隋世燕 趙茹茜

（1.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)部動物生理生化重點開放實驗室，南京210095；2.大理學(xué)院實驗動物中心，大理 671000）

流行病學(xué)調(diào)查顯示，早期營養(yǎng)不良會增加成年后糖尿病、高血壓、高血脂的發(fā)病率。由于早期營養(yǎng)的重要性，Lucas［1］于1998年提出營養(yǎng)程序化（nutritional programming）概念，即在機體發(fā)育的關(guān)鍵時期或敏感期，營養(yǎng)狀況的改變使機體產(chǎn)生適應(yīng)性的細胞增殖改變，進而導(dǎo)致組織或器官長期性的改變。2001年Ozanne［2］在研究Ⅱ型糖尿病時提出了代謝程序化（metabolic programming）的概念，即出生后早期對不利環(huán)境的適應(yīng)，引起胰島結(jié)構(gòu)和內(nèi)分泌功能的改變以及靶器官對胰島素的敏感性下降，并持續(xù)到成年后，使Ⅱ型糖尿病易感性增加?，F(xiàn)在，代謝程序化泛指在生命發(fā)育的關(guān)鍵期或敏感期受到刺激或損傷，導(dǎo)致機體組織或器官長期或永久性的改變。

哺乳動物在懷孕期和妊娠期的營養(yǎng)狀況能夠影響其卵泡發(fā)生、排卵及受精卵在子宮內(nèi)的成活，從而影響產(chǎn)仔數(shù)或產(chǎn)活仔數(shù)等繁殖指標(biāo)，這一影響能夠遺傳給后代，造成其繁殖功能發(fā)生紊亂。本文就有關(guān)母體營養(yǎng)對后代繁殖功能的影響及其可能機制的研究進行綜述，旨在為正確理解或解決畜禽生產(chǎn)中繁殖率下降的問題提供可靠的理論支持。

1 母體營養(yǎng)對母體本身內(nèi)分泌、代謝的影響

Guzman等［3］用含有20%酪蛋白的正常飼糧和含10%酪蛋白的限飼飼糧來飼喂動物，將其分為4個組，即懷孕期和哺乳期均飼喂限飼飼糧組；懷孕期和哺乳期均飼喂正常飼糧組；僅懷孕期或僅哺乳期飼喂限飼飼糧組，各組飼喂量相同。結(jié)果發(fā)現(xiàn)懷孕19d時，飼喂限飼飼糧母體血清孕激素、雌二醇、睪酮和皮質(zhì)醇濃度顯著升高，而催乳素濃度未發(fā)生變化。Rosario等［4］對母鼠蛋白質(zhì)限飼，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在懷孕19d時，母鼠血清胰島素、胰島素樣生長因子－Ⅰ（IGF－Ⅰ）和瘦素（leptin）濃度顯著降低。

2 母體營養(yǎng)對母體胎盤功能的影響

胎盤是胎兒與母體的唯一紐帶，是保證母體正常妊娠及胎兒發(fā)育的關(guān)鍵因素，胎盤是糖皮質(zhì)激素的重要靶器官。糖皮質(zhì)激素對胎兒有雙重作用，既可以促進細胞分化使胎兒器官成熟，也可以抑制細胞增殖。

胎兒生長的主要決定因素是胎盤的營養(yǎng)轉(zhuǎn)運。氨基酸通過胎盤屏障主要依靠3種轉(zhuǎn)運蛋白，即?；撬徂D(zhuǎn)運蛋白、A系統(tǒng)轉(zhuǎn)運蛋白和L系統(tǒng)轉(zhuǎn)運蛋白。A系統(tǒng)轉(zhuǎn)運蛋白主要轉(zhuǎn)運分子質(zhì)量較小的Na＋依賴中性氨基酸，如丙氨酸、絲氨酸和谷氨酰胺；L系統(tǒng)轉(zhuǎn)運蛋白主要轉(zhuǎn)運分子質(zhì)量較大的中性氨基酸，如亮氨酸。Rosario等［4］發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)限飼的母鼠在懷孕19和21d時胎盤氨基酸轉(zhuǎn)運子的活性受到抑制，使胎盤胰島素濃度降低。胰島素和IGF－Ⅰ參與的氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白活動受哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路調(diào)控［5］。在羊和豬中，母體胰島素樣生長因子（IGF）能夠調(diào)控胎盤生長和功能以及營養(yǎng)在母體和孕體間的分配，還能調(diào)控豬的出生重，高水平蛋白質(zhì)增加IGF－Ⅰ濃度，但蛋白質(zhì)水平不影響胰島素樣生長因子－Ⅱ（IGF－Ⅱ）的濃度［6］。有報道，在宮內(nèi)生長遲緩時，豬胎盤中這些轉(zhuǎn)運蛋白活性均降低［7］，母體營養(yǎng)不良還造成胎盤血流量減少。

mTOR是生長因子、營養(yǎng)、能量和應(yīng)激等多種細胞外信號的中心整合子。生長因子和激素引起的mTOR激活受磷脂酰肌醇－3－激酶（PI3K）的調(diào)控；營養(yǎng)水平，特別是氨基酸水平是mTOR另外一個主要的上調(diào)控制子，mTOR作為營養(yǎng)感受器促進胎盤滋養(yǎng)層細胞的分化。真核細胞翻譯起始因子4E結(jié)合蛋白1（4EBP1）和核糖體S6蛋白激酶1（S6K1）是mTOR通路中的下游底物，該信號通路的活化通常表現(xiàn)出4EBP1和S6K1的磷酸化。Rosario等［4］發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)限飼母鼠在懷孕19和21d時，胎盤磷酸化的4EBP1（p－4EBP1）和磷酸化的S6K1（p－S6 K1）表達顯著降低。

3 母體營養(yǎng)對后代胚胎發(fā)育和存活率的影響

母體子宮內(nèi)環(huán)境能對后代產(chǎn)生長期的程序化影響，并改變后代成年后對糖尿病、肥胖、高血壓等代謝疾病的易感性。關(guān)鍵發(fā)育階段中的胚胎能對母體子宮內(nèi)環(huán)境的輕微變化作出反應(yīng)，而子宮內(nèi)環(huán)境受到許多因子的影響，其中包括母體的營養(yǎng)和內(nèi)分泌狀況。

母豬交配后飼喂高營養(yǎng)飼糧降低了胚胎的成活率，血液中的孕酮的濃度顯著降低［8］，相反，在飼糧中補充孕酮則提高胚胎成活率。Kwong等［9］研究發(fā)現(xiàn)，雌鼠交配后0～4.25d飼喂低蛋白質(zhì)飼糧，囊胚數(shù)量減少，細胞分化速度減慢，細胞凋亡增加。Smits等［10］在每千克試驗組飼糧中添加3g魚油，從母豬分娩前8天持續(xù)到仔豬19d斷奶，結(jié)果與對照組相比，試驗組顯著增加了0～7胎母豬的產(chǎn)仔數(shù)和產(chǎn)活仔數(shù)。而Quesnel等［11］在母豬懷孕的第1周每天飼喂不同水平（2或4kg）的飼糧，懷孕27d時屠宰發(fā)現(xiàn)，胚胎存活率、活胚數(shù)及胚胎重和長度都沒有變化。

印跡基因的印跡功能發(fā)生紊亂將導(dǎo)致多種發(fā)育異常及死胎，并且印跡基因?qū)Νh(huán)境和營養(yǎng)條件特別敏感。H19和IGF－Ⅱ基因是目前研究最多的印跡基因，兩者在人類和小鼠均出現(xiàn)印跡，IGF－Ⅱ基因只在來源于父系的等位基因上獲得表達（母系基因沉默，即母系印跡），該基因失活時，出生胎兒的體重僅為正常組胎兒的60%。H19基因是母系表達基因（父系基因沉默，即父系印跡），當(dāng)H19基因失活后，其雌性胎兒出生時的體重比正常胎兒重27%。

4 母體營養(yǎng)對后代原始生殖細胞（PGCs）重編程和分化發(fā)育的影響及其機制

小鼠PGCs最早出現(xiàn)于交配后第7天，原始卵泡是哺乳動物卵巢卵泡的最早形式，小鼠在懷孕第17天時，胚胎中粒層細胞開始包裹單個的卵母細胞，形成小鼠原始卵泡。

母羊在懷孕早期營養(yǎng)不良抑制卵巢增殖的細胞增殖抗原標(biāo)記物（Ki67）基因的表達，而促使卵巢凋亡的髓樣細胞白血?。?（Mcl－1）基因和B細胞淋巴瘤/白血病2基因關(guān)聯(lián)X蛋白（Bax）基因的表 達［12］。 骨 形 態(tài) 發(fā) 生 蛋 白 （BMP）2、BMP4 和BMP7基因在卵巢上的表達與PGCs的增殖有關(guān)，BMP4促進PGCs的凋亡，但不損傷其增殖，從而調(diào)控PGCs的數(shù)量，且BMP4引起的PGCs凋亡細胞中同源異型盒基因（MSX1和MSX2）的表達升高［13］。

PI3Ks通路在卵泡發(fā)生中具有重要的作用，脂質(zhì)磷酸酶（PTEN）是一個很有效的磷脂酰肌醇－3－激酶－蛋白激酶B（PI3K－Akt）通路的負性調(diào)節(jié)因子，通過磷酸化它的底物叉頭框蛋白3a（FoxO3a），造成PI3K去磷酸化，間接抑制PI3K的活動［14］。因此，PI3K和PTEN的平衡影響著卵泡的發(fā)生。Zhang等［15］對懷孕16.5d母鼠的胎兒卵巢和分娩后3d的仔鼠卵巢進行體外培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，胰島素能夠通過PTEN－PI3K通路抑制懷孕16.5 d母鼠的胎兒卵巢卵泡的發(fā)生，通過胰島素受體－磷脂酰肌醇－3－激酶－蛋白激酶B（InsR－PI3KAkt）通路促進分娩后3d的仔鼠卵巢卵泡的發(fā)生，說明胰島素對小鼠卵泡發(fā)生具有重要作用，且存在時間特異性。

5 母體營養(yǎng)對后代下丘腦－垂體－性腺（HPG）軸發(fā)育和性成熟的影響及其機制

leptin是肥胖基因（ob）的表達產(chǎn)物，在很多器官中都能合成，包括卵巢，leptin和它的受體對排卵、卵母細胞的成熟和類固醇生成具有重要的作用。leptin能夠抑制促性腺激素釋放激素（GnRH）預(yù)處理的未成熟動物排卵，加速動物初情期的開始。雌二醇也能夠增加中樞l(wèi)eptin的靈敏度和leptin受體的表達。

Smith等［16］研究發(fā)現(xiàn)，蛋白質(zhì)限飼母鼠分娩后2d雄性仔鼠血漿皮質(zhì)醇濃度顯著降低，21d斷奶時，母體懷孕期和哺乳期均飼喂正常飼糧和僅懷孕期飼喂限飼飼糧的仔鼠血漿中雌二醇濃度顯著高于母體懷孕期和哺乳期均飼喂限飼飼糧和僅哺乳期飼喂限飼飼糧的仔鼠，這可能是由于母體懷孕期高濃度皮質(zhì)醇抑制了胎兒垂體－腎上腺軸活動，從而造成胎兒出生后2d血漿皮質(zhì)醇濃度顯著降低；胎兒過度暴露在糖皮質(zhì)激素中會延遲其初情期開始的時間，這可能是母體懷孕期和哺乳期均飼喂限飼飼糧和僅哺乳期飼喂限飼飼糧的仔鼠初情期晚于母體懷孕期和哺乳期均飼喂正常飼糧和僅懷孕期飼喂限飼飼糧的仔鼠的原因。

肽類激素Kisspeptin是腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因Kiss1的表達產(chǎn)物，通過G蛋白偶聯(lián)受體54（GPR54）刺激GnRH的釋放，控制促性腺激素分泌和動物初情期的開始。leptin調(diào)控下丘腦Kiss1基因的表達，Castellano等［17］對哺乳期 Wistar大鼠進行不同水平的飼喂，結(jié)果表明，過度飼喂組初情期提前，且下丘腦leptin和Kiss1基因高表達，而限飼組結(jié)果則相反。成年鼠促性腺激素的釋放依賴于Kiss1神經(jīng)元，是GnRH上游調(diào)控元件，HPG軸的活動被新生期雌激素所影響，在腦弓狀核抑制Kiss1基因的表達，可能與性甾體在此區(qū)負反饋促性腺激素分泌有關(guān)，在腦視前室周核增強Kiss1基因的表達，可能與性甾體在此區(qū)正反饋促性腺激素分泌有關(guān)［18］。最近研究發(fā)現(xiàn)，Kiss1神經(jīng)元的1個亞型與神經(jīng)激肽B（NKB）共表達，而NKB在繁殖中也具有重要的作用［19］。

腦腸肽（ghrelin）是新近發(fā)現(xiàn)的1種含有28個氨基酸殘基的多肽，是生長激素促分泌素受體（GHSR）的天然配體，在調(diào)控GnRH分泌和初情期開始中具有重要的作用。Martini等［20］給青春期和成熟的雄性大鼠反復(fù)多次注射ghrelin，可持續(xù)抑制促黃體生成素（LH）分泌，并推遲青春期出現(xiàn)，表明高水平ghrelin可抑制生殖腺軸的激活。體外試驗也證實，ghrelin可顯著抑制LH對GnRH的反應(yīng)性，并增強促卵泡生成素（FSH）對GnRH 的反應(yīng)性［20］。另外，人體內(nèi)試驗也證實ghrelin可延遲LH的釋放并降低其脈沖幅度［21］。

6 母體營養(yǎng)對雄性后代繁殖功能的影響及其機制

睪丸睪酮的濃度決定著雄性動物精子的發(fā)生。Teixeira等［22］對雄鼠進行蛋白質(zhì)限飼和能量限飼，發(fā)現(xiàn)21d時血清和睪丸睪酮濃度均顯著升高，而血清雌二醇濃度降低，睪丸芳香酶和雌激素受體α（ERα）基因表達顯著降低，雄激素受體（AR）蛋白合成和基因表達均升高。

Ramos等［23］對哺乳期 Wistar大鼠限飼，雄性仔鼠21d斷奶時限飼組體重明顯降低，血清中雌二醇濃度顯著低于對照組，下丘腦中GnRH神經(jīng)元的分布發(fā)生改變，雌二醇濃度的降低可能與GnRH神經(jīng)元的異位有關(guān)。

在妊娠和哺乳期進行低蛋白質(zhì)飼喂，研究其對雄鼠繁殖方面的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，后代在70d時血清中LH和睪酮濃度降低，270d時生育力下降，精子數(shù)減少了50%，說明蛋白質(zhì)限飼使后代的繁殖壽命縮短；肛門與生殖器之間的距離（AGD）受睪丸睪酮的調(diào)控，可作為出生時性分化的標(biāo)志，19d胎兒的AGD顯著增加，預(yù)示著胎兒經(jīng)胎盤獲得的母體雄激素增加，懷孕19d時母體血清中睪酮濃度的升高也可能是胎兒AGD增加的原因［3］。

研究發(fā)現(xiàn)，雄性倉鼠器官（睪丸、附睪）和激素（睪酮）濃度對營養(yǎng)限飼的敏感性強于雌鼠（子宮、卵巢和雌二醇），給大鼠注射IGF－Ⅰ后檢測，發(fā)現(xiàn)血液中IGF－Ⅰ濃度升高，而睪丸組織中IGF－Ⅰ濃度無變化，這說明睪丸中IGF－Ⅰ主要由睪丸局部組織產(chǎn)生的［24］。

7 母體營養(yǎng)對雌性后代繁殖功能的影響及其機制

卵巢功能對營養(yǎng)狀態(tài)十分敏感，早期胎兒的營養(yǎng)情況影響卵巢卵泡的儲存，改變排卵率。鼠卵泡第1次發(fā)育波發(fā)生在出生后3～21d，在此期間母體營養(yǎng)不良將造成甲狀腺功能和奶成份發(fā)生改變，因此，哺乳期限飼對后代造成的不良影響可能超過妊娠期。

Ferreira等［25］在大鼠哺乳期進行限飼，后代90d時原始卵泡、初級卵泡和成熟卵泡顯著減少，可能與血管內(nèi)皮生長因子的受體激酶插入嵌合受體（KDR）、fms樣酪氨酸激酶1（Flt－1）、成纖維細胞生長因子Ⅰ型受體（FGFR1）基因低表達有關(guān)。Da Silva Faria等［26］將懷孕 Wistar大鼠分成3組，對照組飼喂標(biāo)準(zhǔn)飼糧，含有23%蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)限飼組飼糧具有與對照組相同的能量水平但僅含8%蛋白質(zhì)，能量限飼組飼喂標(biāo)準(zhǔn)飼糧，但根據(jù)蛋白質(zhì)限飼組平均攝食量限制飼喂量，母鼠分娩后，仔鼠在21d斷奶后全部飼喂標(biāo)準(zhǔn)飼糧。母體蛋白質(zhì)限飼組仔鼠40d時的初級卵泡、次級卵泡、囊狀卵泡數(shù)目顯著增加，但初級卵泡增加不顯著；原始卵泡、成熟卵泡和黃體數(shù)目顯著減少，卵泡數(shù)目在母體蛋白質(zhì)限飼組和能量限飼組之間差別不顯著，可見限飼損傷了仔鼠卵泡的成熟，即母體蛋白質(zhì)限飼組的仔鼠并不是所有的生長卵泡都能生長到排卵階段；90d時母體能量限飼組仔鼠全部卵泡數(shù)均減少，但只有初級卵泡、次級卵泡和成熟卵泡與對照組差異顯著。

雌二醇能夠提高顆粒層細胞對FSH和LH的敏感性，增加顆粒層細胞孕酮的產(chǎn)生，還能調(diào)節(jié)類固醇的產(chǎn)生，促進顆粒層細胞增殖以及維持卵泡的發(fā)育。Da Silva Faria等［26］還發(fā)現(xiàn)，母體蛋白質(zhì)限飼組仔鼠40d時，血清雌激素濃度顯著增加，可能是初級卵泡、次級卵泡和囊狀卵泡增加的原因，同時這些卵泡也是產(chǎn)生雌激素的主要部位。孕激素通過增加cAMP的量提高大鼠顆粒層細胞對FSH的反應(yīng)，抑制FSH引起的雌二醇的產(chǎn)生，抑制仔鼠原始卵泡到初級卵泡的轉(zhuǎn)變。雌二醇還能夠增加鼠卵巢顆粒層細胞促卵泡生成素受體（FSHR）和促黃體生成素受體（LHR）的基因表達，F(xiàn)SHR能夠刺激初級和次級卵泡的生長和分化，母體蛋白質(zhì)限飼組仔鼠40d時，卵巢FSHR和LHR基因表達顯著升高，而90 d時，仔鼠卵巢FSHR表達明顯降低，這可能是母體蛋白質(zhì)限飼組仔鼠90d時初級和次級卵泡減少的原因；卵巢FSHR和LHR對卵泡細胞的終末分化和卵母細胞的成熟具有重要作用，90d時二者的低表達可能與成熟卵泡的減少有關(guān)，同時FSHR的低表達導(dǎo)致芳香酶的低表達。

LH刺激膜細胞產(chǎn)生睪酮，睪酮跨過基膜到達顆粒層細胞，在FSH的作用下，芳香酶將睪酮轉(zhuǎn)變?yōu)榇贫迹?7］，這可能是母體蛋白質(zhì)限飼組仔鼠90d時血清雌二醇濃度各組間差異不顯著的原因［26］。雌二醇或雄激素與FSH的結(jié)合，能夠刺激顆粒層細胞的增殖，胰島素和IGF－Ⅰ能夠增強這種效果。Cyp19編碼的芳香酶是調(diào)控雄激素轉(zhuǎn)變?yōu)榇萍に氐年P(guān)鍵酶，雌二醇對卵泡的增殖效果受細胞周期素D2（cyclin D2）的調(diào)控。

在人和鼠中，雄激素受體（AR）幾乎存在于卵泡發(fā)生的所有階段，對卵泡發(fā)育具有重要的增殖作用［28］。Hu等［29］發(fā)現(xiàn) AR 缺乏的小鼠的黃體數(shù)目明顯減少，顆粒層細胞發(fā)生嚴重凋亡，ER敲除的小鼠黃體數(shù)目也顯著減少，AR、ER全敲除的小鼠不能經(jīng)歷黃體化。母體蛋白質(zhì)限飼組仔鼠AR、ER表達水平降低也可能是成熟卵泡和黃體數(shù)目減少的原因［26］。

Barkan等［30］研究發(fā)現(xiàn)，卵巢leptin及其受體低表達可導(dǎo)致FSHR和LHR的低表達，降低卵泡發(fā)生和芳香酶的表達。GnRH受體的低表達又可導(dǎo)致leptin和它受體的低表達，缺乏leptin的鼠不能生育。母體營養(yǎng)不良對后代造成的一些危害能被新生兒leptin處理所逆轉(zhuǎn)。leptin還能夠提高在排卵中起重要作用的去整合素金屬蛋白酶－1（ADAMTS－1）和組織蛋白酶L的表達；另外，leptin能夠引起ob/ob小鼠的卵泡發(fā)育，促進性腺機能減退鼠黃體的形成和排卵。

母體營養(yǎng)限飼使仔鼠出生1 5 0d時卵巢卵泡生長分化因子－9（GDF－9）、FSHR、ERβ 和參與卵巢類固醇生成的因子3β－羥基類固醇脫 氫 酶 （3β－HSD ）、1 7 － 羥 化 酶 （CYP1 7 A1）及參與排卵的因子孕激素受體（PR）、瘦素長受體（Ob－Rb）基因表達水平發(fā)生不同的變化［31］。GDF－9通過上調(diào)雄激素的合成調(diào)控次級卵泡到三級卵泡的轉(zhuǎn)變，促進睪酮和雌二醇的產(chǎn)生，是CYP1 7 A1基因表達所必需的［32］。GDF－9能夠抑制腔前卵泡過度到囊狀卵泡過程中顆粒層細胞的凋亡和卵泡的閉鎖［33］，因此，GDF－9的減少能夠抑制此階段卵泡的存活和生長，導(dǎo)致囊狀卵泡的減少。氧化還原穩(wěn)態(tài)的紊亂能夠改變基因的表達和被氧化蛋白的累積，對細胞功能具有損害作用。在母體蛋白質(zhì)限飼組仔鼠卵巢組織蛋白羰基和過氧化酶－3明顯增加，卵巢氧化應(yīng)激增強，引起卵泡的凋亡和閉鎖，造成原始卵泡、次級卵泡和囊狀卵泡的減少，同時也說明母體限飼可能損傷了線粒體抗氧化防御系統(tǒng)［31］。氧化應(yīng)激和線粒體功能的紊亂能夠?qū)е录毎蛲觯苯油ㄟ^生殖細胞的死亡或間接通過卵泡閉鎖引起卵泡細胞內(nèi)儲存物的耗竭。

8 母體營養(yǎng)對F2代的跨代影響及其機制

表觀遺傳機制是指不涉及DNA序列改變的基因表達和調(diào)控的可遺傳修飾，是細胞內(nèi)非遺傳信息的遺傳物質(zhì)發(fā)生的改變，而且這種改變在個體發(fā)育和細胞增殖過程中能夠穩(wěn)定傳遞。表觀遺傳受環(huán)境的影響，母體營養(yǎng)可以改變組蛋白修飾、DNA甲基化和非編碼RNA的表達，進而實現(xiàn)調(diào)控后代的生長、發(fā)育和繁殖。

研究發(fā)現(xiàn)，將倉鼠飼喂量減為正常組的70%，F(xiàn)1代仔鼠60d時雄性睪丸、附睪重量減輕，血清睪酮濃度降低，雌性卵巢、子宮重量減輕，血清雌二醇濃度降低，但F2代仔鼠生殖器官和激素水平限飼組與對照組之間差異不顯著。F1、F2代仔鼠雄性比例高于雌性，雄性倉鼠后代出生重和斷奶成活率顯著高于雌性后代［24］。Burdge等［34］在大鼠懷孕期（F0代），用含有18%蛋白質(zhì)的正常飼糧和僅含9%蛋白質(zhì)的限飼飼糧飼喂動物，F(xiàn)1代仔鼠28d斷奶后一直到試驗結(jié)束全部飼喂正常飼糧；F1代雄鼠80d時處死采樣，而雌鼠125d時配種，F(xiàn)2代雄鼠80d時處死采樣。結(jié)果表明，F(xiàn)1代限飼飼糧組雄鼠和F2代所有雄鼠肝臟過氧化物酶體增殖物激活受體α（PPARα）基因和糖皮質(zhì)激素受體（GR）基因與F1代正常飼糧組雄鼠比較，甲基化情況有差異的趨勢，而磷酸烯醇丙酮酸羧激酶（PEPCK）基因甲基化情況差異極顯著，從而影響了基因的表達，說明基因的甲基化能夠跨代遺傳。Bourguignon等［35］研究發(fā)現(xiàn)雌鼠飼喂高脂飼糧，能夠增加后代的體重，降低胰島素敏感性，這種效應(yīng)能夠傳遞到第3代（F3）。

9 小 結(jié)

母體營養(yǎng)水平不僅能夠影響其自身卵巢卵泡發(fā)生、排卵及其相關(guān)基因和受體的表達，導(dǎo)致后代繁殖力發(fā)生紊亂，而且還能產(chǎn)生跨代影響。在生產(chǎn)中，要嚴格按照母豬各階段的營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)進行配制飼糧，不能為了降低成本而縮減蛋白質(zhì)含量或改變蛋白質(zhì)的質(zhì)量。

［1］ LUCAS A.Programming by early nutrition：an experimental approach［J］.The Journal of Nutrition，1998，128（2）：401S－406S.

［2］ OZANNE S E.Metabolic programming in animals［J］.British Medical Bulletin，2001，60：143－152.

［3］ GUZMAN C，CABRERA R，CARDENAS M，et al.Protein restriction during fetal and neonatal development in the rat alters reproductive function and accelerates reproductive ageing in female progeny［J］.Journal of Physiology，2006，572（1）：97－108.

［4］ ROSARIO F J，JANSSON N，KANAI Y，et al.Maternal protein restriction in the rat inhibits placental insulin，mTOR，and STAT3signaling and down－regulates placental amino acid transporters［J］.Endocrinology，2011，152（3）：1119－1129.

［5］ ROOS S，LAGERL?F O，WENNERGREN M，et al.Regulation of amino acid transporters by glucose and growth factors in cultured primary human trophoblast cells is mediated by mTOR signaling［J］.American Journal of Physiology：Cell Physiology，2009，297（3）：C723－C731.

［6］ SfERRUZZI－PERRI A N，OWENS J A，STANDEN P，et al.Early treatment of the pregnant guinea pig with IGFs promotes placental transport and nutrient partitioning near term［J］.American Journal of Physiology：Endocrinology and Metabolism，2007，292（3）：E668－E676.

［7］ WULLSCHLEGER S，LOEWITH R，HALL M N.TOR signaling in growth and metabolism［J］.Cell，2006，124（3）：471－484.

［8］ DE W，AI－RONG Z，YAN L，et al.Effect of feeding allowance level on embryonic survival，IGF－Ⅰ，insulin，GH，leptin and progesterone secretion in early pregnancy gilts［J］.Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition，2009，93（5）：577－585.

［9］ KWONG W Y，WILD A E，ROBERTS P，et al.Ma－ternal undernutrition during the preimplantation period of rat development causes blastocyst abnormalities and programming of postnatal hypertension［J］.Development，2000，127（19）：4195－4202.

［10］ SMITS R J，LUXFORD B G，MITCHELL M，et al.Sow litter size is increased in the subsequent parity when lactating sows are fed diets containing n－3fatty acids from fish oil［J］.Journal of Animal Science，2011，89（9）：2731－2738.

［11］ QUESNEL H，BOULOT S，SERRIERE S，et al.Postinsemination level of feeding does not influence embryonic survival and growth in highly prolific gilts［J］.Animal Reproduction Science，2010，120（1）：120－124.

［12］ LEA R G，ANDRADE L P，RAE M T，et al.Effects of maternal undernutrition during early pregnancy on apoptosis regulators in the ovine fetal ovary［J］.Reproduction，2006，131（1）：113－124.

［13］ CHILDS A J，KINNELL H L，COLLINS C S，et al.BMP signaling in the human fetal ovary is developmentally regulated and promotes primordial germ cell apoptosis［J］.Stem Cells，2010，28（8）：1368－1378.

［14］ ACCILI D，ARDEN K C.FoxOs at the crossroads of cellular metabolism，differentiation，and transformation［J］.Cell，2004，117（4）：421－426.

［15］ ZHANG P，CHAO H，SUN X，et al.Murine folliculogenesis in vitrois stage－specifically regulated by insulin via the Akt signaling pathway［J］.Histochemistry and Cell Biology，2010，134（1）：75－82.

［16］ SMITH J T，DUNGAN H M，STOLL E A，et al.Differential regulation of Kiss－1mRNA expression by sex steroids in the brain of the male mouse［J］.Endocrinology，2005，146（7）：2976－2984.

［17］ CASTELLANO J M，BENTSEN A H，SANCHEZGARRIDO M A，et al.Early metabolic programming of puberty onset：impact of changes in postnatal feeding and rearing conditions on the timing of puberty and development of the hypothalamic kisspeptin system［J］.Endocrinology，2011，152（9）：3396－3408.

［18］ GARCíA－GALIANO D，PINILLA L，TENA－SEMPERE M.Sex steroids and the control of the Kiss1 system：developmental roles and major regulatory actions［J］.Journal of Neuroendocrinology，2012，24（1）：22－23.

［19］ TENA－SEMPERE M.The kisspeptin system as putative target for endocrine disruption of puberty and reproductive health ［M ］//BOURGUIGNON J P，JéGOU B，KERDELHUéB，et al.Multi－system endocrine disruption.New York：Berlin Heidelberg，2011：23－41.

［20］ MARTINI A C，F(xiàn)ERNANDEZ－FERNANDEZ R，TOVAR S，et al.Comparative analysis of the effects of ghrelin and unacylated ghrelin on luteinizing hormone secretion in male rats［J］.Endocrinology，2006，147（5）：2374－2382.

［21］ KLUGE M，SCHUESSLER P，UHR M，et al.Ghrelin suppresses secretion of luteinizing hormone in humans［J］.Journal of Clinical Endocrinology ＆ Metabolism，2007，92（8）：3202－3205.

［22］ TEIXEIRA C V，SILANDRE D，DE SOUZA SANTOS A M，et al.Effects of maternal undernutrition during lactation on aromatase，estrogen，and androgen receptors expression in rat testis at weaning［J］.Journal of Endocrinology，2007，192（2）：301－311.

［23］ RAMOS CDA F，LIMA S S，ROCHA M L，et al.Maternal malnutrition during lactation alters gonadotropin－releasing hormone expression in the hypothalamus of weaned male rat pups［J］.Nutritional Neuroscience，2010，13（4）：170－174.

［24］ LIANG H，ZHANG Z.Food restriction affects reproduction and survival of F1and F2offspring of rat－like hamster［J］.Physiology ＆ Behavior，2006，87（3）：607－613.

［25］ FERREIRA R V，GOMBAR F M，F(xiàn)ARIA T D，et al.Metabolic programming of ovarian angiogenesis and folliculogenesis by maternal malnutrition during lactation［J］.Fertility and Sterility，2010，93（8）：2572－2580.

［26］ DA SILVA FARIA T，DE BITTENCOURT BRASIL F，SAMPAIO F J，et al.Maternal malnutrition during lactation affects folliculogenesis，gonadotropins，and leptin receptors in adult rats［J］.Nutrition，2010，26（10）：1000－1007.

［27］ DRUMMOND A E.The role of steroids in follicular growth［J］.Reproductive Biology and Endocrinology，2006，4：16－27.

［28］ DA SILVA FARIA T，DE BITTENCOURT BRASIL F，SAMPAIO F J，et al.Effects of maternal undernutrition during lactation on estrogen and androgen receptor expressions in rat ovary at puberty［J］.Nutrition，2010，26（10）：993－999.

［29］ HU Y C，WANG P H，YEH S Y，et al.Subfertility and defective folliculogenesis in female mice lacking androgen receptor［J］.Proceedings of the National A－cademy of Sciences of the United States of America，2004，101（31）：11209－11214.

［30］ BARKAN D，HURGIN V，DEKEL N，et al.Leptin induces ovulation in GnRH－deficient mice［J］.The FASEB Journal，2005，19（1）：133－135.

［31］ BERNAL A B，VICKERS M H，HAMPTON M B，et al.Maternal undernutrition significantly impacts ovarian follicle number and increases ovarian oxidative stress in adult rat offspring［J］.PLoS One，2010，5（12）：e15558.

［32］ ORISAKA M，JIANG J Y，ORISAKA S，et al.Growth differentiation factor 9promotes rat preantral follicle growth by up－regulating follicular androgen biosynthesis［J］.Endocrinology，2009，150（6）：2740－2748.

［33］ ORISAKA M，ORISAKA S，JIANG J Y，et al.Growth differentiation factor 9is antiapoptotic during follicular development from preantral to early antral stage［J］.Molecular Endocrinology，2006，20（10）：2456－2468.

［34］ BURDGE G C，SLATER－JEFFERIES J，TORRENS C，et al.Dietary protein restriction of pregnant rats in the F0generation induces altered methylation of hepatic gene promoters in the adult male offspring in the F1and F2generations［J］.British Journal of Nutrition，2007，97（3）：435－439.

［35］ BOURGUIGNON J B，RASIER G，LEBRETHON M C，et al.Neuroendocrine disruption of pubertal timing and interactions between homeostasis of reproduction and energy balance［J］.Molecular and Cellular Endocrinology，2010，324（1/2）：110－120.