楊 鈞 朱愛(ài)華 張藝芳 周新民 秦永剛 陜西中藥研究所（咸陽(yáng)712000）

倒卵葉五加具有扶正固本、益智安神、補(bǔ)腎健脾等功效。臨床上主要用于脾腎陽(yáng)虛所致的腰膝酸軟，體虛乏力，食欲不振及神經(jīng)衰弱患者。近幾年在臨床用藥過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)該藥對(duì)消化性潰瘍和胃炎患者有很好的治療效果。為闡明臨床作用機(jī)理，我們進(jìn)行了以下試驗(yàn)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)藥物 倒卵葉五加粉（暗褐紅色粉末）由陜西利威爾制藥有限公司提供，三九胃泰，三九醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字Z44020705。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 動(dòng)物：KM 小鼠體重18～22g，雌雄兼用，SD 大鼠體重180～220g雌雄兼用，均由第四軍醫(yī)大學(xué)動(dòng)物中心提供，小鼠合格證號(hào)（醫(yī)動(dòng)證08～013號(hào)），大鼠合格證號(hào)（醫(yī)動(dòng)證08～014號(hào)）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 倒卵葉五加健脾益氣作用的研究 2.1.1 對(duì)利血平小鼠脾虛模型的影響［1，2］：KM 小鼠60只，體重18～22g，按體重隨機(jī)分成六組，分別為正常對(duì)照組，利血平模型組，倒卵葉五加小、中、大劑量組、三九胃泰組，每組10只。各組小鼠均灌胃給予各自相應(yīng)藥物4d后稱(chēng)重，除正常對(duì)照組外其余各組均每日皮下注射利血平0.15mg／kg，同時(shí)灌服藥物，連續(xù)14d。末次給藥結(jié)束后各組小鼠稱(chēng)重并進(jìn)行游泳實(shí)驗(yàn)。

2.1.2 對(duì)胃蛋白酶活性的影響：大鼠50 只，體重180～220g，按體重隨機(jī)分五組，每組10只。分別為正常對(duì)照組，倒卵葉五加小、中、大（0.75、1.5、3.0g／kg）劑量組，三九胃泰（3.0g／kg）組。適應(yīng)性飼養(yǎng)3d后各組連續(xù)給藥各自相應(yīng)藥物5d，末次給藥前禁食24h。乙醚麻醉，沿大鼠腹正中線剪開(kāi)小口，輕輕找出胃，結(jié)扎幽門(mén)，十二指腸給藥一次，縫合腹壁切口，5h后拆線打開(kāi)腹腔結(jié)扎賁門(mén)，摘取全胃，用濾紙擦凈血跡，沿大彎側(cè)剪開(kāi)胃腔，傾出胃內(nèi)容物，收集于刻度離心管中，記錄胃液量。3000r／min離心15min，取上清胃液1mL，加入酚酞1 滴，以0.02mol／L氫氧化鈉滴定至呈微紅色不褪，計(jì)算總酸度。胃蛋白酶活性按照mett 氏法進(jìn)行，按公式計(jì)算胃蛋白酶活性［1，3］。

總酸度＝滴定消耗的氫氧化鈉總毫升數(shù)×10；總酸排出量μEq／h＝總酸度×每小時(shí)的胃液量；胃蛋白酶活性單位＝長(zhǎng)度平均值2×16

2.2 倒卵葉五加對(duì)水谷運(yùn)化的影響 2.2.1 對(duì)葡萄糖吸收的影響［4］：昆明小鼠60只，18～22g，按體重分五組，每組12只。分別為對(duì)照組，倒卵葉五加小、中、大（1.5g／kg，3.0g／kg，6.0g／kg）劑量組，三九胃泰（6.0g／kg）組。每日灌胃給藥1次，連續(xù)7d，禁食過(guò)夜，第8d小鼠在烏拉坦（2g／kg）麻醉下，分離幽門(mén)下2cm 處開(kāi)始約6～8cm 的一段小腸，兩端以絲線結(jié)扎，結(jié)扎小腸中注入10%葡萄糖0.3mL，復(fù)位創(chuàng)口，縫合腹壁。30min后處死小鼠，取出結(jié)扎的腸段，以蒸餾水9mL 沖洗。沖洗液以3000r／min離10min，取上清液測(cè)定葡萄糖糖含量。將標(biāo)準(zhǔn)管糖含量減去腸中的糖含量為小腸吸收的葡萄糖，計(jì)算吸收的百分率。

2.2.2 對(duì)小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)的影響［1，2］：健康昆明種小鼠18～22g，72只，雌雄各半。按體重性別隨機(jī)分成六組，每組12只。分別為對(duì)照組，倒卵葉五加1.5g／kg，3.0g／kg，6.0g／kg三個(gè)劑量組，三九胃泰6.0g／kg，硫酸阿托品5mL／kg組。除硫酸阿托品組皮下注射給藥外，其余各組均灌胃給藥。皮下注射后20min，灌胃給藥后60min，每只小鼠灌服0.2mL 市售墨汁，20min脫頸椎處死小鼠。解剖腹腔，將胃至回盲部的腸全部取出，輕鋪于玻璃板上，測(cè)量自幽門(mén)至回盲部距離為小腸全長(zhǎng)，自幽門(mén)至墨汁推進(jìn)前沿距離為小腸推進(jìn)距離。計(jì)算墨汁推進(jìn)百分率。

墨汁推進(jìn)百分率（%）＝墨汁在腸內(nèi)推動(dòng)距離／小腸總長(zhǎng)度×100%。

2.2.3 對(duì)胃排空運(yùn)動(dòng)的影響［1，4］：昆明小鼠18～22g，共60只，雌雄各半。分組及給藥劑量同小鼠腸推進(jìn)。每日灌胃給藥1次，連續(xù)5d。末次給藥后1h，將已經(jīng)禁食18h的小鼠灌服5%阿拉伯膠0.8g。灌胃后20min，準(zhǔn)時(shí)處死小鼠，解剖取出胃連同內(nèi)容物稱(chēng)重，然后沿胃大彎將胃剪開(kāi)，沖洗內(nèi)容物，濾紙吸干水分稱(chēng)胃凈重，二者差值為胃潴留值，用0.8g減潴留值為胃排空量。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 對(duì)利血平小鼠脾虛模型的影響結(jié)果 給藥過(guò)程中利血平模型組小鼠皮毛枯槁、安靜少動(dòng)、肛門(mén)潮濕，排稀便，隨后出現(xiàn)便秘情況，肛門(mén)處有糞便成團(tuán)，體重顯著減輕。倒卵葉五加各組及三九胃泰組小鼠與利血平模型組小鼠比較，其行為活潑好動(dòng)，體格健壯，體重明顯增加。同時(shí)游泳實(shí)驗(yàn)證明，與利血平模型組比較均能顯著延長(zhǎng)游泳抗疲勞時(shí)間。

表1 倒卵葉五加對(duì)利血平脾虛小鼠模型的影響（±s）

表1 倒卵葉五加對(duì)利血平脾虛小鼠模型的影響（±s）

注：組間進(jìn)行t檢驗(yàn)，與模型對(duì)照組比較△P＜0.05，▲P＜0.01

分 組劑量g／kg n造模前體重（g）造模前后體重差值（g）游泳疲勞時(shí)間（min）正常對(duì)照組0.15 10 25.70±1.51＋6.35±3.13▲12.21±4.88▲利血平模型組mg／kg 10 25.75±1.63－6.23±1.21 6.56±5.62倒卵葉五加小1.5 10 25.65±1.32－5.43±1.61 10.96±6.01倒卵葉五加中3.0 10 25.70±1.61－3.11±2.95▲16.12±2.38▲倒卵葉五加大6.0 10 25.80±1.61－2.25±2.66▲16.35±4.87▲三九胃泰6.0 10 25.80±1.75－1.75±1.04▲14.24±1.23▲

3.2 對(duì)胃蛋酶活性的影響結(jié)果 倒卵葉五加可顯著減少胃液分泌量和總酸排出量，顯著升高胃蛋白酶活性。

表2 倒卵葉五加對(duì)大鼠胃液、胃蛋白酶活性、總酸排出量的影響（±s）

表2 倒卵葉五加對(duì)大鼠胃液、胃蛋白酶活性、總酸排出量的影響（±s）

注：組間進(jìn)行t檢驗(yàn)，與對(duì)照組比較，△P＜0.05，▲P＜0.01

分 組劑量（g／kg）n胃液量（mL）胃蛋白酶活性活性單位／mL總酸排出量μEg／h對(duì)照組／10 7.21±0.79 38.21±15.66 89.28±16.47倒卵葉五加小0.75 10 5.88±1.10 117.79±22.13△79.58±15.11倒卵葉五加中1.5 10 4.59±1.42△172.15±24.56▲45.09±14.37△倒卵葉五加大3.0 10 2.21±0.61▲141.54±17.86▲33.87±10.11▲三九胃泰3.0 10 3.66±1.21△189.37±21.08▲42.85±9.57△

3.3 對(duì)葡萄糖吸收的影響結(jié)果 結(jié)果倒卵葉五加三個(gè)劑量對(duì)小腸葡萄糖吸收及吸收百分率未見(jiàn)明顯影響。三九胃泰則顯著提高葡萄糖的吸收率P＜0.05。

表3 倒卵葉五加對(duì)小鼠小腸葡萄糖吸收的影響（±s）

表3 倒卵葉五加對(duì)小鼠小腸葡萄糖吸收的影響（±s）

注：組間進(jìn)行t檢驗(yàn)，與對(duì)照組比較，△P＜0.05，▲P＜0.01

分 組n劑量g／kg葡萄糖吸收（mmol／L）吸收率%對(duì)照組12／17.03±4.19 70.96±17.44倒卵葉五加小12 1.5 16.30±3.39 63.89±23.27倒卵葉五加中12 3.0 17.84±4.66 74.32±19.42倒卵葉五加大12 6.0 18.75±3.98 78.14±16.58三九胃泰12 6.0 19.83±2.55 86.24±10.64△

3.4 對(duì)小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)的影響結(jié)果 結(jié)果倒卵葉五加6.0g／kg組可極顯著提高小鼠小腸的推進(jìn)運(yùn)動(dòng)（P＜0.01），硫酸阿托品則顯著抑制小腸運(yùn)動(dòng)，顯著降低推進(jìn)距離及推進(jìn)百分率（P＜0.01）。

表4 倒卵葉五加對(duì)小鼠腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)的影響（（±s）

表4 倒卵葉五加對(duì)小鼠腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)的影響（（±s）

注：組間進(jìn)行t檢驗(yàn)，與對(duì)照組比較，△P＜0.05，▲P＜0.01

分 組n劑量（g／kg）小腸全長(zhǎng)（cm）墨汁推進(jìn)距離（cm）推進(jìn)百分率（%）對(duì)照組12／59.12±4.26 33.21±7.48 58.06±12.47倒卵葉五加小12 1.5 61.20±3.27 41.04±6.27 67.45±12.21倒卵葉五加中12 3.0 57.50±5.54 37.46±8.93 64.77±12.37倒卵葉五加大12 6.0 57.04±5.03 46.37±7.82▲83.31±14.14▲三九胃泰12 6.0 60.45±1.85 39.12±4.63 64.76±8.12硫酸阿托品12 0.005 59.20±2.94 25.05±5.27▲42.23±8.17▲

3.5 對(duì)胃排空運(yùn)動(dòng)的影響結(jié)果 倒卵葉五加1.5g／kg可顯著提高胃排空量（P＜0.05），三九胃泰及其余二個(gè)劑量的倒卵葉五加對(duì)小鼠胃排空量未見(jiàn)明顯影響。

表5 倒卵葉五加對(duì)小鼠胃排空的影響（±s）

表5 倒卵葉五加對(duì)小鼠胃排空的影響（±s）

注：組間進(jìn)行t檢驗(yàn)，與對(duì)照組比較，△P＜0.05，▲P＜0.01

分 組n劑量（g／kg）胃排空量（g）與對(duì)照組比增減（%）對(duì)照組12／0.48±0.15／倒卵葉五加小 12 1.5 0.60±0.12△＋25.00倒卵葉五加中 12 3.0 0.55±0.17＋14.58倒卵葉五加大 12 6.0 0.39±0.19－18.75三九胃泰12 6.0 0.36±0.14－25.00

4 討 論

引起消化性潰瘍及胃炎的主要原因，多為胃酸分泌過(guò)多或者胃排空延緩。通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)研究，我們發(fā)現(xiàn)倒卵葉五加能夠使利血平引起的脾虛模型小鼠體重增加，體質(zhì)增強(qiáng)，同時(shí)抑制胃酸分泌、增強(qiáng)胃蛋白酶活力，消化能力增加，胃排空能力有一定程度的提高。估計(jì)倒卵葉五加在抑制胃酸分泌的同時(shí)，能夠健脾益氣、促進(jìn)五谷運(yùn)化是臨床將其用于消化性潰瘍及胃炎患者的主要原因之一。其作用機(jī)制，需要進(jìn)一步的研究探討。

［1］ 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥政管理局編制.中藥新藥研究指南（藥學(xué)、藥理學(xué)、毒理學(xué)）［M］.北京：中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥政管理局，1994：74－77，142－145.

［2］ 李儀奎，金若敏，王欽茂，等.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)［M］.第2版.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2006：162，467.

［3］ 徐淑云，卞如濂，陳 修，等.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，1982：865－867.

［4］ 陳 奇，孫建寧，林志彬，等.中藥藥理研究方法學(xué)［M］.第2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：864，437.