■貢 筱 高秀華， 湯海鷗 吳學(xué)壯 段文娟 郄彥昭

（1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，北京 100081；2.生物飼料開發(fā)國家工程研究中心，北京 100081）

飼用酶制劑是由微生物發(fā)酵的天然產(chǎn)物，是一種安全的綠色飼料添加劑。飼料中外源添加酶制劑能夠充分利用和節(jié)約飼料資源，提高飼料轉(zhuǎn)化率，減少環(huán)境污染，特別是葡萄糖氧化酶（Glucose oxidase，GOD）作為飼料添加劑在復(fù)合酶中使用，可以進一步提高復(fù)合酶的應(yīng)用效果。一些學(xué)者研究表明，復(fù)合酶的添加能消除飼料原料中抗營養(yǎng)因子所產(chǎn)生的負面效果，補充內(nèi)源酶的不足，而葡萄糖氧化酶能催化腸道內(nèi)的葡萄糖產(chǎn)生葡萄糖酸和過氧化氫，并消耗大量腸道內(nèi)氧氣，阻礙有害菌繁殖的同時又為厭氧有益菌的增殖提供條件，增強了養(yǎng)殖動物的免疫能力[1-6]。目前，很多國家已經(jīng)禁止或限制抗生素在飼料中的使用，無抗畜禽產(chǎn)品將成為發(fā)展主流，而當前酶制劑作為飼料添加劑引起了極大的關(guān)注，其對肉雞生長性能影響的研究報道比較多見，但酶制劑與葡萄糖氧化酶聯(lián)用對肉雞生長性能影響的研究報道比較少。本試驗旨在研究肉雞飼料中添加不同劑量的葡萄糖氧化酶、復(fù)合酶對肉雞生長性能的影響，并初步確定葡萄糖氧化酶和復(fù)合酶的適宜添加量，為該新型飼料添加劑的應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗用復(fù)合酶主要成分為蛋白酶、淀粉酶、β-甘露聚糖酶、α-半乳糖苷酶、木聚糖酶和纖維素酶。復(fù)合酶及葡萄糖氧化酶均由北京挑戰(zhàn)生物技術(shù)有限公司提供。試驗場地為中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院中試基地養(yǎng)雞場。

1.2 試驗設(shè)計

試驗采用單因子完全隨機設(shè)計，將432只1日齡健康A(chǔ)A肉仔雞[(46±2)g]隨機分為6個處理，每個處理6個重復(fù)，每個重復(fù)12只雞（公、母各半），其中空白Ⅰ組飼喂基礎(chǔ)飼糧，Ⅱ、Ⅲ組分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加500 g/t復(fù)合酶和25 g/t葡萄糖氧化酶、500 g/t復(fù)合酶和100 g/t葡萄糖氧化酶，Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ組分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加250、500、1 000 g/t復(fù)合酶。整個試驗期按試雞日齡分為1～21日齡和22～42日齡2個階段，全期共42 d。在試驗的第21 d和42 d分別對每組雞只和飼料進行稱重，計算每階段試驗雞平均日采食量、平均日增重、料重比。各處理組均勻分布在雞舍各處，通風(fēng)良好，自由采食和飲水，24 h光照。

1.3 試驗飼料

玉米-豆粕-小麥型基礎(chǔ)日糧，日糧配比和營養(yǎng)水平參照NRC(1994)和中國肉雞飼養(yǎng)標準（2004），再結(jié)合生產(chǎn)實踐中的能量、蛋白質(zhì)和其它各種營養(yǎng)物質(zhì)實際添加量配制玉米-豆粕-小麥型基礎(chǔ)日糧?；A(chǔ)日糧配方及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.4 測定指標與計算公式

分別觀測各組采食、飲水、活動等情況，按1～21 d、22～42 d分別記錄各階段試雞采食量、死亡只數(shù)、體重，計算各階段平均體重、平均日采食量、日增重、料重比。

平均日增重(g)=（末重－初重）/試驗天數(shù)；

平均日采食量(g)=總耗料量/總飼養(yǎng)日；

料重比=總耗料/總增重。

1.5 試驗數(shù)據(jù)處理

使用SAS 6.12軟件中的GLM程序?qū)υ囼灁?shù)據(jù)進行方差分析，使用Duncan's法比較各平均數(shù)間的差異顯著性。

2 結(jié)果

2.1 不同劑量葡萄糖氧化酶和復(fù)合酶對肉雞生長前期生長性能的影響(見表2)

表2 不同劑量葡萄糖氧化酶和復(fù)合酶對肉雞（1～21日齡）生長性能的影響

由表2分析結(jié)果可知，在肉雞生長前期(1～21日齡)，對照組肉雞的生長性能劣于各加酶組，其中平均日增重和料重比均與Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ組存在顯著差異(P＜0.05)，與Ⅳ、Ⅴ兩組間差異不顯著(P＞0.05)。平均日采食量各組間無顯著差異(P＞0.05)。

2.2 不同劑量葡萄糖氧化酶和復(fù)合酶對肉雞生長后期生長性能的影響（見表3）

表3 不同劑量葡萄糖氧化酶和復(fù)合酶對肉雞（22～42日齡）生長性能的影響

在肉雞生長后期（22～42日齡），對照組肉雞平均日增重和料重比與Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ組存在顯著差異（P＜0.05）。平均日采食量各組間無顯著差異（P＞0.05）。料重比隨酶制劑添加量的增加逐漸降低，在500 g/t復(fù)合酶的基礎(chǔ)上添加25 g/t和100 g/t的葡萄糖氧化酶可進一步降低料重比，分別較對照組降低了3.48%和3.98%。

2.3 不同劑量葡萄糖氧化酶和復(fù)合酶對肉雞生長全期生長性能的影響（見表4）

表4 不同劑量葡萄糖氧化酶和復(fù)合酶對試驗全期(1～42 d)肉雞生長性能的影響

由表4可見，試驗全期（1～42日齡）對照組各項生長性能指標均低于（Ⅳ組平均日增重略低于對照組）各加酶組，平均日增重、平均日采食量和料重比與Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ組存在顯著差異（P＜0.05），與Ⅳ、Ⅴ組相比無顯著差異（P＞0.05）。料重比隨酶制劑添加量的增加逐漸降低，在500 g/t復(fù)合酶的基礎(chǔ)上添加25 g/t和100 g/t的葡萄糖氧化酶料重比分別較對照組降低了2.52%和3.03%。

3 討論

3.1 不同劑量葡萄糖氧化酶和復(fù)合酶對1～21日齡肉雞生長性能的影響

本試驗在生長前期（1～21日齡）肉雞的各項生長性能指標受酶制劑添加量的影響程度較大，對照組各項生長指標均劣于其它各加酶組，復(fù)合酶的添加量為250 g/t時，肉雞生長性就能得到了一定的改觀。肉雞的生長性能隨著日糧復(fù)合酶添加劑量的增加而逐漸提高，當添加到1 000 g/t時，肉雞的平均日增重顯著高于對照組(P＜0.05)，料重比降低了4.70%，亦與對照組存在顯著差異(P＜0.05)。這主要是由于在生長前期肉雞消化功能還未完善，消化酶分泌不足，從而限制其生長。本試驗中的復(fù)合酶補充了蛋白酶和淀粉酶，提高了飼料蛋白質(zhì)和淀粉的消化率，使得肉雞的生長性能得到充分發(fā)揮[7-9]。

在500 g/t復(fù)合酶的基礎(chǔ)上添加25 g/t和100 g/t的葡萄糖氧化酶顯著提高了AA肉雞的日增重，并進一步降低了料重比。原因可能有以下幾點：第一，葡萄糖氧化酶能夠與腸道內(nèi)容物中的葡萄糖作用產(chǎn)生葡萄糖酸，從而降低腸道pH值，起到酸化劑的作用。已有研究表明，酸化劑對維持腸黏膜形態(tài)和結(jié)構(gòu)有顯著作用。宋海彬等（2010）[10]認為，葡萄糖氧化酶的添加對肉雞腸道的發(fā)育有促進作用，能顯著優(yōu)化肉雞小腸形態(tài)結(jié)構(gòu)，從而為消化道的成熟和消化吸收提供了良好的物質(zhì)基礎(chǔ)。第二，葡萄糖氧化酶能夠與飼料中的葡萄糖作用產(chǎn)生葡萄糖酸，從而降低腸道pH值，這在一定程度上可以改善腸道內(nèi)微生態(tài)。酸性環(huán)境有利于乳酸桿菌等有益菌的生長繁殖，對大腸桿菌、沙門氏菌等有害菌有抑制作用[11]。國外的研究結(jié)果也表明，在肉雞日糧中添加檸檬酸、乳酸及磷酸型復(fù)合酸化劑可以降低腸道pH值和沙門氏菌含量，提高肉雞增重[12]。此外，葡萄糖氧化酶在與葡萄糖作用的過程中消耗氧氣，為厭氧而耐酸的腸道有益微生物提供適宜的環(huán)境，促進有益菌生長而抑制好氧、不耐酸的病原微生物的繁殖，達到維持腸道菌群平衡，保證動物健康的目的。

3.2 不同劑量葡萄糖氧化酶和復(fù)合酶對22～42日齡肉雞生長性能的影響

在肉雞生長后期（22～42日齡），對照組各項生長指標依然劣于其它各加酶組（Ⅳ組平均日增重略低于對照組）。對照組的平均日增重和料重比與Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ組存在顯著差異（P＜0.05），平均日采食量各組之間差異不顯著（P＞0.05）。這主要是由于日糧中存在很多抗營養(yǎng)因子，導(dǎo)致肉雞不能對日糧中的營養(yǎng)物質(zhì)進行消化吸收從而抑制肉雞生長。復(fù)合酶的添加極大地改善了肉雞的消化能力，并且消除了飼料原料中抗營養(yǎng)因子所產(chǎn)生的負面效果，從而顯著改善了肉雞生長性能[13-15]。

在500 g/t復(fù)合酶的基礎(chǔ)上添加25 g/t和100 g/t的葡萄糖氧化酶，進一步降低了料重比，且平均日增重也有顯著提高。原因可能是因為葡萄糖氧化酶能降低腸道pH值，為消化酶更好地發(fā)揮其作用提供有利的pH值環(huán)境，提高酶原激活率，從而提高消化酶的活性。宋海彬等(2010)[10]研究結(jié)果表明，葡萄糖氧化酶使21 d和42 d肉雞消化道中淀粉酶和胰蛋白酶活性顯著提高。提高消化酶活性，從而提高了營養(yǎng)物質(zhì)消化率，進而降低料重比。許多類似研究表明，飼料酸化劑可以提高消化酶水平[16-17]。

3.3 不同劑量葡萄糖氧化酶和復(fù)合酶對1～42日齡肉雞生長性能的影響

縱觀肉雞全期（1～42日齡）試驗結(jié)果可以看出，相對于對照組，復(fù)合酶的添加對肉雞的各項生長指標都起到了改善作用，這說明復(fù)合酶可以有效的改善肉雞對日糧的消化吸收能力，提高日糧的消化率，且在500 g/t復(fù)合酶的基礎(chǔ)上添加25 g/t和100 g/t的葡萄糖氧化酶可進一步降低料重比。李靖等（2009）[18]研究了葡萄糖氧化酶對肉雞生長性能及經(jīng)濟效益的影響，結(jié)果表明試驗組肉雞的平均體重、凈增重和日增重均高于空白對照組，平均采食量均略高于對照組(P＞0.05)，平均增重耗料成本低于對照組(P＜0.05)。

4 結(jié)論

①肉雞飼糧中添加復(fù)合酶能顯著提高（Ⅳ組平均日增重略于低對照組）肉雞平均日增重，降低平均料重比。

②在復(fù)合酶的基礎(chǔ)上添加葡萄糖氧化酶可進一步提高肉仔雞體重、平均日增重，降低平均料重比。