黃金鳳 趙志剛 羅 亮 徐奇友＊

（1.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所，哈爾濱150070；2.上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院，上海201306）

消化酶是消化系統(tǒng)（消化腺和消化管）分泌的具有催化食物分解的一類酶，它的催化作用易受外界環(huán)境因素的影響。影響魚類消化酶活性的環(huán)境因素有很多，在自然水體中，由于一年四季的變換，水體溫度也在發(fā)生著很大的變化；魚類屬變溫動物，水溫的變化將直接影響魚體內(nèi)的代謝及生理生化過程［1］。因此，相對于其他的因素，水溫的變化對魚類消化酶活性的影響是最大和最主要的。黎軍勝等［2］、田宏杰等［3］研究表明飼養(yǎng)水溫的變化對消化酶活性具有顯著的影響。消化酶活性的強(qiáng)弱直接影響到魚類對于營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，進(jìn)而影響魚體生長發(fā)育［4］。同樣，消化酶活性大小變化程度與食物組成的變化程度是相關(guān)的，這是魚類本身對所處生態(tài)環(huán)境的一種適應(yīng)，是長期自然選擇的結(jié)果。黎軍勝等［2］、Peres［5］、楊代勤等［6］研究均發(fā)現(xiàn)不同原料對腸道消化酶活性均具有顯著的影響。Abolfathi等［7］研究也發(fā)現(xiàn)營養(yǎng)物質(zhì)的攝入量對斜齒鳊（Rutilus rutilus caspicus）消化管消化酶活性具有顯著影響。在水產(chǎn)養(yǎng)殖中，蛋白質(zhì)是最重要的營養(yǎng)物質(zhì)，對魚類生長具有不可替代的作用，但是蛋白質(zhì)水平過高時(shí)魚體往往無法全部消化吸收而造成浪費(fèi)并污染環(huán)境［8］。黃峰等［9］、邵慶均等［10］研究均發(fā)現(xiàn)增加飼料中蛋白質(zhì)水平能有效地促進(jìn)蛋白酶的活性。因此，根據(jù)消化酶活性隨環(huán)境溫度和飼料蛋白質(zhì)水平的變化情況可以調(diào)整不同水溫下的飼料蛋白質(zhì)水平，以便使飼料中的蛋白質(zhì)更好地被魚體消化吸收，提高飼料的利用率，同時(shí)還可減少魚類糞便中的氮排泄量，減輕水體污染，節(jié)約成本。

松浦鏡鯉（Cyprinus specularis Songpu）是我國鯉科魚類新品種，具有生長速度快、抗病以及抗寒能力強(qiáng)、繁殖力高、體型好等優(yōu)點(diǎn)。了解松浦鏡鯉在不同水溫和飼料蛋白質(zhì)水平條件下的消化生理對提高鏡鯉養(yǎng)殖業(yè)的產(chǎn)量和質(zhì)量、節(jié)約成本、降低污染具有重要意義。但關(guān)于水溫和飼料蛋白質(zhì)水平對松浦鏡鯉腸道消化酶活性影響的文章少有報(bào)道。鑒于此，本文從消化生理的角度，研究水溫和飼料蛋白質(zhì)水平對松浦鏡鯉幼魚腸道消化酶活性的影響，旨在為松浦鏡鯉消化生理學(xué)、營養(yǎng)和飼料學(xué)的研究提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼料配方

本試驗(yàn)采用3×5雙因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，以水溫和飼料蛋白質(zhì)水平為影響因素，共設(shè)15個(gè)處理。其中，水溫分別為18、23和28℃，飼料蛋白質(zhì)水平分別為30.0%、32.0%、34.0%、36.0%和38.0%

試驗(yàn)飼料以魚粉（進(jìn)口）為動物性蛋白質(zhì)源，大豆粕為植物性蛋白質(zhì)源，通過改變次粉添加量調(diào)節(jié)飼料蛋白質(zhì)水平。原料經(jīng)粉碎過40目篩，再按表1所示配方制成5種粒徑為2.0mm顆粒飼料，制成的飼料經(jīng)晾干后，保存于－20℃冰箱中。

表1 試驗(yàn)飼料組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets（air－dry basis） %

1.2 試驗(yàn)用魚與飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)用松浦鏡鯉幼魚由中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所自繁培育，試驗(yàn)在室內(nèi)循環(huán)養(yǎng)殖系統(tǒng)中進(jìn)行，采用自動控溫儀維持所需要的水溫。試驗(yàn)前將幼魚經(jīng)5%的鹽水消毒后在暫養(yǎng)池中馴養(yǎng)2周，挑選體格健壯、規(guī)格整齊、平均體重為（10.11±1.07）g的幼魚1 350尾，隨機(jī)分成15組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30尾魚。試驗(yàn)魚以重復(fù)為單位放入室內(nèi)循環(huán)養(yǎng)殖系統(tǒng)的水族箱中后，調(diào)節(jié)自動控溫儀升或降1～2℃/d至試驗(yàn)設(shè)計(jì)的各溫度梯度，溫度的變動范圍控制在±0.3℃，記錄試驗(yàn)開始時(shí)間。

試驗(yàn)期間，每日投喂3次（08：00、12：00和17：00），每次投喂以飽食無殘餌（少量多次投喂，以魚不再攝食判斷為飽食）為準(zhǔn)，每3周測1次體重并計(jì)算飼料消耗量；定期測定水質(zhì)，并消毒；每3d換水1次，每次換水1/3～1/2；全天24h充氣并維持18℃溶氧＞7.50mg/L，23℃溶氧＞7.00mg/L，28℃溶氧＞6.50mg/L；3個(gè)溫度間水體氨氮和pH差異不大，其中氨氮＜1mg/L，pH為7.52～7.91。試驗(yàn)期為60d。

1.3 樣品采集與處理

飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，停飼24h，從每個(gè)水族箱中隨機(jī)取5尾魚，每組15尾，用麻醉劑（MS 222）麻醉后，在冰盤上快速解剖，取出腸道，剔除其上附屬物，將腸道分為前腸、中腸和后腸（前腸為第1個(gè)回折拐彎點(diǎn)以前，中腸為第2個(gè)回折拐彎處至最后1個(gè)拐彎處，后腸為最后1個(gè)回折拐彎點(diǎn)至肛門之間），保存于－40℃冰箱備用。樣品分析前于4℃冰箱中解凍，用預(yù)冷（0～4℃）的0.86%的生理鹽水洗2次，再用濾紙吸去表面水分，稱重，切碎后與預(yù)冷的0.86%的生理鹽水按1∶9質(zhì)量體積比稀釋，于冰水浴中用高速組織勻漿機(jī)勻漿，勻漿液于高速冷凍離心（0℃，4 000r/min）20min后，取上清液作為粗酶液，置于－20℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 消化酶活性測定

蛋白酶活性測定采用福林－酚（Folin－phenol）法［11］，具體操作如下：取勻漿 粗酶液1mL，37 ℃水浴預(yù)熱5min，加0.5%酪蛋白溶液2mL作為反應(yīng)底物。37℃水浴準(zhǔn)確反應(yīng)15min后加入10%三氯乙酸3mL，4 000r/min離心10min除去沉淀，取 上 清 液 1mL，加 入 0.55mol/L 碳 酸 鈉5mL，再加入福林－酚試劑1mL，于37℃水浴中顯色15min，689nm波長下比色測定。同時(shí)以1mL去離子水作空白對照。脂肪酶和淀粉酶活性均采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒測定，具體方法參見試劑盒所附說明書。蛋白酶活性單位定義：在37℃條件下，每分鐘水解酪蛋白產(chǎn)生相當(dāng)于1μg酪氨酸所需的酶量為1個(gè)酶活性單位。脂肪酶活性單位定義：在37℃條件下，每克組織蛋白質(zhì)在本反應(yīng)體系中與底物反應(yīng)1min，每消耗1μmol底物為1個(gè)酶活性單位。淀粉酶活性單位定義：在37℃條件下，每毫克組織蛋白質(zhì)與底物作用30min，水解10mg淀粉為1個(gè)酶活性單位。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0軟件分析，以水溫和飼料蛋白質(zhì)水平為影響因素，先進(jìn)行雙因素方差分析 （two－way ANOVA），之后采用 Duncan氏法進(jìn)行多重比較，顯著水平設(shè)定為P＜0.05。試驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。根據(jù)腸道蛋白酶活性，采用二階多項(xiàng)式擬合分析確定松浦鏡鯉幼魚最佳蛋白質(zhì)需要量，飼料蛋白質(zhì)水平和腸道蛋白酶活性關(guān)系式為Y＝a＋bX＋c X2，其中X代表蛋白質(zhì)水平，Y代表腸道蛋白酶活性［12］。

2 結(jié) 果

2.1 水溫和飼料蛋白質(zhì)水平對松浦鏡鯉幼魚腸道蛋白酶活性的影響

水溫和飼料蛋白質(zhì)水平對松浦鏡鯉幼魚腸道蛋白酶活性的影響見表2。18℃下，飼料蛋白質(zhì)水平對前腸蛋白酶活性無顯著影響（P＞0.05）；飼料蛋白質(zhì)水平為30.0%組中腸蛋白酶活性顯著低于其他蛋白質(zhì)水平組（P＜0.05）；飼料蛋白質(zhì)水平為30.0%和32.0%的組后腸蛋白酶活性顯著低于其他蛋白質(zhì)水平組（P＜0.05）。23℃下，飼料蛋白質(zhì)水平為30.0%和32.0%的組前腸、后腸蛋白酶活性顯著低于其他蛋白質(zhì)水平組（P＜0.05）；飼料蛋白質(zhì)水平為30.0%的組中腸蛋白酶活性顯著低于飼料蛋白質(zhì)水平為36.0%和38.0%的組（P＜0.05）。28℃下，飼料蛋白質(zhì)水平為30.0%和32.0%的組前腸蛋白酶活性顯著低于其他蛋白質(zhì)水平組（P＜0.05）；飼料蛋白質(zhì)水平為30.0%的組中腸蛋白酶活性顯著低于飼料蛋白質(zhì)水平為34.0%、36.0%和38.0%的組（P＜0.05）；隨飼料蛋白質(zhì)水平的升高，后腸蛋白酶活性顯著升高（P＜0.05），當(dāng)飼料蛋白質(zhì)水平達(dá)到34.0%后，后腸蛋白酶活性變化不再顯著（P＞0.05）。除36.0%蛋白質(zhì)水平下28℃時(shí)前腸蛋白酶活性顯著高于18和23℃時(shí)（P＜0.05）外，其他蛋白質(zhì)水平下水溫對前腸蛋白酶活性未產(chǎn)生顯著影響（P＞0.05）；除32.0%蛋白質(zhì)水平下28℃時(shí)中腸蛋白酶活性與18℃時(shí)差異不顯著（P＞0.05）外，其他蛋白質(zhì)水平下23℃時(shí)中腸蛋白酶活性均顯著高于18和23℃時(shí)（P＜0.05）；各個(gè)蛋白質(zhì)水平下28℃時(shí)后腸蛋白酶活性均顯著高于18℃時(shí)（P＜0.05）。

由表3可知，水溫和飼料蛋白質(zhì)水平均顯著或極顯著影響前腸、中腸和后腸蛋白酶活性（P＜0.05或P＜0.01）。此外，水溫與飼料蛋白質(zhì)水平的交互作用對前腸蛋白酶活性具有極顯著的影響（P＜0.01），對中腸和后腸蛋白酶活性無顯著影響（P＞0.05）。

表2 水溫和飼料蛋白質(zhì)水平對松浦鏡鯉幼魚腸道蛋白酶活性的影響Table 2 Effects of water temperature and dietary protein level on intestinal protease activity of juvenile Songpu mirror carp（Cyprinus specularis Songpu） U/g prot

表3 松浦鏡鯉幼魚腸道蛋白酶活性的雙因素方差分析Table 3 Two－way ANOVA of intestinal protease activity of juvenile Songpu mirror carp（Cyprinus specularis Songpu）

2.2 水溫和飼料蛋白質(zhì)水平對松浦鏡鯉幼魚腸道淀粉酶活性的影響

水溫和飼料蛋白質(zhì)水平對松浦鏡鯉幼魚腸道淀粉酶活性的影響見表4。除了23℃下飼料蛋白質(zhì)水平為30.0%的組前腸淀粉酶活性顯著低于飼料蛋白質(zhì)水平為34.0%和36.0%的組（P＜0.05）外，18、23和28℃下前腸、中腸和后腸淀粉酶活性均未受飼料蛋白質(zhì)水平的顯著影響（P＞0.05），但有隨飼料蛋白質(zhì)水平的升高先升高后降低的趨勢。同一蛋白質(zhì)水平條件下，前腸淀粉酶活性隨溫度的升高先上升后下降，在23℃時(shí)最高，18℃時(shí)最低，二者之間差異顯著（P＜0.05）；中腸和后腸淀粉酶活性隨水溫的升高而顯著升高（P＜0.05），即28℃時(shí)最高，而18℃時(shí)最低。

由表5可知，水溫極顯著影響前腸、中腸和后腸淀粉酶活性（P＜0.01），飼料蛋白質(zhì)水平僅對前腸淀粉酶活性有極顯著影響（P＜0.05），而水溫與飼料蛋白質(zhì)水平的交互作用對前腸、中腸和后腸淀粉酶活性均無顯著影響（P＞0.05）。

表4 水溫和飼料蛋白質(zhì)對松浦鏡鯉幼魚腸道淀粉酶活性的影響Table 4 Effects of water temperature and dietary protein level on intestinal amylase activity of juvenile Songpu mirror carp（Cyprinus specularis Songpu） U/g prot

表5 松浦鏡鯉幼魚腸道淀粉酶活性的雙因素方差分析Table 5 Two－way ANOVA of intestinal amylase activity of juvenile Songpu mirror carp（Cyprinus specularis Songpu）

2.3 水溫和飼料蛋白質(zhì)水平對松浦鏡鯉幼魚腸道脂肪酶活性的影響

水溫和飼料蛋白質(zhì)水平對松浦鏡鯉幼魚腸道脂肪酶活性的影響見表6。18、23和28℃下，飼料蛋白質(zhì)水平對前腸、中腸和后腸脂肪酶活性均無顯著影響（P＞0.05）。同一蛋白質(zhì)水平下，前腸、中腸和后腸脂肪酶活性隨水溫的升高而降低，即28℃時(shí)最低，而18℃最高。其中，除34.0%蛋白質(zhì)水平下23℃時(shí)后腸脂肪酶活性顯著低于18℃時(shí)（P＜0.05）外，各個(gè)蛋白質(zhì)水平下18和23℃前腸和后腸脂肪酶活性均差異不顯著（P＞0.05），并 均 顯 著 高 于 28 ℃ 時(shí) P＜0.05）；除30.0%和34.0%蛋白質(zhì)水平下23℃時(shí)中腸脂肪酶活性與18℃時(shí)無顯著差異（P＜0.05）外，其他蛋白質(zhì)水平下23和28℃時(shí)中腸脂肪酶活性均顯著低于18℃時(shí)（P＜0.05）。

由表7可知，水溫極顯著影響前腸、中腸和后腸脂肪酶活性（P＜0.01），但飼料蛋白質(zhì)水平以及水溫與飼料蛋白質(zhì)水平的交互作用對前腸、中腸和后腸脂肪酶活性均未產(chǎn)生顯著影響（P＞0.05）。

2.4 根據(jù)腸道蛋白酶活性確定不同水溫下松浦鏡鯉幼魚最佳蛋白質(zhì)需要量

由于各個(gè)水溫下，除前腸淀粉酶活性外，腸道其他部位淀粉酶和脂肪酶活性受飼料蛋白質(zhì)水平變化影響不顯著，即飼料蛋白質(zhì)水平主要影響腸道蛋白酶活性，因此根據(jù)腸道（前腸、中腸和后腸）蛋白酶活性確定松浦鏡鯉幼魚的最佳蛋白質(zhì)需要量。二階多項(xiàng)式擬合分析表明：根據(jù)前腸蛋白酶活性，18℃下最佳飼料蛋白質(zhì)水平為36.22%（Y＝－1 254.91＋94.716 15 X－1.307 64 X2，P＜0.05，R＝0.968 43）；23℃下最佳飼料蛋白質(zhì)水平為37.41%（Y＝－2 055.44＋137.311 7 X－1.838 53 X2，P＜0.05，R＝090 93）；28 ℃下最佳飼料蛋白質(zhì)水平為39.99%（Y＝－2 356.39＋147.060 7 X－1.838 53 X2，P ＜ 0.05，R ＝0.883 63）（圖1）。根據(jù)中腸蛋白酶活性，18℃下最佳飼料蛋白質(zhì)水平為35.83%（Y＝－11 101.592 7＋662.253 7 X－9.241 47 X2，P＜0.05，R＝0.834 07）；23℃下最佳飼料蛋白質(zhì)水平為37.40%（Y＝－5 367.95＋325.060 4 X－4.346 31 X2，P＜0.05，R＝0.898 58）；28℃下最佳飼料蛋白質(zhì)水平為36.79%（Y＝－8 889.54＋536.968 2 X －7.298 13 X2，P ＜0.05，R ＝0.975 65）（圖2）。根據(jù)后腸蛋白酶活性，18℃下最佳飼料蛋白質(zhì)水平為36.96%（Y＝－5 333.63＋311.795 X－4.217 9 X2，P＜0.05，R＝0.852 25）；23℃下最佳飼料蛋白質(zhì)水平為39.58%（Y＝－5 346.63＋302.390 3 X－3.820 1 X2，P＜0.05，R＝0.784 27）；28℃下最佳飼料蛋白質(zhì)水平為37.45% （Y ＝ －7 822.79＋456.382 6 X －6.093 78 X2，P＜0.05，R＝0.982 66）（圖3）。綜上，根據(jù)腸道蛋白酶活性，松浦鏡鯉幼魚最佳飼料蛋白質(zhì)水平水溫18℃下為35.83%～36.96%，23℃ 下 為 37.40% ～39.58%，28 ℃ 下 為36.79%～39.99%。

表6 水溫和飼料蛋白質(zhì)水平對松浦鏡鯉幼魚腸道脂肪酶活性的影響Table 6 Effects of water temperature and dietary protein level on intestinal lipase activity of juvenile Songpu mirror carp（Cyprinus specularis Songpu） U/g prot

表7 松浦鏡鯉幼魚腸道脂肪酶活性的雙因素方差分析Table 7 Two－way ANOVA of intestinal lipase activity of juvenile Songpu mirror carp（Cyprinus specularis Songpu）

3 討 論

國內(nèi)外有關(guān)魚類消化酶的研究報(bào)道很多，近些年來魚類飼料與消化酶之間的關(guān)系引起了魚類生物學(xué)家的注意，特別是飼料蛋白質(zhì)水平對消化酶的影響越來越受到關(guān)注。蛋白質(zhì)是配合飼料的最重要組成部分，飼料蛋白質(zhì)水平對魚類正常生長和繁殖具有至關(guān)重要的作用，適宜的飼料蛋白質(zhì)水平可促使魚類快速生長，同時(shí)飼料蛋白質(zhì)水平還會影響魚類消化酶的活性。已有研究表明，飼料蛋白質(zhì)水平對魚類蛋白酶活性有一定的影響，在一定飼料蛋白質(zhì)水平范圍內(nèi)，蛋白酶活性隨飼料蛋白質(zhì)水平的升高而升高［10，13］。本研究得到相同的結(jié)果，即在一定飼料蛋白質(zhì)水平范圍內(nèi)腸道蛋白酶活性隨飼料蛋白質(zhì)水平的升高而升高，但當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)水平達(dá)到一定程度后蛋白酶活性變化不顯著，說明飼料中的蛋白質(zhì)可以誘導(dǎo)魚體內(nèi)腸道蛋白酶的分泌，但魚類對飼料中蛋白質(zhì)的消化吸收是有限度的，且有一個(gè)最適值，超過最適值后蛋白酶的活性不再發(fā)生顯著變化。Debnath等［14］研究發(fā)現(xiàn)，飼料蛋白質(zhì)水平超過25%時(shí)能促進(jìn)南亞野鯪（Labeo rohita）腸道蛋白酶的分泌。Le Moullac等［15］研究發(fā)現(xiàn)，隨飼料蛋白質(zhì)水平的升高，凡納濱對蝦（Penaeus vannamei）腸道蛋白酶活性升高。隨著飼料蛋白質(zhì)水平在適當(dāng)范圍內(nèi)的增加，魚體腸道蛋白酶的活性增加，提高了對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，從而改善生長性能；而過高的飼料蛋白質(zhì)水平增加了腸道的消化負(fù)擔(dān)，并且體內(nèi)代謝產(chǎn)生較多的有毒的含氮物質(zhì)，可能會對消化酶的分泌產(chǎn)生負(fù)反饋調(diào)節(jié)［16］。飼料蛋白質(zhì)水平的變化不僅對腸道蛋白酶活性產(chǎn)生影響，還可能改變腸道淀粉酶和脂肪酶的活性。淀粉酶主要是由散布于肝臟內(nèi)的胰組織產(chǎn)生的，并且在腸道中被進(jìn)一步激活，但不同魚類淀粉酶的分泌器官存在差異。本試驗(yàn)中，隨飼料蛋白質(zhì)水平的升高，腸道淀粉酶活性有所升高，但是差異不顯著，這與Debnath等［14］和 Lopez－Lopez等［17］的研究結(jié)果一致。這可能是因?yàn)轸~類腸道淀粉酶活性的變化主要是由食物淀粉含量引起的，在淀粉含量相同情況下，不同飼料蛋白質(zhì)水平的變化未能引起腸道淀粉酶活性呈現(xiàn)規(guī)律性變化［18］。腸道是消化、吸收蛋白質(zhì)和脂肪的主要器官［19］。本試驗(yàn)中，隨飼料蛋白質(zhì)水平的升高，腸道脂肪酶活性有所升高，但是差異不顯著，這與 Debnath等［14］和 Lundstedt等［20］的研究結(jié)果一致。這可能是因?yàn)轸~類腸道脂肪酶活性與其所攝食的飼料種類有關(guān)，特別是與飼料中脂肪含量有關(guān)，而本試驗(yàn)不同蛋白質(zhì)水平飼料中脂肪含量是相同的。

水溫對于魚類生理活動的影響是復(fù)雜的。水溫能直接影響魚類消化酶活性和攝食量，從而影響營養(yǎng)物質(zhì)的消化利用［21－22］。在一定溫度范圍內(nèi)，隨水溫升高，魚體內(nèi)各細(xì)胞中酶活性隨之增強(qiáng)，各種生理、生化反應(yīng)加快，新陳代謝作用增強(qiáng)［23］。Hardewig等［24］研究發(fā)現(xiàn)，隨水溫升高，斜齒鳊（Rutilus rutilus）消化酶活性升高且攝食量增大。Couto等［25］研究發(fā)現(xiàn)，飼養(yǎng)水溫對酸性蛋白酶和堿性蛋白酶活性均具有顯著的影響，但對總蛋白酶活性沒有顯著影響，說明蛋白酶活性的差異是魚適應(yīng)不同飼養(yǎng)水溫的一種生理適應(yīng)現(xiàn)象。本研究表明，松浦鏡鯉幼魚消化酶的活性與環(huán)境溫度關(guān)系密切，隨水溫的升高，腸道蛋白酶和淀粉酶活性顯著升高，與Kuzmina等［26］研究結(jié)果相似。這可能是因?yàn)殡S水溫升高魚體生理代謝強(qiáng)度增強(qiáng)，消化系統(tǒng)的代謝強(qiáng)度也增強(qiáng)［23］，進(jìn)而增加消化酶的分泌，并且水溫升高會增加魚的攝食量，而攝食量變化與魚類消化酶的分泌活性有關(guān)［27］。本研究發(fā)現(xiàn)，脂肪酶活性隨水溫的升高而下降，與Gao等［28］的研究結(jié)果一致，Kofuji等［22］研究結(jié)果也表明在低水溫條件下腸道脂肪酶活性更高，這可能是因?yàn)榈退疁貤l件下腸道營養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)速度變慢。

圖1 不同水溫下前腸蛋白酶活性與飼料蛋白質(zhì)水平的二階多項(xiàng)式擬合Fig.1 Second－order polynomial fitting between foregut protease activity and dietary protein level at different water temperatures

圖2 不同水溫下中腸蛋白酶活性與飼料蛋白質(zhì)水平的二階多項(xiàng)式擬合Fig.2 Second－order polynomial fitting between midgut protease activity and dietary protein level at different water temperatures

圖3 不同水溫下后腸蛋白酶活性與飼料蛋白質(zhì)水平的二階多項(xiàng)式擬合Fig.3 Second－order polynomial fitting between hindgut protease activity and dietary protein concentration at different water temperatures

魚類的消化機(jī)能是與其結(jié)構(gòu)相適應(yīng)的，并且直接影響消化酶活性。腸道在營養(yǎng)物質(zhì)消化中起著重要的作用，是主要的消化器官。腸致活酶由腸道分泌，它能激活蛋白酶原，共同促進(jìn)腸道對飼料蛋白質(zhì)的消化吸收。魚類腸道不同部位蛋白酶活性的變化因魚而異，與魚類的食性及消化酶的分泌有密切的關(guān)系。草魚和鯽魚的前腸、后腸之間蛋白酶活性差異不顯著［29］，這與本研究對松浦鏡鯉幼魚腸道不同部位蛋白酶活性研究結(jié)果一致，并且低溫條件下后腸蛋白酶活性顯著高于高溫條件下。倪壽文等［30］研究發(fā)現(xiàn)，鰱、鳙、鯽淀粉酶活性以中腸較高，與本研究結(jié)果一致。脂肪酶在魚的消化生理中占有重要地位。吳婷婷等［29］研究發(fā)現(xiàn)，無胃魚類的腸道各部位脂肪酶和淀粉酶活性變化有互補(bǔ)現(xiàn)象，即淀粉酶活性高的部位脂肪酶活性低；相反，脂肪酶活性高的部位淀粉酶活性低，這與本研究結(jié)果一致。此外，吳婷婷等［29］研究結(jié)果還表明，鱖魚、青魚后腸的脂肪酶活性顯著高于前腸和中腸，與本研究結(jié)果相似。而黎軍勝等［31］研究發(fā)現(xiàn)，奧尼羅非魚腸道脂肪酶活性從大到小依次為前腸、中腸、后腸，表明魚類消化酶的分布存在差異。綜上，腸道不同部位消化酶活性對水溫和飼料蛋白質(zhì)水平的變化反應(yīng)不一致，表明不同器官的消化酶活性對水溫和飼料蛋白質(zhì)水平的適應(yīng)性變化并不同步，進(jìn)一步說明消化酶產(chǎn)生的控制機(jī)制比較復(fù)雜，腸道不同部位消化酶活性受水溫和飼料蛋白質(zhì)水平的變化作用的反饋影響機(jī)理可能存在差異。

4 結(jié) 論

水溫和飼料蛋白質(zhì)水平與松浦鏡鯉幼魚腸道消化酶活性關(guān)系密切，根據(jù)腸道蛋白酶活性，松浦鏡鯉幼魚最佳飼料蛋白質(zhì)水平在水溫18℃下為35.83%～36.96%，23 ℃ 下 為 37.40% ～39.58%，28℃下為36.79%～39.99%。

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