葛 劍 楊翠軍 孫茂紅

(河北北方學(xué)院動物科技學(xué)院1，張家口 075131)

(河北北方學(xué)院生命科學(xué)研究中心2，張家口 075000)

近年來綠色養(yǎng)殖的概念越來越深入人心，人們對動物產(chǎn)品安全提出了更高的要求。隨著生物制藥的不斷發(fā)展，尋求高效、環(huán)保、低毒副作用的藥物已成為畜牧養(yǎng)殖業(yè)的熱點問題。天然植物性多糖是從植物中分離出的高效活性物質(zhì)，不僅具有安全低毒、不易在動物產(chǎn)品中產(chǎn)生有害殘留等優(yōu)點，同時具有促生長、抗腫瘤、抗炎癥、抗病毒、抗凝血、降血糖、降血脂、抗疲勞、抗衰老，提高機(jī)體免疫力等作用［1－6］。

馬齒莧(Portulaca oleracea L.)，又名馬莧菜、五行草等，系馬齒莧科馬齒莧屬一年生草本植物。馬齒莧多糖(Portulaca oleracea L.polysaccharide，POP)是馬齒莧的主要活性成分之一。研究表明，POP具有提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能，促進(jìn)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化，提高正常家兔淋巴細(xì)胞和PHA誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞的增殖能力;扶植腸道正常菌群生長，調(diào)整菌群失調(diào)，防治感染的功能;并具有促進(jìn)大鼠受損結(jié)腸粘膜修復(fù)，緩解大鼠潰瘍性結(jié)腸炎的效應(yīng)［7－11］。目前關(guān)于 POP在家禽中的應(yīng)用研究較少，本試驗以雛雞為試驗動物，研究不同濃度的POP對雛雞生長性能、內(nèi)分泌激素及血脂水平的影響，旨在為進(jìn)一步研究并開發(fā)利用多糖類飼料添加劑提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 馬齒莧多糖的提取

馬齒莧原藥經(jīng)粉碎，過40目篩，準(zhǔn)確稱取馬齒莧干粉末10 g，經(jīng)石油醚脫去表面脂肪，80%乙醇脫去小分子糖、生物堿等，濾渣風(fēng)干后以料水比1∶40加熱提取，靜置離心除去雜質(zhì)，濾液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮至最小體積，濃縮液經(jīng)95%乙醇沉淀、離心，沉淀物依次用無水乙醇、丙酮洗滌數(shù)次，經(jīng)真空干燥制得馬齒莧粗多糖。使用時再經(jīng)蒸餾水溶解制得馬齒莧水溶液。

1.2 試驗動物及分組

試驗選用28日齡冀西北本地柴雞60只，隨機(jī)分為4組，每組5個重復(fù)，每重復(fù)3只，試驗Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組每天分別灌服0.5 mL 2、20、40 mg/mL的馬齒莧多糖(POP)，連續(xù)給藥7 d，對照組灌服相同體積的生理鹽水。基礎(chǔ)日糧均統(tǒng)一飼喂育雛料(日糧組成及營養(yǎng)水平見表1)，自由采食和飲水。試驗為期3周，分別于用藥后第1周(35日齡)、第2周(42日齡)及第3周(49日齡)，以重復(fù)為單位空腹稱重，計算平均耗料量和料重比，每周末每重復(fù)隨機(jī)抽取1只雞進(jìn)行無菌心臟采血，并分離血清，置于－20℃冰箱保存，用于測定血脂及血清激素指標(biāo)。

1.3 血清激素指標(biāo)測定

雞血清生長激素(GH)、雞促生長激素釋放激素(GHRH)、胰島素樣生長因子－1(IGF－1)、三碘甲狀腺原氨酸(T3)、和甲狀腺素(T4)均采用放射免疫法測定。放免試劑盒購自北京科美東雅生物有限技術(shù)公司，血樣均在張家口二五一醫(yī)院，采用GC－911 r－放射免疫計數(shù)器(廈門中佳光電科技有限公司)，按照試劑盒說明測定。

1.4 血脂測定

三酰甘油(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL－C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL－C)試劑盒均購自南京建成生物工程研究所，按照試劑盒說明書測定雛雞血脂指標(biāo)。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計及分析

試驗數(shù)據(jù)用Excel處理，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用SPSS 15.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行單因素方差分析，LSD法進(jìn)行多重比較，P＜0.05表示差異達(dá)顯著水平，P＜0.01表示差異達(dá)極顯著水平。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平

2 結(jié)果與分析

2.1 馬齒莧多糖對雛雞生長性能的影響

由表2可知，與對照組相比，不同濃度的馬齒莧多糖均能不同程度地提高雛雞日增重。42日齡試驗Ⅱ、Ⅲ組平均日增重分別高于對照組11.93%和5.17%(P ＜0.05)，49 日齡試驗Ⅱ、Ⅲ組分別高于對照組14.89%和14.75%(P ＜0.05)，整個試驗期，試驗Ⅰ組日增重與對照組相比無顯著差異，且試驗組間差異均不顯著。

在35日齡時，試驗Ⅰ、Ⅱ組只日耗料量與對照組相比降低13.17%和 12.32%(P ＜0.05);42日齡試驗Ⅰ、Ⅱ組耗料量與對照組相比，分別降低8.16%(P ＜0.05)和10.36%(P ＜0.01);49日齡各組耗料量比較差異均不顯著。

35日齡POP各劑量組料重比與對照組相比均有降低的趨勢，但差異不顯著;42日齡試驗Ⅰ、Ⅲ組分別較對照組降低 12.96%和 14.02%(P ＜0.05)，試驗Ⅱ組比對照組降低20.63%(P＜0.01);49日齡各個試驗組料重比均低于對照組(P＜0.05)，各試驗組間差異均不顯著;可以看出，整個試驗期以試驗Ⅱ組飼料轉(zhuǎn)化率最高。

表2 POP對雛雞生長性能的影響

2.2 馬齒莧多糖對雛雞血清激素水平的影響

由表3可知，與對照組相比，35日齡時試驗Ⅱ、Ⅲ組血清GH分別提高6.76%(P＜0.05)和9.46%(P＜0.01)，其他激素水平各組間比較差異均不顯著。

在42日齡時，除試驗Ⅱ組T3水平高于對照組7.24%(P＜0.05)外，其他各組相比差異不顯著。試驗Ⅰ、Ⅲ組T4水平與對照組相比分別降低14.48%和17.92%(P＜0.05)，試驗Ⅱ組在降低 T4效果方面并不顯著，但與對照組相比，IGF－1和GH水平分別顯著提高7.67%和 12.41%(P ＜0.05)。

表3 POP對雛雞血清激素水平的影響/ng/mL

隨試驗期的延長，在雛雞49日齡時，不同濃度的POP試驗組對血清T3的提升較為顯著，其中，試驗Ⅰ、Ⅲ組分別較對照組提高9.55%和10.03%(P ＜0.05)，試驗Ⅱ組提高 12.26%(P ＜0.01)。各試驗組IGF－1水平分別較對照組提高6.93%(P＜0.05)、11.90%(P ＜0.01)和9.10%(P ＜0.05)。各試驗組血清GH水平均較對照組提高(P＜0.05或P＜0.01)，且試驗Ⅲ組要高于試驗Ⅰ組13.14(P＜0.05)。由整個試驗期看，不同濃度的POP試驗組對血清T4和GHRH影響效果均不顯著。

2.3 馬齒莧多糖對雛雞血脂含量的影響

由表4可知，不同濃度的POP試驗組雛雞血清TG、TC和LDL－C含量均呈現(xiàn)降低趨勢，HDL－C和HDL－C/TC呈現(xiàn)不同程度的提高。在35日齡時，試驗Ⅱ、Ⅲ組TC含量與對照組相比降低7.26%和5.91%(P ＜0.05)，試驗Ⅱ組LDL－C 含量和 HDLC/TC分別較對照組降低20.18%和提高11.59%(P＜0.01)，試驗Ⅲ組LDL－C含量和 HDL－C/TC與對照組相比，分別降低19.30%和提高8.70%(P＜0.05)，其余各組間比較差異均不顯著。

42日齡試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組血清TG含量分別比對照組降低 8.33%、33.33%(P ＜ 0.01)和 27.08%(P＜0.05)，試驗Ⅰ組TC含量比對照組降低4.47%(P ＜0.05)，試驗Ⅱ、Ⅲ組均低于對照組 8.94% 和5.59%(P＜0.01)，且試驗Ⅱ組降低膽固醇的效果顯著優(yōu)于試驗Ⅰ組(P＜0.05)。試驗Ⅱ組HDL－C含量與對照組相比提高了8.23%(P＜0.05)，試驗Ⅰ、Ⅲ組 LDL－C含量均比對照組降低 16.67%和20.37%(P ＜0.05)，試驗Ⅱ組 LDL －C 含量低于對照組(P＜0.01)，HDL－C/TC比值各試驗組均顯著或極顯著低于對照組。

在49日齡時，雛雞血清TG和HDL－C含量試驗Ⅱ組分別低于對照組34.04%和高于對照組8.37%(P＜0.05)，TC含量各試驗組均低于對照組(P＜0.05或P＜0.01)，LDL－C 含量試驗Ⅱ組相比對照組降低26.00%(P＜0.01)，試驗Ⅲ組較對照組降低19.00%(P ＜0.05)，HDL－C/TC 比值各試驗組分別較對照組提高 10.45%(P ＜0.05)、19.40%(P ＜0.01)和11.94%(P ＜0.05)。從整個試驗期來看，試驗Ⅱ組降低雛雞血清TG、TC和LDL－C含量及提高HDL－C的效果最好。

表4 POP對雛雞血脂含量的影響

3 討論

3.1 馬齒莧多糖對雛雞生長性能的影響

近年來，中草藥中提取的活性多糖作為一種綠色飼料添加劑，在畜禽飼養(yǎng)中的應(yīng)用越來越引起重視。有文獻(xiàn)報道，在雛雞飼料中添加一定質(zhì)量濃度的中藥多糖能有效提高雛雞生長性能，如白術(shù)多糖［12］、苜蓿多糖［13］、黃芪多糖［14－16］等，其可能的機(jī)制是，多糖能增強細(xì)胞生理代謝作用，促進(jìn)血液循環(huán)，增強動物機(jī)體的代謝，促進(jìn)動物的生長發(fā)育，提高家禽等動物的生產(chǎn)性能［17］。也有研究證實中藥多糖對雛雞增重的效果并不顯著［18－20］，但能顯著降低料肉比，改善飼料利用率［18］。造成結(jié)果差異較大的原因可能與中藥多糖的最適添加量、雛雞飼養(yǎng)環(huán)境等有關(guān)，此外，多糖的給藥途徑也會影響使用效果，臨床上中草藥多以口服的形式直接發(fā)揮作用，本試驗以馬齒莧多糖灌服雛雞，能顯著提高雛雞日增重和飼料轉(zhuǎn)化率。其中，給藥量以20 mg/mL影響最為明顯，說明適宜的多糖濃度能有效促進(jìn)雛雞生長，同時降低飼養(yǎng)成本。

3.2 馬齒莧多糖對雛雞血液代謝激素的影響

甲狀腺激素(T3、T4)廣泛參與調(diào)節(jié)機(jī)體新陳代謝［21］，對禽類生長具有雙向調(diào)控作用［22］。其中，T3濃度與禽類生長呈正相關(guān)［23］，T3水平升高有利于細(xì)胞分化及器官組織發(fā)育［24］，T4濃度降低也可促進(jìn)蛋白質(zhì)的生物合成［25］。試驗結(jié)果證實，馬齒莧多糖可使雛雞血液T3濃度升高，其可能的機(jī)制是促進(jìn)脂肪動員和氧化分解，同時增強生長激素(GH)和胰島素樣生長因子(IGF－1)的作用而引起的［21］。而T4濃度的降低說明馬齒莧多糖的添加有利于T4向T3的轉(zhuǎn)化，其效應(yīng)可能與靶器官中5－脫氫碘酶的活性升高有關(guān)［26］。

人和動物的生長主要受促生長激素軸(生長軸)的調(diào)控，生長軸主要是由下丘腦—垂體—靶器官所分泌的一系列激素及其受體所組成的神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)。GH和IGF－1是生長軸中調(diào)節(jié)動物生長的主要激素，而生長激素釋放激素(GHRH)刺激GH的分泌，從而誘導(dǎo)靶細(xì)胞產(chǎn)生IGF－1，共同促進(jìn)細(xì)胞的生長和增殖，提高蛋白質(zhì)和RNA的生物合成，進(jìn)而促進(jìn)肌肉和內(nèi)臟器官的生長［21］。試驗發(fā)現(xiàn)，馬齒莧多糖的添加使GHRH有升高的趨勢，同時顯著提高血液GH濃度，這與雛雞生長性能的提高有著必然的聯(lián)系;而GH濃度的升高有效刺激了IGF－1的分泌，二者共同發(fā)揮生理功效可能是促進(jìn)雛雞生長的主要原因。

3.3 馬齒莧多糖對雛雞血脂含量的影響

血脂是血中所含脂質(zhì)的總稱，血脂升高會增加心血管疾病和冠心病發(fā)生幾率，而常用的降血脂藥，如煙酸酯或他汀類藥物長期服用對肝臟有一定損害，因此尋找低毒有效調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝的藥物成為臨床研究的熱點。文獻(xiàn)報道，中藥多糖無毒副作用，并具有顯著降血脂效應(yīng)［27－30］。馬齒莧為藥食兩用馬齒莧科植物，研究證實，馬齒莧及其多糖對高血脂大鼠及糖尿病小鼠均具有較強的調(diào)節(jié)血脂代謝的作用［31－32］。本試驗結(jié)果表明，灌服不同劑量的馬齒莧多糖，各試驗組雛雞血清TG、TC和LDL－C含量均呈現(xiàn)降低趨勢，HDL－C和HDL－C/TC呈現(xiàn)不同程度的提高。從整個試驗期來看，質(zhì)量濃度為20 mg/mL的試驗組降低血清TG、TC和LDL－C含量及提高HDL－C的效果最好。這與米糠多糖和枸杞多糖降血脂的作用效果相近［33－34］，認(rèn)為多糖作為降血脂輔助藥物具有廣闊開發(fā)前景。

4 結(jié)論

適宜濃度的馬齒莧多糖(20 mg/mL)能夠通過調(diào)控雛雞血液激素分泌水平，提高雛雞日增重，降低料重比，有效提高飼料轉(zhuǎn)化率，并具有一定的降血脂功效。

［1］章世元，徐春燕，董曉芳，等.苜蓿多糖和黃芪多糖對肉仔雞淋巴細(xì)胞增殖的影響［J］.動物營養(yǎng)學(xué)報，2010，22(3):670－674

［2］Akev N，Turkay G，Can A，et al.Tumour－ preventive effect of Aloe vera leaf pulp lectin(AloctinⅠ)on Ehrlich ascites tumours in mice［J］.Phytother Res，2007，21(11):1070 －1075

［3］YIN H，WANG Y，CHEN T，et al.Purification，characterization and immuno－modulating properties of polysaccharides isolated from Flammulina velutipes mycelium［J］.American Journal of Chinese Medicine，2010，38:191 －204

［4］CAO W，LI X Q，WANG X，et al.Characterizations and anti－tumor activities of three acidic polysaccharides from Angelica sinensis(Oliv.)Diels［J］.International Journal of Biological Macromolecules，2010，46:115 －122

［5］王宏軍，蔣紅，鄧旭明.貴州南五味子多糖對雞細(xì)胞免疫和體液免疫的影響［J］.中國獸醫(yī)學(xué)報，2011，31(6):884－886

［6］ZHANG Y，LU X，ZHANG Y N，et al.Sulfated modification and immunomodulatory activity of water－soluble polysaccharides derived from fresh Chinese persimmon fruit［J］.International Journal of Biological Macromolecules，2010，46:67 －71

［7］張濤，王小平，陳建永，等.馬齒莧多糖干預(yù)三硝基苯璜酸誘導(dǎo)大鼠結(jié)腸炎的作用機(jī)制［J］.中國中西醫(yī)結(jié)合消化雜志，2009，17(2):96 －98

［8］潘鋒，張濤，陳建永.馬齒莧多糖干預(yù)大鼠潰瘍性結(jié)腸炎Caspase－3 Caspase－8表達(dá)的研究［J］.中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2010，28(8):1639 －1641

［9］胡新俊，李春香，王廣，等.馬齒莧多糖對腸道微生態(tài)失調(diào)小鼠的調(diào)整作用研究［J］.中國微生態(tài)學(xué)雜志，2010，22(9):781－783

［10］賀圣文，尤敏，苗乃法，等.野生馬齒莧對家兔淋巴細(xì)胞PHA誘導(dǎo)下增殖的影響［J］.濰坊醫(yī)學(xué)院學(xué)報，1996，15(3):206－207

［11］王曉波，劉殿武，丁月新，等.馬齒覓多糖對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞免疫功能作用［J］.中國公共衛(wèi)生，2005，21(4):462－463

［12］文貴輝，劉振湘，許美解.白術(shù)粗多糖對湘黃雞生長性能的影響［J］.飼料研究，2011(12):17－19

［13］劉大林，胡楷崎，王秀萍，等.苜蓿多糖對肉仔雞生長性能及血清生化指標(biāo)的影響［J］.上海畜牧獸醫(yī)通訊，2011(3):2－4

［14］金光明，趙桂芳，陳娟.黃芪多糖對雛雞生長性能的影響［J］.安徽科技學(xué)院學(xué)報，2008，22(4):1 －4

［15］張勇，李冰，朱宇旌，等.黃芪多糖對肉雞生長性能和小腸黏膜形態(tài)的影響［J］.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2009，40(4):453－457

［16］呂美.黃芪多糖粗提物對肉仔雞生長及代謝調(diào)控的研究［D］.鄭州:河南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2005:16 －19

［17］許欽坤，趙翠燕.黃芪多糖在家禽上的研究進(jìn)展［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39(10):5903 －5904

［18］胡庭俊，劉姍姍，韋現(xiàn)色，等.馬尾藻多糖納米脂質(zhì)體對雞生長發(fā)育及免疫功能的影響［J］.飼料工業(yè)，2012，33(3):32－35

［19］魏炳棟，于維，陶浩，等.黃芪多糖對1～14日齡肉仔雞生長性能、臟器指數(shù)及抗氧化能力的影響［J］.動物營養(yǎng)學(xué)報2011，23(3):486－491

［20］陳洪亮.植物多糖的制備及對肉仔雞免疫功能影響的研究［D］.北京:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院，2002:49－57

［21］許丹寧，田允波，周家容，等.白術(shù)多糖促仔豬生長的內(nèi)分泌機(jī)制［J］.中國畜牧獸醫(yī)，2010，37(3):18 －21

［22］李成會，張香齋，武現(xiàn)軍，等.二氫吡啶對雛雞血清甲狀腺素和皮質(zhì)醇含量影響的研究［J］.畜牧獸醫(yī)學(xué)報，2001，32(1):18 －22

［23］Decuypere E，Buyse G，Rabimi G，et al.Comparative study of endocrinological parameters in genetic of broilers:An o-verview.In:Ellendorff，et al eds.Growth and quality in broiler production［J］.Euro － pean Poultry Science(Special addition of the OECD －workshop)，1995:6－8

［24］張鏡如主編.生理學(xué)［M］.北京:人們衛(wèi)生出版社，1996

［25］葉紅，胡忠澤.二氫吡啶對肉仔雞生產(chǎn)性能及對尿素氮、甲狀腺激素的影響［J］.糧食與飼料工業(yè)，2004(4):35－37

［26］劉燕強，韓正康.大麥日糧添加粗酶制劑對雛雞生長和血液代謝激素含量的影響［J］.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，1998，21(2):77 －81

［27］李曉冰，趙宏艷，郭棟.靈芝多糖藥理學(xué)研究進(jìn)展［J］.中成藥，2012，34(2):332 －335

［28］李孟婕，范秀萍，吳紅棉，等.翡翠貽貝粗多糖降血脂作用的研究［J］.食品科學(xué)，2012，33(1):257 －261

［29］張文，陳建偉，李祥，等.猴頭菌粉多糖對糖尿病小鼠血糖血脂的影響［J］.藥學(xué)與臨床研究，2012，20(1):24－27

［30］劉延吉，劉金鳳，田曉艷，等.軟棗獼猴桃多糖降血糖降血脂活性研究［J］.食品與生物技術(shù)學(xué)報，2012，31(1):86－89

［31］李鳳林，余蕾.馬齒莧多糖降血糖與血脂作用研究［J］.中國食品添加劑，2011(1):64－68

［32］劉浩，董娟，李春艷，等.馬齒莧對高脂血癥大鼠血脂水平的影響［J］.中國臨床康復(fù)，2004，8(30):6678－6679

［33］劉會娟，李淑芳，鄭長山，等.米糠多糖對雛雞生長性能和血清甘油三酯及膽固醇含量的影響［J］.黑龍江畜牧獸醫(yī)，2007(11):53－54

［34］羅瓊，李瑾瑋，張聲華.枸杞及其多糖對家兔血脂的影響［J］.食品科學(xué)，1997，15(4):5 －7.