燕 雯

新疆巴州焉耆縣婦幼保健醫(yī)院，新疆焉耆縣 841100

細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(Extracellular signal-regulated kinase，ERK) 是Ras/Raf/MEK/ERK信號通路的重要成分，其可介導(dǎo)信號由胞漿向胞核傳遞，參與調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長、發(fā)育、分化等多種生理過程，是絲裂原活化蛋白激酶(Mitogenactivated protein kinases，MAPK)家族成員之一，并在細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化中起重要作用[1]。尤其是該通路中的ERK2蛋白與腫瘤的關(guān)系密切。新疆是我國宮頸癌的高發(fā)區(qū)之一,該地區(qū)維吾爾族婦女宮頸癌的發(fā)病率比同一地區(qū)漢族婦女高3～4倍,病死率在全國少數(shù)民族中占首位。本研究對維爾吾族宮頸癌組織中的表達(dá)情況采用免疫組化SP法檢測ERK2蛋白，并探討其在維族宮頸癌中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2005—2009年醫(yī)院病理科經(jīng)病理證實(shí)并手術(shù)切除的50例宮頸癌石蠟組織塊，術(shù)前所有患者均未接受放化療治療。年齡23~66歲，中位年齡（47.3±6.80）歲。根據(jù)FIGO臨床分期:≤Ⅱa期25例，≥Ⅱb期25例;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者13例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者37例；高分化7例、中分化40例、低分化為3例。選擇50例為對照組且年齡31~67歲，對照組為因子宮肌瘤全子宮切除的正常宮頸組織石蠟塊。所選病例均有完整的臨床病理資料。

1.2 方法

免疫組織化學(xué)法常規(guī)冰凍切片后冷丙酮固定10 min，分別做HE染色和免疫組織化學(xué)染色(SP二步法)?？笶RK2一抗(貨號sc-65981，SANTA)濃度為1:50。免疫組織化學(xué)試劑盒SP-9002及DAB試劑盒均購于北京中杉金橋。結(jié)果判斷：由兩位病理專家評估染色結(jié)果。ERK2免疫組織化學(xué)染色結(jié)果以細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性，并根據(jù)陽性細(xì)胞數(shù)及反應(yīng)強(qiáng)度制定如下判斷標(biāo)準(zhǔn)。按染色強(qiáng)度打分：3分為深棕色，2分為淺棕色，1分為淺黃色，0分為不染色。按陽性細(xì)胞所占百分比計(jì)分：0分為無陽性細(xì)胞，1分為陽性細(xì)胞數(shù)≤10%，2分為陽性細(xì)胞數(shù)11%~50%，3分為陽性細(xì)胞數(shù)51%~75%，4分為陽性細(xì)胞數(shù)＞75%。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 13.0軟件對本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用卡方檢驗(yàn)表示計(jì)數(shù)資料，以P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ERK2在不同宮頸組織中的表達(dá)情況

見圖1-2-3。ERK2蛋白在宮頸癌中的表達(dá)主要在胞核，其陽性表達(dá)率為80.0%（40/50），明顯高于正常宮頸組織的14.0%(7/50)，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=43.717，P＜0.01）。

圖1 ERK2在宮頸癌和正常組織中的表達(dá)(A,B,C為癌組織，D為正常組織)

2.2 ERK2表達(dá)與宮頸癌臨床病理因素的關(guān)系

見表1?！茛騜期中，ERK2的陽性率占60.0%，低表達(dá)只占10%，而≤Ⅱa期中ERK2的陽性率占40.0%，低表達(dá)占90%，兩者有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.005），病理分化程度高、中、低3 組間的表達(dá)差異有顯著性(P=0.025）。

3 討論

本研究采用免疫組化SP法，檢測50例宮頸癌組織及50例正常宮頸組織中ERK2蛋白的表達(dá)。發(fā)現(xiàn)在宮頸癌中胞核是ERK2的主要表達(dá)場所，其陽性表達(dá)率為80.0%，明顯高于正常宮頸組織的14.0%(P＜0.01)。ERK2蛋白的高表達(dá)與臨床分期和分化程度有關(guān)，而與年齡、性別及組織類型無關(guān)，表明ERK2在維族宮頸癌的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著重要作用。本研究結(jié)論與蘇連明[8]和章麗霞[9]在肝癌組織中的研究結(jié)果相似，但與章麗霞又有不同之處，本研究并沒有發(fā)現(xiàn)ERK2的表達(dá)與淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移有關(guān)，主要考慮到維族爾族和漢族的種族樣本量的差異。

表1 ERK2表達(dá)與宮頸癌臨床病理特征的關(guān)系[n（%）]

宮頸癌的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)涉及多因素、多基因的復(fù)雜過程，經(jīng)研究分析，有關(guān)ERK的上游基因、通路的活化及其調(diào)節(jié)基因、子宮頸癌及子宮頸癌中晚期的關(guān)系及相關(guān)阻斷劑的應(yīng)用將作為將來研究的重點(diǎn)。同時(shí)，在維吾爾族宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展過程中ERK2可能起著關(guān)鍵性的作用，有可能成為宮頸癌癌基因治療的靶點(diǎn)。

[1] Arbabi S，Maier RV．Mitogen--activated protein kinase[J]．Crit Care Med，2002．30(1)：74-79.

[2] Bouhon TG，Nye sH，Robbins DJ．et al. ERKs：a family of protein-serine/threoninck inases that are activated and tyrosine phosphor-rylated in response to in sulin and NGF[J]．Cell，1991,65(4)：663-675.

[3] Mdmann C，Gibosn S，Jarpe MB，et al. Mitogen activated protein kinase：conservation of a three kinase module from yeast to human[J]．Physiol Rev．1999,79(1):143-180.

[4] 李剛，姚珍徼．ERK1/2信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在宮頸癌發(fā)病中的作用[J]．山東醫(yī)藥，2007，47(24)：118-119.

[5] Rincon-Arano H，Rosales R，Morn N，et al．R-Ras promotes tumor growth Of cervical epithelial cells[J]．Cancer，2003，97(3)：575-585.

[6] Zhang Z,Song T,Jin Y,et al．Epidermal growth factor receptor regulates MT1-MMP and MMP-2 synthesis in SiHa cells via both PI3K/AKT and MAPK/ERK pathways[J]．Gyneeol Cancer,2009,19(6)：998-1003.

[7] Kapetanios V，Lezaris AC，Bogris P，et al．Extracellular regulated kinase-immunoreactivity increases in parallel with cervical int raepithelial neoplasia grade in cervical neoplasial Int[J]．Gyne Cancer，2008，18(3)：540-545.