花椒精灌胃劑量對(duì)去勢(shì)大鼠腸道健康的影響

劉慶慶，任文瑾，呂 嬌，劉 雄*

(西南大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院，重慶 400715)

花椒是蕓香科(Rutaceae)花椒屬(ZanthoxylumL.)中具有芳香氣味的藥用植物，分布于韓國(guó)、中國(guó)、日本等國(guó)家[1-2]?；ń肪遣捎每茖W(xué)的物理方法從花椒中提取、精制而成的厚重麻味的天然調(diào)味料，主要由花椒非揮發(fā)性精油和揮發(fā)性精油混合而成。其生產(chǎn)工藝是將新鮮成熟花椒烘干、篩分后取花椒果殼制成花椒粉，花椒粉在多功能提取罐中用浸提劑進(jìn)行回流浸提，將提取的浸提液濃縮、純化、凈化后得到花椒非揮發(fā)性精油，將其與烘干、純化過(guò)程中得到的花椒揮發(fā)性精油混合即可。

由于花椒精具有花椒特有的麻香味，且可以通過(guò)控制花椒精的用量來(lái)調(diào)節(jié)食用油的麻度，因此其是一種高檔的調(diào)味品和香料?；ń肪粌H是一種高效的食品添加劑，其還具有多種生理功能?；ń窊]發(fā)油具有麻醉作用，具有較好的抗炎和鎮(zhèn)痛作用[3-4]。有研究表明，花椒精對(duì)心血管系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、免疫機(jī)能、凝血功能等均具有較強(qiáng)的藥理學(xué)活性[5]。另外，干信等[6]研究發(fā)現(xiàn)，花椒揮發(fā)油對(duì)實(shí)驗(yàn)用的酵母菌、霉菌、大腸桿菌和金黃色葡萄球菌都有明顯的抑制作用。韋敏等[7]研究發(fā)現(xiàn)，花椒揮發(fā)油對(duì)過(guò)敏性刺激誘發(fā)的哮喘有較好的抑制作用?；ń窊]發(fā)油還具有較強(qiáng)的抗氧化活性，其抗脂質(zhì)過(guò)氧化活性和清除自由基的能力比VC和VE都強(qiáng)[8]。近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)，花椒揮發(fā)油還具有抗腫瘤[9]和減少動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病率的作用[10]。

更年期婦女卵巢功能衰退，雌激素分泌逐漸減少，促性腺激素水平升高，易出現(xiàn)植物神經(jīng)功能紊亂而引起的系列癥候群，其中以血脂和膽固醇升高導(dǎo)致的心血管癥狀為主要臨床表現(xiàn)。雖然用雌激素替代治療可以明顯降低冠心病的發(fā)病率和死亡率，但是長(zhǎng)期服用雌激素會(huì)產(chǎn)生較大的副作用。因此通過(guò)膳食來(lái)調(diào)節(jié)和預(yù)防更年期婦女的血脂和膽固醇的升高，是一種理想的途徑?；ń肪缓寡趸钚猿煞?，能防止正常低密度脂蛋白(LDL)氧化，預(yù)防動(dòng)脈粥樣性疾病的發(fā)生，但尚未見(jiàn)有關(guān)花椒精對(duì)腸道健康作用的報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)室前期研究也發(fā)現(xiàn)花椒精能有效降低卵巢切除大鼠血脂，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)選取同種基礎(chǔ)飼料飼喂卵巢偽切除組和卵巢切除組大鼠，隨機(jī)選擇3組卵巢切除組灌胃不同灌胃劑量的花椒精，研究花椒精灌胃劑量對(duì)卵巢切除手術(shù)后大鼠腸道健康的影響。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物與材料

雌性SD大鼠，清潔級(jí)，4周齡，體質(zhì)量(100±10)g，購(gòu)自重慶滕鑫比爾實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司，動(dòng)物許可證號(hào)：SCXK(渝)20070008。

表1 花椒精中花椒揮發(fā)油的成分及含量Table 1 Composition of the basic diet

花椒精，主要成分為花椒麻素(32.18%)和花椒揮發(fā)油(54.64%)，花椒揮發(fā)油的成分及含量見(jiàn)表1，購(gòu)于重慶嬌王花椒股份有限公司；基礎(chǔ)飼料，購(gòu)于重慶滕鑫比爾實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司；金龍魚(yú)大豆油(食用級(jí)) 市售。

1.2 試劑

乙醇、氫氧化鈉、氯化鈉、檸檬酸、鎢酸鈉、硫酸、苯酚、硝普鈉、次氯酸鈉(分析純) 成都市科龍化工試劑廠；乙酸、巴豆酸(標(biāo)準(zhǔn)品，純度＞99.7%) 英國(guó)Johnson Matthey公司；丙酸、丁酸、異丁酸(標(biāo)準(zhǔn)品，純度＞99%) 梯希愛(ài)(上海)化成工業(yè)發(fā)展有限公司；TPY瓊脂培養(yǎng)基、腸球菌瓊脂(膽汁七葉疊氮鈉瓊脂)、乳酸桿菌選擇性瓊脂、伊紅美藍(lán)瓊脂、厭氧菌瓊脂 青島高科園海博生物技術(shù)有限公司。

1.3 儀器與設(shè)備

PHS-3C精密pH計(jì) 上海大普儀器有限公司；JA2003A電子天平 上海精天電子儀器有限司; DHG-9070電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 上海齊欣科學(xué)有限公司；1-15PK冷凍離心機(jī) 美國(guó)Sigma公司；WH-1微型漩渦混合器 上海滬西分析儀器廠有限公司；722-P可見(jiàn)分光光度計(jì) 上?，F(xiàn)科儀器有限公司；GC-2010高效氣相色譜儀 日本島津公司；Stabilwax-DA色譜柱 美國(guó)Restek公司；SW-CJ-1FD 潔凈工作臺(tái) 蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司；HH-B11電熱恒溫培養(yǎng)箱 上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠；ES-315高壓蒸汽滅菌鍋 日本Seisakusyo公司。

1.4 方法

1.4.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

40只雌性SD大鼠，室溫保持(25±1)℃，12h明暗輪換(19：00～21：00)，喂食基礎(chǔ)飼料1周，適應(yīng)喂養(yǎng)環(huán)境后，按大鼠體質(zhì)量隨機(jī)分為5組，腹部注射戊巴比妥鈉(無(wú)菌生理鹽水配制0.3%溶液，注射量1mL/100g，以體質(zhì)量計(jì))使其麻醉，對(duì)其中1組進(jìn)行偽切除手術(shù)，其余4組進(jìn)行雙側(cè)卵巢切除手術(shù)后隨機(jī)分組，手術(shù)后進(jìn)行為期1周的恢復(fù)后，每天對(duì)偽切除組和雙側(cè)卵巢切除(OVX)花椒精劑量空白組灌胃大豆油做空白組，對(duì)花椒精劑量組分別灌胃含5、10、15mg/mL花椒精的大豆油溶液，灌胃劑量均為0.1mL/100g。所有大鼠均喂食基礎(chǔ)飼料(基礎(chǔ)飼料配方見(jiàn)表2)，自由攝食和飲水，每天稱(chēng)量大鼠體質(zhì)量并記錄大鼠采食量。

表2 基礎(chǔ)飼料配方Table 2 Chemical composition and content of zanthocylum essential oil

實(shí)驗(yàn)周期為4周，實(shí)驗(yàn)期最后1d斷糧12h，19：00～21：00乙醚麻醉后斷頭處死大鼠，取出盲腸組織，稱(chēng)質(zhì)量。將盲腸組織縱向剪開(kāi)，稱(chēng)取0.2g左右盲腸內(nèi)容物，加入10倍去離子水，用旋渦混合儀混勻，電子pH計(jì)測(cè)其pH值；稱(chēng)取0.5g左右盲腸內(nèi)容物放入超純水處理過(guò)的10mL離心管中，立即加入2mL含有5mmol/L巴豆酸的10mmol/L氫氧化鈉溶液，充分混勻后冷藏用于短鏈脂肪酸檢測(cè)。稱(chēng)取0.3g左右盲腸內(nèi)容物放入預(yù)先恒定質(zhì)量的鋁盒中，105℃條件下恒定質(zhì)量測(cè)定其水分含量。稱(chēng)取0.3g左右盲腸內(nèi)容物，加入10倍(V/m)無(wú)氨水，－20℃冷凍待測(cè)游離氨。剩余盲腸內(nèi)容物收集于10mL離心管中，－80℃冷凍保存，用于測(cè)定盲腸內(nèi)容物中微生物含量。

1.4.2 飼料效率的測(cè)定[11]

實(shí)驗(yàn)前測(cè)定每只大鼠的體質(zhì)量，實(shí)驗(yàn)期間每天記錄采食量，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)測(cè)定每只大鼠體質(zhì)量。計(jì)算出4周的實(shí)驗(yàn)期內(nèi)大鼠體質(zhì)量增加量和總的飼料采食量。

1.4.3 盲腸內(nèi)容物質(zhì)量的測(cè)定

盲腸內(nèi)容物質(zhì)量/g=盲腸總質(zhì)量/g－盲腸壁質(zhì)量/g (2)

1.4.4 盲腸內(nèi)容物含水率測(cè)定

稱(chēng)取一定質(zhì)量的新鮮盲腸內(nèi)容物，放入預(yù)恒質(zhì)量鋁盒中，105℃質(zhì)量恒定，測(cè)其含水量。

式中：m1為盲腸內(nèi)容物濕質(zhì)量/g；m2為盲腸內(nèi)容物干質(zhì)量/g。

1.4.5 盲腸內(nèi)容物pH值測(cè)定

稱(chēng)取一定質(zhì)量的新鮮盲腸內(nèi)容物于10mL去離子水預(yù)處理離心管中，加入10倍(V/m)去離子水，旋渦混合儀上混勻后靜置，測(cè)上清液pH值。

1.4.6 盲腸內(nèi)容物游離氨測(cè)定

無(wú)氨水制備：在1000mL蒸餾水中加入0.10mL硫酸(ρ=1.84g/mL)，并在全玻璃蒸餾器中重蒸餾，棄去前50mL蒸出液，然后將蒸出液收集在帶有玻璃塞的玻璃瓶中。

將預(yù)處理的盲腸內(nèi)容物樣品4000r/min條件下離心5min，吸取上清液1mL，依次加入1mL含有0.001mol/L亞硝基鐵氰化鈉的0.5mol/L苯酚溶液和1mL含有0.03mol/L次氯酸鈉的0.625mol/L氫氧化鈉溶液，60℃保溫7min，于625nm波長(zhǎng)處測(cè)吸光度[12]。

1.4.7 盲腸壁表面積測(cè)定[13]

用冰冷生理鹽水洗凈盲腸，充分展開(kāi)后固定在A4紙上，勾出其輪廓，待紙干燥后將盲腸壁輪廓復(fù)寫(xiě)在厚的打印紙上，然后將紙上的盲腸輪廓圖剪下。用精密度為0.0001g的電子秤準(zhǔn)確稱(chēng)量輪廓圖紙質(zhì)量(m2)和1cm2的打印紙質(zhì)量(m1)，然后按式(4)計(jì)算盲腸表面積。

1.4.8 盲腸內(nèi)容物中SCFA測(cè)定

將預(yù)處理的盲腸內(nèi)容物樣品在4℃、4000r/min離心15min，吸取上清液轉(zhuǎn)移至預(yù)先用純水處理過(guò)的10mL離心管中，10000r/min轉(zhuǎn)速下繼續(xù)離心15min，1mL一次性注射器吸取上清液1mL，0.25μm濾膜過(guò)濾至2mL進(jìn)樣小瓶中待測(cè)。

氣相色譜條件：進(jìn)樣量1μL；進(jìn)樣口溫度220℃；柱流量0.95mL/min，柱溫90℃，平衡時(shí)間0.5min，5℃/min升溫至150℃，保留時(shí)間7min；檢測(cè)器溫度230℃；氫氣流量40mL/min，空氣流量400mL/min，尾吹流量40mL/min[14]。

1.4.9 盲腸內(nèi)容物微生物測(cè)定

?。?0℃冷凍盲腸內(nèi)容物0.2g左右，加入9倍(V/m)無(wú)菌生理鹽水，旋渦混合儀振蕩混勻，制得10-1稀釋度盲腸內(nèi)容物。依次10倍稀釋至10-12稀釋度，選擇10-1、10-2、10-33個(gè)稀釋度，用于大腸桿菌和腸球菌的培養(yǎng)計(jì)數(shù)；選擇10-4、10-5、10-63個(gè)稀釋度，用于雙歧桿菌和乳酸桿菌的培養(yǎng)計(jì)數(shù)，選擇10-2、10-3、10-43個(gè)稀釋度，用于厭氧菌的培養(yǎng)計(jì)數(shù)，接種量為200μL。大腸桿菌培養(yǎng)選用EMB培養(yǎng)基，37℃條件恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)36～48h計(jì)數(shù)。雙歧桿菌、乳酸桿菌和厭氧菌分別選用TPY瓊脂、乳酸桿菌選擇性瓊脂和厭氧菌瓊脂培養(yǎng)基，37℃條件下二氧化碳細(xì)胞培養(yǎng)箱中厭氧培養(yǎng)48～72h計(jì)數(shù)。結(jié)果以lg(CFU/g)表示。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS Statistics(版本17.0)軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以±s表示；各組結(jié)果采用Duncan’s顯著性差異測(cè)驗(yàn)進(jìn)行單向方差分析，顯著水平為0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 花椒精灌胃劑量對(duì)去勢(shì)大鼠體質(zhì)量增加量、飼料采食量和飼料效率的影響

表3 花椒精灌胃劑量對(duì)去勢(shì)大鼠體質(zhì)量增加量、飼料采食量和飼料效率的影響(±s，n=8)Table 3 Effect of Zanthoxylum essential oil dose on body weight gain,total feed intake and feed efficiency of ovariectomized rats(±s，n=8)

表3 花椒精灌胃劑量對(duì)去勢(shì)大鼠體質(zhì)量增加量、飼料采食量和飼料效率的影響(±s，n=8)Table 3 Effect of Zanthoxylum essential oil dose on body weight gain,total feed intake and feed efficiency of ovariectomized rats(±s，n=8)

注：*.偽切除組與空白組相比，存在顯著性差異(P＜0.05)。下同。

項(xiàng)目 偽切除組 空白組 劑量組5mg/(kg·d) 10mg/(kg·d) 15mg/(kg·d)體質(zhì)量增加量/(g/4周)80.25±13.67* 141.00±10.60 133.25±12.20 137.88±25.67 129.75±13.99采食量/(g/4周) 538.50±47.16* 611.00±31.79 630.13±37.81 631.88±58.65 640.00±64.13飼料效率/(g/100g)14.89±2.09* 22.64±1.84 21.21±2.30 21.77±3.16 20.38±2.38

由表3可知，空白組與偽切除組相比，卵巢切除使得大鼠的體質(zhì)量增加量、采食量及飼料效率均顯著增加(P＜0.05)。在卵巢切除組中，灌胃不同劑量花椒精的大鼠體質(zhì)量增加量、采食量和飼料效率與空白組之間差異不顯著。

2.2 花椒精灌胃劑量對(duì)大鼠盲腸總質(zhì)量、盲腸壁濕質(zhì)量、表面積以及盲腸內(nèi)容物濕質(zhì)量的影響

表4 花椒精灌胃劑量對(duì)去勢(shì)大鼠盲腸總質(zhì)量、盲腸壁質(zhì)量和表面積以及盲腸內(nèi)容物濕質(zhì)量的影響(±s，n=8)Table 4 Effect of Zanthoxylum essential oil dose on caecal weight, wet weight and area of the ceacal wall, and wet weight of the caecal contents in ovariectomized rats (±s，n=8)

表4 花椒精灌胃劑量對(duì)去勢(shì)大鼠盲腸總質(zhì)量、盲腸壁質(zhì)量和表面積以及盲腸內(nèi)容物濕質(zhì)量的影響(±s，n=8)Table 4 Effect of Zanthoxylum essential oil dose on caecal weight, wet weight and area of the ceacal wall, and wet weight of the caecal contents in ovariectomized rats (±s，n=8)

注：上標(biāo)字母不同表示灌胃組間存在顯著性差異(P＜0.05)。下同。

項(xiàng)目 偽切除組 空白組 劑量組5mg/(kg·d) 10mg/(kg·d) 15mg/(kg·d)盲腸總質(zhì)量/g 4.37±1.00 5.28±1.65 5.60±0.65 5.29±1.76 5.37±0.96盲腸壁濕質(zhì)量/g 1.01±0.10 1.15±0.15 1.16±0.08 1.20±0.22 1.19±0.10盲腸表面積/cm2 21.31±2.30* 24.83±3.90ab23.51±3.36a 27.22±3.78b 26.09±2.59ab內(nèi)容物濕質(zhì)量/g 3.36±0.99 4.13±1.53 4.43±0.62 4.09±1.62 4.18±0.89壁濕質(zhì)量/體質(zhì)量/% 0.39±0.04 0.35±0.02 0.36±0.02 0.36±0.03 0.37±0.03

由表4可知，空白組與偽切除組相比，盲腸表面積顯著增大(P＜0.05)，盲腸總質(zhì)量、內(nèi)容物濕質(zhì)量和盲腸壁濕質(zhì)量均呈上升趨勢(shì)；各劑量組與空白組相比，壁濕質(zhì)量/體質(zhì)量百分比、盲腸總質(zhì)量及盲腸壁濕質(zhì)量都呈現(xiàn)上升趨勢(shì)。

2.3 花椒精灌胃劑量對(duì)大鼠盲腸內(nèi)容物水分含量、pH值和游離氨含量的影響

表5 花椒精灌胃劑量對(duì)去勢(shì)大鼠盲腸內(nèi)容物水分含量、pH值和游離氨含量的影響(±s，n=8)Table 5 Effect of Zanthoxylum essential oil dose on pH, water content and ammonia level of the caecal contents in ovariectomized rats rats(±s，n=8)

表5 花椒精灌胃劑量對(duì)去勢(shì)大鼠盲腸內(nèi)容物水分含量、pH值和游離氨含量的影響(±s，n=8)Table 5 Effect of Zanthoxylum essential oil dose on pH, water content and ammonia level of the caecal contents in ovariectomized rats rats(±s，n=8)

項(xiàng)目 偽切除組 空白組 劑量組5mg/(kg·d) 10mg/(kg·d) 15mg/(kg·d)內(nèi)容物含水率/% 81.32±4.49 80.11±5.20 79.54±3.03 77.92±1.44 79.96±3.76盲腸內(nèi)容物pH 8.17±0.31 8.10±0.35 8.07±0.18 8.09±0.18 8.04±0.30游離氨含量/(μg/g)203.69±15.34*257.76±29.29253.13±30.77238.55±20.57228.59±17.29

由表5可知，空白組與偽切除組相比，盲腸內(nèi)容物中游離氨含量顯著升高(P＜0.05)，盲腸內(nèi)容物含水率及內(nèi)容物pH值均呈下降趨勢(shì)，未達(dá)到顯著水平；各劑量組與空白組相比，盲腸內(nèi)容物含水率及pH值均無(wú)顯著差異，游離氨濃度的變化趨勢(shì)與灌胃劑量呈負(fù)相關(guān)。

2.4 花椒精灌胃劑量對(duì)去勢(shì)大鼠盲腸內(nèi)容物中短鏈脂肪酸含量的影響

由表6可知，空白組與偽切除組相比，卵巢切除使乙酸、丙酸、丁酸和SCFAs增加，均無(wú)顯著性影響(P＞0.05)，但能顯著增加異丁酸含量(P＜0.05)；劑量組中，隨著灌胃劑量的增加卵巢切除大鼠盲腸內(nèi)容物中的乙酸和丙酸含量逐漸增加，花椒精灌胃劑量為15mg/(kg·d)組與5mg/(kg·d)組相比大鼠盲腸內(nèi)容物中乙酸、丙酸和SCFAs的含量顯著增加，灌胃劑量為10mg/(kg·d)組和15mg/(kg·d)組與空白組相比SCFAs含量增加，且變化趨勢(shì)與灌胃劑量呈正相關(guān)。

表6 花椒精灌胃劑量對(duì)去勢(shì)大鼠盲腸內(nèi)容物中短鏈脂肪酸含量的影響(±s，n=8)Table 6 Effect of Zanthoxylum essential oil dose on SCFA in the caecal contents of ovariectomized rats (±s，n=8)

表6 花椒精灌胃劑量對(duì)去勢(shì)大鼠盲腸內(nèi)容物中短鏈脂肪酸含量的影響(±s，n=8)Table 6 Effect of Zanthoxylum essential oil dose on SCFA in the caecal contents of ovariectomized rats (±s，n=8)

μmol/g有機(jī)酸 偽切除組 空白組 劑量組5mg/(kg·d)10mg/(kg·d)15mg/(kg·d)乙酸 11.83±0.0511.91±0.03ab11.78±0.03a11.94±0.14ab12.03±0.21b丙酸 3.52±0.03 3.56±0.03ab 3.50±0.03a 3.59±0.08ab 3.67±0.10b異丁酸 4.76±0.01* 4.78±0.01a 4.76±0.01b 4.78±0.02a 4.77±0.01ab丁酸 3.92±0.03 3.97±0.04 3.92±0.05 4.00±0.08 4.02±0.11 SCFAs 24.04±0.1024.22±0.08ab23.98±0.10a24.31±0.31ab24.50±0.48b

2.5 花椒精灌胃劑量對(duì)去勢(shì)大鼠盲腸內(nèi)容物中微生物的影響

表7 花椒精灌胃劑量對(duì)去勢(shì)大鼠盲腸內(nèi)容物中微生物的影響(±s，n=8)Table 7 Effect of Zanthoxylum essential oil dose on caecal microflora in ovariectomized rats (±s，n=8)

表7 花椒精灌胃劑量對(duì)去勢(shì)大鼠盲腸內(nèi)容物中微生物的影響(±s，n=8)Table 7 Effect of Zanthoxylum essential oil dose on caecal microflora in ovariectomized rats (±s，n=8)

lg(CFU/g)微生物 偽切除組 空白組 劑量組5mg/(kg·d)10mg/(kg·d)15mg/(kg·d)雙歧桿菌 8.88±0.32*9.74±0.67 9.47±0.61 9.24±0.42 9.40±0.43乳酸菌 8.26±0.37*8.77±0.12a8.78±0.53a8.94±0.29ab 9.29±0.38b厭氧菌 7.18±0.23*7.60±0.05a8.42±0.10b 7.18±0.30c 6.81±0.04d大腸桿菌 6.68±0.17*7.26±0.31a6.40±0.35b 6.20±0.77b 6.59±0.17b腸球菌 7.02±0.17*7.32±0.38a5.80±0.13b 6.61±0.18c 6.79±0.54c

由表7可知，與偽切除組組相比，空白組大鼠盲腸內(nèi)容物中的雙歧桿菌、乳酸菌、大腸桿菌、腸球菌和厭氧菌菌落數(shù)量均顯著增加(P＜0.05)。在卵巢切除各組中，乳酸菌菌落數(shù)量呈上升趨勢(shì)，灌胃劑量為15mg/(kg·d)組較空白組顯著增加；空白組雙歧桿菌菌落數(shù)量高于其他劑量組，且均未達(dá)到顯著水平；灌胃劑量為10mg/(kg·d)和15mg/(kg·d)組厭氧菌菌落數(shù)量均顯著低于空白組(P＜0.05)，但灌胃劑量為5mg/(kg·d)組厭氧菌菌落數(shù)量顯著增加(P＜0.05)；與空白組相比，卵巢切除其他各組大腸桿菌和腸球菌菌落數(shù)量顯著下降(P＜0.05)。

3 結(jié)論與討論

本研究的主要目的是探討花椒精對(duì)去勢(shì)大鼠腸道健康的影響。從本研究結(jié)果看，花椒精能抑制腸道中大腸桿菌及腸球菌等有害菌的生長(zhǎng)，減少了游離氨的生成，使腸道pH值下降；花椒精促進(jìn)了腸道中乳酸菌的生長(zhǎng)，雙歧桿菌數(shù)量下降但總體達(dá)到了相對(duì)穩(wěn)定的水平，10mg/(kg·d)組和15mg/(kg·d)組SCFAs呈上升趨勢(shì)，但與花椒精灌胃劑量無(wú)關(guān)。腸道健康的改善與增加短鏈脂肪酸SCFAs產(chǎn)量、降低腸道pH值、降低腸道中氨和苯酚濃度、降低腸道中次級(jí)膽汁酸分泌、減少排空時(shí)間和改善細(xì)菌活性等方面相關(guān)[15]。腸道微生物對(duì)維持腸道正常的生理功能具有重要作用，在機(jī)體中未消化的多糖、低聚糖、蛋白質(zhì)、肽和糖蛋白等食物殘?jiān)M(jìn)入大腸，被腸道微生物進(jìn)一步分解發(fā)酵，糖類(lèi)發(fā)酵產(chǎn)生乙酸、丙酸、丁酸等短鏈脂肪酸和CO2、CH4、H2等氣體，含氮化合物被微生物發(fā)酵產(chǎn)生游離氨、苯酚等產(chǎn)物，因此進(jìn)入大腸的食物殘?jiān)煞种苯佑绊懩c道發(fā)酵產(chǎn)物和腸道菌群的分布，如膳食纖維多為益生因子，有利于腸道中乳酸菌及雙歧桿菌的生長(zhǎng)，產(chǎn)生豐富的SCFAs改善腸道pH值，促進(jìn)腸細(xì)胞生長(zhǎng)，抑制結(jié)腸癌等。氨是不消化蛋白質(zhì)在結(jié)腸內(nèi)腐敗的主要產(chǎn)物，它能改變結(jié)腸表皮細(xì)胞的形態(tài)和代謝，被認(rèn)為是結(jié)腸內(nèi)潛在的腫瘤促進(jìn)因子，游離氨主要是由小腸中谷氨酰胺代謝產(chǎn)生[16]，大腸微生物代謝也可以產(chǎn)生[17-19]。另外，一部分游離氨在大腸中可被用于細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成[20]。綜合有害菌數(shù)量、游離氨、pH值及SCFAs含量的變化可以看出，花椒精能促進(jìn)大鼠腸道的發(fā)酵作用，對(duì)去勢(shì)大鼠腸道健康有益。本研究對(duì)于開(kāi)發(fā)花椒精功能性食品具有一定的參考價(jià)值，對(duì)于花椒精促進(jìn)腸道健康的機(jī)理的研究有更為深遠(yuǎn)的意義，還有待進(jìn)一步研究。

[1]CHUNG M S.Volatile compounds ofZanthoxylum piperitumA.P.DC.[J].Food Science and Biotechnology, 2005, 14(4): 529-532.

[2]KO Y S, HAN H J.Chemical constituents of Korean chopi(Zanthoxylum piperitum) and sancho (Zanthoylum schinifolium)[J].Korean Journal of Food Science and Technology, 1996, 28(1): 19-27.

[3]袁娟麗.花椒揮發(fā)油的抗炎、鎮(zhèn)痛作用[J].中藥材, 2010, 33(5):794-797.

[4]王朝暉.花椒揮發(fā)油鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)藥房, 2011, 22(3):218-219.

[5]KOUASSI M A, JEAN R I, KARINE N I, et a1.Antileishmanial activities associated with plants used in the Malian[J].Traditional Medicine Journal of Ethnopharm Ecology, 2007, 110(1): 99-l04．

[6]干信, 吳士筠, 高雯琪.花椒揮發(fā)油抑菌作用研究[J].食品科學(xué),2009, 30(21): 128-130.

[7]韋敏, 臧林泉, 陶亮.花椒揮發(fā)油對(duì)離體豚鼠氣管平滑肌作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].蛇志, 2007, 19(3): 184-187.

[8]趙晨, 李蓉, 鄒國(guó)林.桂丁、花椒揮發(fā)油抗氧化活性及其方法研究[J].武漢大學(xué)學(xué)報(bào), 2008, 54(4): 447-450.

[9]黃海潮, 王如意, 周偉民.花椒揮發(fā)油對(duì)嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞的殺傷作用[J].黑龍江醫(yī)藥, 2010, 23(4): 514-515.

[10]馬建腸, 石應(yīng)康, 方定志.花椒揮發(fā)油對(duì)實(shí)驗(yàn)性動(dòng)脈粥樣硬化的影響[J].四川大學(xué)學(xué)報(bào), 2005, 36(5): 696-699.

[11]LE L R K, BROWN I L, HU Y, et al.Effect of dietary resistant starch and protein on colonic fermentation and intestinal tumourigenesis in rats[J].Carcinogenesis, 2006, 28(2): 240-245.

[12]LIN H C, VISEK W J.Large intestinal pH and ammonia in rats:dietary fat and protein interactions[J].The Journal of Nutrition, 1991,121(6): 832-843.

[13]劉雄, 張煥容, 楊發(fā)龍, 等.高直鏈玉米淀粉對(duì)大鼠腸道發(fā)酵影響的研究[J].營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào), 2007, 29(4): 372-373.

[14]CHANEY A L, MARBACH E P.Modif ied reagents for determination of urea and ammonia[J].Clinical Chemistry, 1962, 8(2): 130-132.

[15]WINDMUELLER H G.Glutamine utilization by the small intestine[J].Advances in Enzymology and Related Areas of Molecular Biology,1982, 53: 201-238.

[16]BUGAUT M, BENTEJAC M.Biological effects of short-chain fatty acids in nonruminant mammals[J].Annual Review of Nutrition, 1993,13: 217-241.

[17]VINCE A, DAWSON A M, PARK N, et al.Ammonia production by intestinal bacteria[J].Gut, 1973, 14: 171-177.

[18]MASON V C.Metabolism of nitrogenous compounds in the large gut[J].Proceedings of the Nutrition Society, 1984, 43(1): 45-53.

[19]WRONG O M, VINCE A.Urea and ammonia metabolism in the human large intestine[J].Proceedings of the Nutrition Society, 1984,43(1): 77-86.

[20]RéMéSY C, DEMIGNé C.Specific effects of fermentable carbohydrates on blood urea flux and ammonia absorption in the rat cecum[J].Journal of Nutrition, 1989, 119(4): 560-565.