李玉梅,張 超,王楚盈,劉 佳,趙慶峰,張大方

(長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué),長(zhǎng)春 130117)

心力衰竭是一種嚴(yán)重的心臟疾病,神經(jīng)內(nèi)分泌因素如兒茶酚胺、血管緊張素Ⅱ、內(nèi)皮素、細(xì)胞因子水平等增高是加重血液動(dòng)力學(xué)紊亂,毒害心肌細(xì)胞的重要因素之一。本研究將探討不同比例附子與人參配伍對(duì)急性心衰大鼠血漿N 終端腦鈉素前體(NT-proBNP)、心鈉素(ANP)及血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)的影響。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 Wister 大鼠,體質(zhì)量240～260 g,吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,合格證號(hào):SCXK(吉)-2011-0004;飼養(yǎng)條件:室溫(22±2)℃,濕度40%～60%,動(dòng)物自由進(jìn)食及飲水,自然晝夜節(jié)律。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器 16 道生理記錄儀MP-150 系統(tǒng)(美國(guó)Biopac 公司);MP-2003 注射泵(上海雷恩醫(yī)療器械有限公司);小動(dòng)物呼吸機(jī)HX-300S(成都泰盟科技有限公司)。

1.3 實(shí)驗(yàn)藥物與試劑 附子(黑順片)、人參藥材購(gòu)于長(zhǎng)春宏檢藥業(yè);參附注射液(陽性對(duì)照藥),雅安三九藥業(yè)有限公司,專利號(hào):ZL96117458.7,批號(hào):100513,規(guī)格:10 mL/支;戊巴比妥鈉,上海愛紫特生物科技有限公司批號(hào): 100808;烏拉坦,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司,批號(hào):T20 090811;NT-proBNP、ANP、AngⅡ試試盒:北京伊普瑞斯科技有限公司。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 造模及給藥分組 取健康Wister 大鼠64 只,雌雄各半,體質(zhì)量240～260 g,隨機(jī)分成空白對(duì)照組(KB)、模型對(duì)照組(MX)、參附注射液陽性對(duì)照組(YX)、附子組(FZ)、人參組(RS)、附子∶人參=1∶0.5組(FR1∶0.5)、附子∶人參=1∶1組(FR1∶1)、附子∶人參=1∶2組(FR1∶2),每組各8 只。參照文獻(xiàn)[1]方法,進(jìn)行左心室插管,記錄各組LVSP、左室最大上升速率(+dp/dtmax)、左室最大下降速率(-dp/dtmax)的正常指標(biāo)后,開胸并連接呼吸機(jī),穩(wěn)定后股靜脈恒速注射1.5%戊巴比妥納(6 mL/h)當(dāng)+dp/dtmax 降到正常值的20%～40%穩(wěn)定后,以0.5%戊巴比妥鈉4.5 mL/h 保證模型穩(wěn)定,模型穩(wěn)定5 min 以上即視為心衰模型成功。經(jīng)十二指腸給予受試藥物,陽性對(duì)照藥舌下靜脈注射給藥,模型組給予等量的蒸餾水,空白組不給任何藥物,給藥后60 min 于腹主動(dòng)脈取血,分離血漿,按試劑盒方法,測(cè)定血漿NT-proBNP、ANP、Ang Ⅱ的含量。

2.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法 采用SPSS 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理,均采用方差分析方法,數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 血漿NT-proBNP 測(cè)定結(jié)果 造模后,NT-proBNP含量明顯升高,與空白組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.05)。給藥治療后各組大鼠血漿NT-proBNP 含量與模型組比均有所降低,尤以附子人參1∶0.5組和附子人參1∶1組作用更強(qiáng)(P ＜0.05)。

3.2 心房肽(ANP)檢測(cè)結(jié)果 模型組與空白組比較,ANP 含量明顯增高。給藥后,ANP 含量有所下降。且附子人參配伍后,對(duì)ANP 的調(diào)節(jié)作用有所增強(qiáng),尤以附子人參1∶0.5組作用更為明顯,與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.01)。

3.3 Ang Ⅱ測(cè)定結(jié)果 造模后模型大鼠血漿中Ang Ⅱ顯著上升,給藥治療后與模型組比較,其含量均有所下降。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。

表1 血漿NT-proBNP、ANP、Ang Ⅱ含量測(cè)定結(jié)果(,n=8)

表1 血漿NT-proBNP、ANP、Ang Ⅱ含量測(cè)定結(jié)果(,n=8)

注:與KB組比較,#P ＜0.05,###P ＜0.001;與MX組比較,△P ＜0.05,△△P ＜0.01。

4 討論

附子為臨床常用有毒中藥,具有強(qiáng)心、抑制心室顫動(dòng),改善學(xué)流動(dòng)力學(xué)指標(biāo),緩解心衰的治療作用[2-4],而在心衰的發(fā)展變化中,神經(jīng)—體液因子的釋放也起著重要作用,探討其與心衰的相關(guān)性,有利于更進(jìn)一步分析附子抗心衰用作的機(jī)制。

BNP 和NT-proBNP 為利鈉肽家族中的成員,BNP主要由心室分泌,當(dāng)心肌受到牽張或室壁壓力增大時(shí),心肌BNP 前體原(PreProBNP)裂解為BNP、NTproBNP,二者與心功能有良好的相關(guān)性,NT-ProBNP較BNP 體外穩(wěn)定性高,且具有個(gè)體差異較小、濃度較高等優(yōu)點(diǎn),利于測(cè)定,NT-ProBNP 與BNP 相比是更敏感的發(fā)現(xiàn)早期心臟功能不全的標(biāo)志物,是較理想的檢測(cè)指標(biāo)[5]。研究結(jié)果表明附子人參1∶0.5組降低血中NT-proBNP 作用最強(qiáng)。分析原因,可能是附子人參均有一定的強(qiáng)心作用,其相互配伍后,對(duì)急性心衰有更好的改善作用,進(jìn)而調(diào)節(jié)NT-proBNP 的釋放作用。

心房肽(ANP)是心房合成和分泌的一種具有生物活性的多肽激素,ANP 主要在心功能不全時(shí)最大程度激活。血漿ANP 升高,這對(duì)判斷有無心力衰竭及心力衰竭程度有幫助[6]。本研究表明:附子人參配伍后,對(duì)ANP 的調(diào)節(jié)作用尤以附子人參1∶0.5組作用最為明顯。表明附子與人參的強(qiáng)心作用,可能與調(diào)節(jié)ANP 的釋放有關(guān)。

心衰與腎素—血管緊張素—醛固酮系統(tǒng)(RAAS)的激活密切相關(guān)[7]。Ang Ⅱ是RAAS 中最為重要的活性激素,在病理情況下,Ang Ⅱ是心室重構(gòu)的重要因素,Ang Ⅱ可誘導(dǎo)小動(dòng)脈收縮,增加醛固酮分泌,增強(qiáng)交感神經(jīng)活性,引起心臟和血管重塑,最終導(dǎo)致高血壓、心肌肥厚、心力衰竭等病理變化[8]。本結(jié)果表明:各給藥組血液中Ang Ⅱ含量降低,尤以附子人參1∶0.5組作用明顯(P ＜0.05),Ang Ⅱ含量的降低,提示治療藥對(duì)心衰有緩解作用。

綜上所述,實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示附子與人參按適當(dāng)比例配伍后可能通過提高心肌功能,反饋調(diào)節(jié)急性心衰大鼠血漿Nt-proBNP、ANP、Ang Ⅱ的含量,從而更好的達(dá)到回陽救逆,改善、緩解心功能的作用。

[1]徐淑云,卞如濂,陳修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].3 版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2002:976.

[2]張志仁,張大方,李麗靜,等.附子炮制前后有效部位對(duì)正常及心衰大鼠血流動(dòng)力學(xué)影響[J].長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2009,25(3):331-332.

[3]李超英,李玉梅,張大方,等.附子與人參配伍對(duì)急性心衰大鼠血流動(dòng)力學(xué)的影響[J].中藥新藥與臨床藥理,2011,22(6):593-598.

[4]劉智,張大方,曲曉波,等.炮制對(duì)附子減毒變化及氯仿致顫作用的比較研究[J].吉林中醫(yī)藥,2011,31(5):469-470,474.

[5]付新,黃振文,張菲斐,等.N 端前體腦鈉肽與穩(wěn)定型心絞痛合并糖尿病患者冠脈病變的關(guān)系[J].中華高血壓雜志,2009,17(1):67-70.

[6]張子彬,張玉傳.充血性心力衰竭學(xué)[M].北京:科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社,2002:87-98.

[7]Bhalla V,Maisel A S.B-type natriuretic peptide in the neuronh ormonal hierarchy in heart failure[J].Cardiovasc Rev Rep,2004,25:100-104.

[8]肖駿,余強(qiáng).血管緊張素Ⅱ受體阻滯劑在充血性心力衰竭中的作用機(jī)制和應(yīng)用進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)綜述,2005,11(4):312-313.