspeptin對生殖的調(diào)控遠(yuǎn)遠(yuǎn)滯后于高等脊椎動物的研究，而且在魚類Kisspeptin有些功能方面還幾乎是空白，比如Kisspeptin在發(fā)育中如何調(diào)控魚類的性別分化和性別二態(tài)性，Kisspeptin如何參與能量平衡和生殖整合，以及Kisspeptin如何通過調(diào)控生殖軸而整合生長軸等。

致謝：感謝張為民教授、張勇博士及李水生博士對本文的支持和關(guān)注，感謝張輝賢博士在文獻(xiàn)查閱上提供的大力幫助。

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