武 哲， 孫 蕾， 劉彥彥， 張 俊，2， 張克誠＊

（1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所，農(nóng)業(yè)部作物有害生物綜合治理重點實驗室，北京 100193；2.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護學(xué)院，鄭州 450002）

草莓白粉病是由子囊菌亞門專性寄生真菌羽衣草單囊殼菌（Sphaerotheca macularis）侵染所致，是保護地草莓種植過程中普遍發(fā)生的一種病害，在世界各地都有分布［1－3］。北京地區(qū)溫室大棚草莓白粉病一般始發(fā)于10月下旬至11月上旬，12月至翌年4月為危害嚴重期，后者不僅是一年中草莓生產(chǎn)的黃金時期，而且該段時期的病害以危害果實為主，導(dǎo)致幼果停止發(fā)育，成果表面覆蓋一層白粉，隨著病情加重果實著色變差，嚴重影響漿果品質(zhì)并失去商品價值［4］。該病害已經(jīng)成為北京草莓主產(chǎn)區(qū)限制草莓發(fā)展的主要因素之一，每年給種植戶造成嚴重的經(jīng)濟損失。

草莓果實屬漿果，以鮮食為主，果實一般直接入口，因此對農(nóng)藥殘留要求嚴格。目前生產(chǎn)上主要使用粉銹寧、百菌清、腈菌唑等化學(xué)農(nóng)藥防治草莓白粉病，但由于多年連續(xù)使用，導(dǎo)致病菌對一些藥劑產(chǎn)生抗性，因此防治效果不夠理想，且易造成農(nóng)藥殘留［5］。因此目前篩選高效、安全的殺菌劑并提供合理安全的用藥技術(shù)已經(jīng)成為草莓產(chǎn)業(yè)發(fā)展亟須解決的一個重要問題。

武夷菌素是由不吸水鏈霉菌武夷菌素變種（Streptomyces ahygroscopicus var.wuyiensis）產(chǎn)生的一種廣譜、高效、低毒的農(nóng)用抗生素［6］。動物毒性試驗表明，武夷菌素急性毒性屬相對無毒，無明顯的蓄積毒性，無致畸、致突變效應(yīng)，安全可靠［7］。植物藥效試驗表明，武夷菌素可有效防治瓜類白粉病、番茄葉霉病、番茄灰霉病等多種作物真菌病害，同時對作物生長還有一定的刺激作用［8－9］。但武夷菌素對草莓白粉病的防治效果如何，還未有過詳細的研究和報道。本文初步探究了武夷菌素對草莓白粉病的防治效果，以期為該生物農(nóng)藥的進一步推廣應(yīng)用起到指導(dǎo)作用。

1 材料與方法

1.1 供試菌種

草莓白粉病菌，從北京市懷柔區(qū)橋梓鎮(zhèn)紅莓園發(fā)病草莓果實上采集草莓白粉病菌制成孢子懸浮液備用。

1.2 供試藥劑

2%武夷菌素水劑，由濰坊萬勝生物農(nóng)藥有限公司提供；10%苯醚甲環(huán)唑水分散顆粒劑，由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植保所微生物農(nóng)藥實驗室提供。

1.3 方法

1.3.1 室內(nèi)毒力測定

參考陳年春的方法［10］進行藥劑對白粉菌孢子萌發(fā)抑制率的測定。用制備好的孢子懸浮液與武夷菌素混合，分別配制成12.5、25、50、100、200μg／mL的孢子懸浮液的混合液，以滅菌水配制成的孢子懸浮液為對照，各取l滴分別置入雙凹載玻片上，每處理3次重復(fù)；將凹面朝下放置于鋪有吸水濾紙的滅菌培養(yǎng)皿中保溫培養(yǎng)，24h后在光學(xué)顯微鏡下觀察3個視野，每個視野隨機檢查100個孢子，記錄孢子的萌發(fā)情況，凡孢子的芽管超過孢子直徑一半時即判為萌發(fā)孢子，計算萌發(fā)率和抑制萌發(fā)率以及EC50。

1.3.2 田間試驗

1.3.2.1 試驗設(shè)計

試驗在北京市懷柔區(qū)橋梓鎮(zhèn)東茶塢村紅莓園草莓大棚內(nèi)進行，草莓品種為‘紅顏’。該大棚內(nèi)歷年白粉病發(fā)生嚴重，施藥時正處于白粉病發(fā)病初期且只有果實發(fā)病。試驗共設(shè)5個處理：2%武夷菌素水劑200倍液；2%武夷菌素水劑300倍液；2%武夷菌素水劑400倍液；10%苯醚甲環(huán)唑水分散顆粒劑600倍液；清水對照CK。每處理重復(fù)4次，共20個小區(qū)，每小區(qū)面積20m2，小區(qū)隨機區(qū)組排列。

1.3.2.2 施藥時間與方式

2012年3月15日第1次施藥，3月22日和4月1日進行第2、3次施藥，采用背負式噴霧機進行噴灑草莓株葉正反面及幼果果面，做到濕而不滴，每20m2施藥量為1.5L。

1.3.2.3 試驗調(diào)查方法和分級標準

第1次施藥前進行病情基數(shù)調(diào)查，第1次施藥后7d、第2次施藥后10d、第3次施藥后12d分別調(diào)查病害情況。每小區(qū)對角線5點取樣，每點取5株，每株調(diào)查所有果實，以每個果實上病斑面積占整個果實的百分比進行分級。病害分級如下［11］。

0級：葉片、果實無病；

1級：病斑面積占整個葉、果面的5%以下；3級：病斑面積占整個葉、果面積6%～15%；5級：病斑面積占整個葉、果面積16%～25%；7級：病斑面積占整個葉、果面積26%～50%；9級：病斑面積占整個葉、果面積50%以上。

同時每次調(diào)查病害時觀察施用武夷菌素對草莓葉片和幼果等的影響情況，考查其對草莓的安全性。

根據(jù)病害調(diào)查結(jié)果計算病情指數(shù)和防治效果，數(shù)據(jù)采用鄧肯氏新復(fù)極差法（DMRT）進行統(tǒng)計分析。

CK0為空白對照區(qū)施藥前病情指數(shù)；CK1為空白對照區(qū)施藥后病情指數(shù)；

PT0為藥劑處理區(qū)施藥前病情指數(shù)；PT1為藥劑處理區(qū)施藥后病情指數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 對白粉病孢子萌發(fā)的室內(nèi)毒力測定

根據(jù)陳年春的方法［10］研究了武夷菌素對草莓白粉菌孢子萌發(fā)的影響，試驗結(jié)果（表1）表明，武夷菌素對草莓白粉病菌孢子的萌發(fā)具有明顯的抑制作用，且隨著藥劑濃度的增大抑制作用增強。對抑制率進行數(shù)據(jù)分析，得到武夷菌素和苯醚甲環(huán)唑?qū)Σ葺追鄄℃咦用劝l(fā)抑制的回歸方程及EC50值，結(jié)果（表2）表明武夷菌素對草莓白粉病菌孢子萌發(fā)的EC50為9.5506μg／mL，略高于對照藥劑苯醚甲環(huán)唑（7.2518μg／mL）。

表1 武夷菌素對草莓白粉病菌孢子萌發(fā)的影響Table 1 Effects of Wuyiencin on conidial germination of S.macularis

表2 武夷菌素對草莓白粉病菌孢子萌發(fā)抑制的毒力回歸方程及EC50Table 2 Regression equation and EC50of Wuyiencin against conidial germination of S.maeularis

2.2 對草莓白粉病的田間防治效果

從表3可知，第1次施藥后7d，2%武夷菌素水劑防治效果隨使用濃度的加大而增高，200倍液（100μg／mL）、300倍液（66.67μg／mL）、400倍液處理（50μg／mL）的平均防效分別為76.40%、77.12%、66.56%，其中200、300倍液防效與化學(xué)農(nóng)藥防效之間不存在顯著差異，而400倍液防效低于化學(xué)農(nóng)藥。第2次藥后10d，2%武夷菌素水劑200、300、400倍液處理的平均防治效果分別為87.76%、85.07%、81.38%，2% 武 夷 菌 素 水 劑200、300倍液防治效果顯著高于化學(xué)農(nóng)藥，400倍液防效與化學(xué)農(nóng)藥無顯著性差異。第3次藥后12d，2%武夷菌素水劑200、300、400倍液處理的平均防治效果分別為91.69%、89.32%、82.55%，200倍液處理效果顯著高于化學(xué)農(nóng)藥，300倍液和400倍液處理防效與化學(xué)農(nóng)藥差異不顯著。處理區(qū)連續(xù)使用藥劑3次后，草莓白粉病病情指數(shù)大幅下降，而空白對照區(qū)白粉病發(fā)生日趨嚴重，說明武夷菌素對草莓白粉病防治效果明顯，值得在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上推廣應(yīng)用。

表3 武夷菌素防治草莓白粉病大棚試驗結(jié)果1）Table 3 Control efficacy of Wuyiencin against strawberry powdery mildew in greenhouses

2.3 對草莓的安全性

每次調(diào)查病害時目測所施用武夷菌素水劑對草莓葉片和幼果等的影響情況，考查藥劑對草莓的安全性。在使用2%武夷菌素水劑防治草莓白粉病的過程中，試驗草莓植株、葉片、果實和花均無藥害癥狀產(chǎn)生。與對照和施用化學(xué)農(nóng)藥的植株相比，施用武夷菌素的植株長勢更好，葉片顏色更深，果實顏色更鮮艷。同時沒有發(fā)現(xiàn)畸形果實，也未發(fā)現(xiàn)對蜜蜂等有益生物的直接影響，說明武夷菌素在使用過程中不會對草莓的生長發(fā)育產(chǎn)生不良影響。

3 結(jié)論與討論

武夷菌素對草莓白粉病菌分生孢子萌發(fā)具有明顯的抑制作用，200μg／mL和100μg／mL時抑制率均達到70%以上。大棚藥效試驗表明在草莓白粉病發(fā)病期連續(xù)噴施3次，能有效地控制草莓白粉病發(fā)生危害，防效為70%～90%。武夷菌素對草莓白粉病的田間防治效果與已報道的武夷菌素防治黃瓜白粉病的田間試驗結(jié)果基本一致［14］，噴施濃度均以200～400倍液較為適宜，發(fā)病期間應(yīng)持續(xù)使用3次以上，防效可以達到90%以上。武夷菌素能有效控制草莓白粉病和黃瓜白粉病的危害，同時對有益生物、生態(tài)環(huán)境及作物的生長發(fā)育均無不良影響，其對作物生產(chǎn)是安全的，建議在草莓生產(chǎn)中推廣使用以防治白粉病。

目前國內(nèi)外對草莓白粉病菌致病機制的研究報道不多，對病原與寄主的互作研究水平遠遠落后于大田作物［15］。對病害防治方法的研究雖多，但實際應(yīng)用的較少，對該病害預(yù)測預(yù)報的研究報道也較少。針對草莓白粉病，在應(yīng)用藥劑防治的同時，應(yīng)積極采取農(nóng)業(yè)防治、物理防治、生物防治等多種方法綜合防治，從品種的選育、溫濕度條件的控制以及各時期的防護著手，才能有效控制其危害，最大限度地減輕白粉病給草莓生產(chǎn)帶來的損失。

由于研究過程中條件的限制，本試驗只就武夷菌素對草莓白粉病的防效方面作了一些初步研究，還有很多問題諸如武夷菌素和化學(xué)農(nóng)藥混配或交替使用對草莓白粉病防治效果如何，武夷菌素對草莓能否起到增產(chǎn)的效果及對其他草莓病害是否也有效果等，均有待于進一步研究。

［1］ 陳桂清，于永年，鄭儒永，等.中國真菌志－白粉菌目［M］.北京：科學(xué)出版社，1987：308－309.

［2］ Peries O S.Studies on strawberry mildew caused by Sphaemtheca maeularis［J］.Annals of Applied Biology，1962，50（2）：225－233.

［3］ Amsalem L，F(xiàn)reeman S，Rav－David，et a1.Effect of climatic factors on powdery mildewcaused by Sphaerotheea maeularis f.sp.fragariae on Strawberry［J］.European Journal of Plant Pathology，2006，114（3）：283－292.

［4］ 杜國棟，劉向鋒，高秀巖.日光溫室草莓白粉病藥劑防治試驗［J］.中國果樹，2010（1）：33－34.

［5］ 潘歡濤，安華明.大棚草莓白粉病防治的藥劑篩選試驗［J］.貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，36（1）：93－94.

［6］ 韋日清，林德忻，陳志和.農(nóng)用抗生素Bo－10產(chǎn)生菌的鑒定［J］.微生物學(xué)報，1984，24（4）：401－402.

［7］ 孫延忠，曾洪梅，石義萍，等.武夷菌素對番茄灰霉菌的抑制作用及對番茄抗病性相關(guān)酶活性的影響［J］.植物保護，2004，30（6）：45－47.

［8］ 潘云平，李洪奎，曹虎春，等.武夷菌素防治棉花黃萎病藥效試驗［J］.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)科技，2007（2）：6l－62.

［9］ 李冬萍，付斌.農(nóng)抗武夷菌素防治黃瓜白粉病試驗［J］.北方園藝，1999（3）：62.

［10］陳年春.農(nóng)藥生物測定方法［M］.北京：北京農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，1990：149－161.

［11］農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所生測室編.農(nóng)藥田間藥效試驗準則（二）GB［M］.北京：中國標準出版社，2004：222－225.

［12］董金皋.農(nóng)業(yè)植物病理學(xué)（北方本）［M］.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2001：57－59.

［13］Miller T C，Gubler W D，Geng S，et al.Effects of temperature and water vapor pressure on conidial germination and lesion expansion of Sphaerotheca macularis f.sp.fragariae［J］.Plant Disease，2003，87（5）：484－492.

［14］金軼偉，劉又高，柴一秋，等.2%武夷菌素水劑防治黃瓜白粉病藥效試驗［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，3（16）：6839－6840.

［15］劉博，傅俊.草莓白粉病研究進展［J］.河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007（2）：20－22.