孫爽
【摘 要】文章分析了北豆根總堿(TAMD)軟膠囊的生產(chǎn)工藝和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
【關(guān)鍵詞】北豆根總堿;生產(chǎn)工藝
北豆根總堿軟膠囊的內(nèi)容物為黃色膏狀物,由北豆根總堿與基質(zhì)、潤濕劑和助懸劑組成。目前國內(nèi)尚無該產(chǎn)品,測定軟膠囊內(nèi)容物中總堿和主要單體蝙蝠葛堿的含量并在此基礎(chǔ)上制訂軟膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),是保證產(chǎn)品質(zhì)量的基礎(chǔ)。
1.儀器與試劑
(1)儀器JASCO高效液相色譜儀:RU1580泵,UV-15紫外-可見檢測器(日本);HP-8453紫外-可見分光光度計(惠普公司);AG-254型電子分析天平(瑞士梅特勒);ZFQ85-A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海醫(yī)械專機(jī)廠);JMS-80膠體磨(廊坊通用機(jī)械廠);RJNJ-1型壓丸機(jī)(上海延安制藥廠制藥機(jī)械分廠)。
(2)試劑。北豆根總堿軟膠囊(自制,規(guī)格60mg);蝙蝠葛堿(對照品,自制,含量99.0%);無水甲醇、磷酸、酚酞(分析純);甲醇、乙腈(色譜純);注射用大豆油(廣東環(huán)葉制藥有限公司);蜂蠟(廣東威而特精臘開發(fā)有限公司);聚甘油酯(池田物產(chǎn)公司);明膠(青海明膠股份有限公司);甘油(廣州啟得利化工商貿(mào)有限公司);二氧化鈦(美國WC&D;公司);丁烯二酸(太原市僑友化工有限公司);食用檸檬黃(上?;瘜W(xué)染料二廠)。
2.處方與制備
(1)內(nèi)容物處方。中藥軟膠囊內(nèi)容物一般由主藥和稀釋劑、潤濕劑、助懸劑組成。通過文獻(xiàn)檢索,兼顧成本,將稀釋劑定為大豆油,助懸劑定為蜂蠟。潤濕劑常用吐溫類,但吐溫類可致紅細(xì)胞膜破裂而溶血,故選用聚甘油酯這一新型表面活性劑,具備良好的乳化性能[1]。選用正交實驗法確定各組分用量,取處方量的大豆油,水浴加熱,依處方加入蜂蠟、聚甘油酯,酯化后充分?jǐn)嚢?,加入處方量的主藥,用膠體磨研磨后超聲除去氣泡。內(nèi)容物的質(zhì)量以沉降系數(shù)作為考察指標(biāo),將內(nèi)容物置于10ml刻度試管中,測定內(nèi)容物原始高度H0,以500r·min-1的速度離心4h,測定沉降后的高度H,計算沉降比F=H/H0,F(xiàn)值越大,內(nèi)容物越穩(wěn)定。
(2)囊殼的制備。北豆根總堿在光照情況下易分解,故在囊殼中加入二氧化鈦做遮光劑,加入檸檬黃改變外觀色澤。此外,北豆根總堿為堿性,可加速囊殼的老化,所以在囊殼中加入1%的丁烯二酸來改變囊殼的溶解性。稱取明膠1.0kg置化膠罐中備用,另外稱取食用檸檬黃0.4g溶于1500ml水中,將明膠浸泡36h,使明膠充分吸水膨脹。40℃水浴加熱使明膠溶解,加入甘油750g,阿拉伯膠漿250g,二氧化鈦8g,丁烯二酸20g,攪拌均勻。60℃蒸發(fā)水分至處方量,超聲波排除氣泡后涂于不銹鋼板,厚度1mm,90℃干燥既可。
(3)軟膠囊的制備。稱取大豆油1266g,水浴加熱,加入蜂蠟80g,聚甘油酯6g,熔化后攪拌均勻,加入北豆根提取物648g(含北豆根總堿600g),用膠體磨研磨后壓制軟膠囊。每粒軟膠囊內(nèi)容物重0.20g。
(4)整丸與干燥將軟膠囊在室溫(20~30℃)冷風(fēng)干燥后置95%乙醇中,洗去油污后取出,于50℃干燥24h。將干燥后的軟膠囊置包衣鍋內(nèi),加入適量液體石蠟使均勻涂布。鋁塑泡罩包裝。批號分別為20051006,20051011,20051016。
3.質(zhì)量控制
(1)形狀本品為黃色膏狀物,味苦。
(2)鑒別取本品4粒,刮取內(nèi)容物,加稀鹽酸10ml,振搖提取30min,濾過。取濾液2ml,加碘化鉀碘試液2滴,即生成紅棕色沉淀;另取濾液2ml,加三硝基苯酚試液2滴,即生成黃色沉淀。
(3)檢查符合《中國藥典》2005版膠囊劑項下的各項規(guī)定。
(4)北豆根總堿含量測定。
比色原理溴甲酚綠為一酸性染料,它的顯色與pH值有關(guān),溴甲酚綠在無水甲醇(pH=6)的條件下,可與北豆根總堿直接絡(luò)合成綠色化合物,用于比色測定。
檢測波長的選擇分別稱取一定量的北豆根總堿軟膠囊內(nèi)容物(約相當(dāng)于總堿15mg)和空白制劑的內(nèi)容物置10ml容量瓶中,加入無水甲醇至刻度,超聲提取30min,補足失去的甲醇量,過濾。取續(xù)濾液0.2ml置10ml容量瓶中,加入0.1%溴甲酚綠溶液0.2ml,用無水甲醇定容,在200~700nm進(jìn)行掃描。軟膠囊內(nèi)容物的甲醇提取液在620nm處有最大吸收,而空白制劑沒有吸收。說明輔料對測定無影響。
線性關(guān)系考察精密稱取蝙蝠葛堿對照品2.0mg,置10ml容量瓶中,加無水甲醇溶解并定容作為對照品溶液。分別精密稱取對照品溶液0.3,0.5,0.8,1.0,1.2,1.5,2.0ml,置10ml容量瓶中,加入0.1%溴甲酚綠溶液0.2ml,于620nm處測定吸收度,隨行試劑空白。以蝙蝠葛堿濃度C對吸收度A進(jìn)行線性回歸,得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程:C=49.82A-0.84,r=0.9998(n=7),線性范圍為6~40μg·ml-1。
回收率實驗取經(jīng)過含量測定的北豆根總堿(含量92.71%)約15mg,分別精密稱定5份置10ml容量瓶中,按處方比例加入輔料,用自動渦流混合器混勻。加入無水甲醇10ml,超聲提取30min,補足失去的甲醇量,過濾。取續(xù)濾液0.2ml置10ml容量瓶中,加入0.1%溴甲酚綠溶液0.2ml ,用無水甲醇定容。在620nm處測定吸收度。隨行試劑空白。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計算北豆根總堿的量和回收率。
樣品含量測定 按北豆根總堿軟膠囊的最佳處方,制備3批樣品,取3種批號樣品各40mg (約含總堿10mg),置50ml容量瓶中,用無水甲醇定容,超聲提取30min,補足失去的甲醇量,過濾。精密吸取續(xù)濾液1.0ml置10ml容量瓶中(濃度為2%),加入0.1%溴甲酚綠溶液0.2ml,用無水甲醇定容。在620nm處測定吸收度,隨行試劑空白。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計算北豆根總堿的量。結(jié)果3批樣品的標(biāo)示量分別為98.2%,99.6%,100.3%,符合方法學(xué)要求。
(5)蝙蝠葛堿含量測定。
色譜條件色譜柱為Discovery-C18(5μm,4.6mm×250mm);流動相為乙腈∶水∶磷酸=16∶84∶0.15(V∶V∶V);流速0.5ml·min-1;波長208nm;柱溫為室溫;進(jìn)樣量20μl;理論塔板數(shù):2300。
干擾實驗分別稱取一定量的北豆根總堿軟膠囊內(nèi)容物(約相當(dāng)于總堿15mg)和空白制劑的內(nèi)容物置25ml容量瓶中,加入無水甲醇至刻度,超聲提取30min,補足失去的甲醇量,過濾。取續(xù)濾液1.0ml,置10ml容量瓶中,揮干甲醇,用流動相溶解并定容。按色譜條件檢測。空白制劑在25min時無吸收峰,說明輔料對測定沒有影響。
樣品含量測定 取3種批號樣品40mg (約含蝙蝠葛堿5mg),置25ml容量瓶中,用無水甲醇定容,超聲提取30min,補足失去的甲醇量,過濾。精密吸取續(xù)濾液2.0ml置10ml容量瓶中,(濃度為4%),揮干甲醇,用流動相溶解并定容。按上述色譜條件測定。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計算蝙蝠葛堿的量。取3種批號樣品40mg (約含總堿10mg),結(jié)果3批樣品的標(biāo)示量分別為99.1%,100.5%,99.6%,符合方法學(xué)要求,其中蝙蝠葛堿含量不低于北豆根總堿的45.0%。
4.討論
北豆根提取物味苦、疏水性強、對光熱不穩(wěn)定,適宜制成軟膠囊。建立北豆根總堿軟膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),需要解決兩個問題:一是能否完全地把北豆根總堿從內(nèi)容物中提取出來;二是輔料是否對測定造成影響。本實驗在參考北豆根提取物含量測定方法的基礎(chǔ)上,很好地解決了上述兩個問題,完成了北豆根總堿軟膠囊的含量測定。
【參考文獻(xiàn)】
[1]朱孝芹,韓鐵剛,劉翠哲.北豆根總堿軟膠囊的制備及質(zhì)量控制.論文網(wǎng),2011,03.
[2]時軍,程怡.輔料在軟膠囊劑型中的應(yīng)用[J].中醫(yī)藥學(xué)刊,2003,21(9)∶1429.