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      食用菌菌種貯藏技術(shù)

      2013-04-29 08:46:53
      吉林農(nóng)業(yè) 2013年7期
      關(guān)鍵詞:沙土麥粒濾紙

      1.低溫定期移植貯藏法

      將需要貯藏的菌種接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上,適溫培養(yǎng),當菌絲健壯地長滿斜面時取出,放在3℃~5℃低溫干燥處或4℃冰箱、冰柜中貯藏,每隔4~6個月時間移植轉(zhuǎn)管一次,具體應(yīng)根據(jù)菌種特性決定。貯藏時要注意環(huán)境溫度不能太高,以防霉菌通過棉塞進入管內(nèi)。因此,若用棉塞,可用干凈的硫酸紙或牛皮紙包扎棉塞,既可減少污染的機會,也可防止培養(yǎng)基干燥。除草菇菌種外,其他食用菌菌種都能采用此法貯藏。

      2.液體石蠟貯藏法

      取化學(xué)純液體石蠟(要求不含水分、不霉變)裝于三角瓶中加棉塞并包紙,在1kg/cm2壓力下高溫滅菌1小時,再放入40℃恒溫箱中數(shù)天,以蒸發(fā)其中水分,至石蠟油完全透明為止。將處理好的石蠟油移接在空白斜面上,在28℃~30℃溫度下培養(yǎng)2~3天,確定無雜菌生長方可使用。然后用無菌操作的方法把液體石蠟注入待貯藏的斜面試管中。注入量以高出培養(yǎng)基斜面1~1.5cm為宜,塞上橡皮塞,用固體石蠟封口,直立于低溫干燥處貯藏。貯藏時間在1年以上,在低溫下,保藏時間還可延長。

      3.沙土管貯藏法

      取河沙用水浸泡洗滌數(shù)次,過60目篩除去粗粒,再用10%鹽酸浸泡2~4小時,除去其中有機物質(zhì),再用水沖洗至pH值達到中性,烘干備用。同時取貧脊土或菜園土用水浸泡,使其呈中性,沉淀后除去上清液,烘干碾細,用100目篩子過篩,將處理好的沙與土以(2~4):1比例混勻,用磁鐵吸出其中的鐵質(zhì),然后分裝小試管或安瓿瓶內(nèi),每管裝0.5~2g,塞棉塞,用紙包扎滅菌(1.5kg/cm2,1小時),再干熱滅菌(160℃,2~3小時)1~2次,進行無菌檢驗,合格后使用。將已形成孢子的斜面菌種,在無菌條件下注入無菌水3~5mL,刮菌薹,制成菌懸液,再用無菌吸管吸取菌液滴入沙土管中,以浸透沙土為止。將接種后的沙土管放入盛有干燥劑的真空干燥器內(nèi),接上真空泵抽氣數(shù)小時,至沙土干燥為止。真空干燥操作需在孢子接入后48小時內(nèi)完成,以免孢子發(fā)芽。制備好的沙土管用石蠟封口,在低溫下可保藏2~10年。

      4.濾紙片貯藏法

      取白色(收集深色孢子)或黑色(收集白色孢子)濾紙,剪成4×0.8cm的小紙條,平鋪在培養(yǎng)皿中用紙包裹進行滅菌(1kg/cm2,30分鐘)。采用鉤懸法收集孢子,讓孢子落在濾紙條上。將載有孢子的濾紙條放入貯藏試管中,再將貯藏試管放入干燥器中1~2天,除去濾紙水分,使濾紙水分含量達2%左右,然后低溫貯藏。

      5.自然基質(zhì)貯藏法

      麥粒貯藏法。取無癟粒、無雜質(zhì)的小麥淘洗干凈,浸泡12~15小時,加水煮沸15分鐘,繼續(xù)熱浸15分鐘,使麥粒脹而不破,瀝干水分攤開晾曬,使麥粒的含水量在25%左右。將碳酸鈣、石膏拌入熟麥粒中(麥粒、碳酸鈣、石膏重量為10kg、133g、33g),拌和均勻后裝入試管中,每管2~3g,然后清洗試管,塞棉塞,滅菌(1.5kg/cm2,2小時),經(jīng)無菌檢查合格后備用,試管基質(zhì)冷卻后接種,適溫培養(yǎng),待菌絲長滿基質(zhì)后用石蠟涂封棉塞,放低溫貯藏、2年左右轉(zhuǎn)接一次。麩曲保藏法。取新鮮麩皮,過60目篩除去粗粒。將麩皮和自來水按1∶1拌勻,裝入小試管,每管約裝1/3高度,加棉塞用紙包扎,高壓滅菌(1.5kg/cm2,30分鐘),經(jīng)無菌檢查合格后備用,將生長在斜面培養(yǎng)基上的健壯菌種,移種至無菌麩曲管中,移種時注意盡量搗勻小試管中的麩皮,使其呈疏松狀態(tài),在適溫下培養(yǎng)至菌絲長滿麩皮為止,將麩曲小管置干燥器中,在低溫或適溫下貯藏。

      6.生理鹽水貯藏法

      取純氯化鈉0.7~0.9g,放入100%mL蒸餾水中,攪拌均勻分裝試管,每管5~10mL,進行滅菌(1kg/cm2,30分鐘),經(jīng)無菌檢查合格后備用,將待保藏的菌種接入馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基中,適溫振蕩培養(yǎng)5~7天。無菌操作吸取少許培養(yǎng)菌種,注入經(jīng)檢驗合格的生理鹽水試管中,塞上無菌橡皮塞,用石蠟涂封,在室溫或低溫貯藏。

      7.冷凍真空干燥法

      將已培養(yǎng)、生長豐富的菌體或孢子懸浮于滅菌的血清、卵白、脫脂奶制成的菌懸液上,將懸液以無菌操作分裝于滅菌的玻璃安瓿中,每管0.3~0.5mL,然后用耐壓橡皮管與冷凍干燥裝置連接,安瓿瓶放在冷凍槽中于-30℃~-40℃迅速冷凍,然后在冷凍狀態(tài)下抽空干燥,并在真空狀態(tài)下熔封安瓿瓶,在-20℃低溫下保存,一般可保存10年以上,但成本較高。

      8.液氮超低溫保藏法

      首先將要保藏的菌種制成菌懸液備用。其次準備安瓿瓶,每瓶加入0.8mL冷凍保護劑10%(體積比)甘油蒸餾水溶液,塞棉塞滅菌(1kg/cm2,5分鐘)。無菌檢查后,接入要貯藏的菌種,火焰熔封瓶口,檢查是否漏氣,將封好口的安瓿瓶放在凍結(jié)器內(nèi),以每分鐘下降1℃的速度緩慢降溫,使保藏品逐步均勻地凍結(jié),直至-35℃,以后凍結(jié)速度就不需控制,安瓿瓶凍結(jié)后立即放入液氮罐內(nèi),在-150℃~-196℃低溫下保藏,該法只有少數(shù)科研單位使用。摘自《當代蔬菜》

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