袁學(xué)軍，陳忠蔭，陳光宙，陳永敢，范平杰

(瓊州學(xué)院生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，海南 三亞 572000)

靈芝素有“仙草”之譽(yù)。靈芝的藥理成分非常豐富，其中有效成分主要包括靈芝多糖、靈芝多肽、三萜類、16種氨基酸、蛋白質(zhì)、甘露酣、香豆精苷、生物堿、有機(jī)酸微量元素等。現(xiàn)代藥理與臨床實(shí)踐進(jìn)一步證實(shí)靈芝多糖是靈芝扶正固本，滋補(bǔ)強(qiáng)壯，延年益壽的主要成分，對(duì)人體具有雙向調(diào)節(jié)作用，所治病種，涉及心腦血管、神經(jīng)、內(nèi)分泌等各個(gè)系統(tǒng)，尤其對(duì)腫瘤、肝臟病變、失眠以及衰老防治作用十分顯著，且無毒副作用［1－4］。目前，國內(nèi)外學(xué)者已經(jīng)對(duì)藥用靈芝中活性成分進(jìn)行不同的研究，包括靈芝活性蛋白［5－8］、靈芝多糖［9－11］、靈芝三萜［12－14］和靈芝酸［15－17］等，栽培條件對(duì)靈芝活性成分的影響也有部分報(bào)道［18－21］。到目前為止靈芝的不同部位和破碎后不同顆粒大小對(duì)靈芝活性成分的影響鮮有報(bào)道。

1 材料與方法

1.1 材料和藥品

1.1.1 材料準(zhǔn)備

7號(hào)靈芝采收后及時(shí)將污物清理干凈，60℃條件下，在干燥箱內(nèi)干燥24 h，選擇15個(gè)完整的子實(shí)體，粉碎，用篩孔直徑分別為0.075 mm、0.1 mm、0.25 mm、0.5 mm、1.0 mm、2.0 mm過篩，均取3 g，最后用帶拉鏈的塑料帶密封備用。

1.1.2 藥品

葡萄糖由廣州化學(xué)試劑廠提供;熊果酸和香草醛由上海晶純?cè)噭┯邢薰咎峁?牛白蛋白和考馬斯亮藍(lán)G250由國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司提供;活性炭、蒽酮、三氯甲烷、磷酸、冰乙酸、氯化鈉、硫酸銨、碳酸氫鈉、鹽酸、氫氧化鈉、無水乙醇、硫酸和高氯酸均為分析純。

1.2 方法

1.2.1 測(cè)定方法

靈芝多糖的測(cè)定參考蒽酮－硫酸法［22］，用葡萄糖做的標(biāo)準(zhǔn)曲線為:y=0.7622x+0.0122，R2=0.998。

靈芝蛋白的測(cè)定參考考馬斯亮藍(lán)G－250法［22］，用牛血清白蛋白做的標(biāo)準(zhǔn)曲線為:y=0.6643x+0.0009，R2=0.999。

靈芝三萜的測(cè)定參考直接光度法測(cè)定法［23］，用熊果酸做的標(biāo)準(zhǔn)曲線為:y=0.4144x－0.01，R2=0.9934。

1.2.2 統(tǒng)計(jì)分析

用南京農(nóng)業(yè)大學(xué)王韶華教授發(fā)明的Stst軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同部位對(duì)靈芝茶活性成分的影響

靈芝不同部位對(duì)靈芝藥用活性成分的影響見表1。

表1 不同部位對(duì)靈芝活性成分的影響

結(jié)果顯示，多糖的含量3個(gè)處理相比差異極顯著，菌柄多糖含量顯著高于菌蓋;蛋白質(zhì)的含量3個(gè)處理相比差異極顯著，菌柄蛋白質(zhì)含量也顯著高于菌蓋;完整的子實(shí)體中三萜含量與菌蓋中相比無差異，但與菌柄相比有顯著性差異，但菌蓋中三萜含量高于菌柄。總之，多糖和蛋白質(zhì)的含量柄中均高于菌蓋，但三萜的含量菌蓋高于菌柄。

2.2 不同顆粒大小對(duì)靈芝茶活性成分的影響

不同顆粒大小對(duì)靈芝茶活性成分的影響見表2。

表2 不同顆粒大小對(duì)靈芝茶藥用成分的影響

結(jié)果顯示，多糖的含量6個(gè)處理相比差異極顯著，其中0.075 mm～0.1 mm處理對(duì)多糖含量最大，其次是0.1 mm～0.25 mm處理，但1 mm～2 mm處理對(duì)多糖含量影響最小，隨著顆粒的增大，多糖含量基本呈逐漸降低的趨勢(shì);蛋白質(zhì)含量不同處理之間有的無差異，有的差異極顯著，其中0.075 mm～0.1 mm處理的蛋白質(zhì)含量最高，隨著顆粒的增大，蛋白質(zhì)含量呈明顯的降低趨勢(shì);三萜含量6個(gè)處理相比差異極顯著，呈明顯的降低趨勢(shì)?？傊S著顆粒的增大，靈芝多糖、蛋白、三萜的含量基本呈逐漸降低的趨勢(shì)。

3 討論與結(jié)論

靈芝多糖、蛋白、三萜類化合物是靈芝中的主要活性物質(zhì)，也是衡量靈芝質(zhì)量的重要指標(biāo)［24］。靈芝不同部位藥用成分含量的比較研究，到目前為止還沒有文獻(xiàn)報(bào)道，無法與其他類似的試驗(yàn)數(shù)據(jù)比較。本實(shí)驗(yàn)研究的結(jié)果表明，在菌蓋和菌柄中，多糖、蛋白質(zhì)、三萜3種藥用成分的含量差異性均極顯著，多糖和蛋白在菌柄中含量高，而三萜在菌蓋中含量高。顆粒大小對(duì)靈芝茶藥用成分影響較大，隨著顆粒的增大，靈芝多糖、蛋白質(zhì)、三萜的含量基本呈逐漸降低的趨勢(shì)，從藥用和經(jīng)濟(jì)角度考慮，靈芝茶顆粒大小選擇在0.1 mm～0.075 mm較好。本研究為提高靈芝茶的質(zhì)量提供技術(shù)參考依據(jù)。

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