王 菲，曹淑禎，崔立云，張霄霄，楊毅梅

（大理學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，云南大理 671000）

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物被譽(yù)為“活的試劑”〔1〕，常用于醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、生物學(xué)、獸醫(yī)學(xué)等的研究。動(dòng)物感染寄生蟲(chóng)后，除了被奪去營(yíng)養(yǎng)影響生長(zhǎng)、發(fā)育和繁殖外，還會(huì)產(chǎn)生機(jī)械損害、毒性損害等，使動(dòng)物機(jī)體的生理、生化及免疫學(xué)指標(biāo)發(fā)生變化，再用于精密的現(xiàn)代生命科學(xué)研究時(shí)，有可能干擾實(shí)驗(yàn)的正常結(jié)果，也可能降低實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性、準(zhǔn)確性及可信度。有些鼠類(lèi)寄生蟲(chóng)還可傳染給人〔2〕。這就要求我們對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量進(jìn)行控制，而質(zhì)控的重點(diǎn)就是對(duì)其攜帶的微生物和寄生蟲(chóng)進(jìn)行控制〔1〕。

為初步了解某校實(shí)驗(yàn)大鼠寄生蟲(chóng)感染情況，我們對(duì)部分開(kāi)放系統(tǒng)飼養(yǎng)的大白鼠做了調(diào)查?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下：

1 材料和方法

1.1 材料 SD大白鼠，自制顆粒飼料開(kāi)放飼養(yǎng)于有不銹鋼絲網(wǎng)蓋的塑料盒中，墊料為清潔刨木屑，每天定量添加飼料和清潔飲水，每周更換塑料盒、墊料。

1.2 方法 按國(guó)家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)〔3〕中“對(duì)于100～500只生產(chǎn)繁殖單元大鼠，取樣數(shù)量不能少于10只”要求進(jìn)行取樣。本次共隨機(jī)抽取大白鼠69只，其中2月齡大白鼠33只，雄性14只，雌性19只，離乳大白鼠（1月齡）36只，雄性19只，雌性17只。每只大鼠用小動(dòng)物專(zhuān)用秤稱(chēng)重（二月齡大白鼠體重48～138 g，平均90.8 g；初離乳大白鼠28～51 g，平均40.9 g）。提起大鼠尾部，收集新鮮糞便1～3顆，分別裝入一次性帶蓋塑料管中，用記號(hào)筆在管壁記錄性別、體重等。帶回實(shí)驗(yàn)室采用生理鹽水直接涂片法〔4〕檢查，每份糞便涂?jī)蓮埻科?，?dāng)日檢完。

2 結(jié)果

2.1 大白鼠蟯蟲(chóng)感染狀況 69只大白鼠，檢出蟯蟲(chóng)鼠17只，陽(yáng)性率25%。其中雄性31只，陽(yáng)性10只，陽(yáng)性率32%；雌性36只，7只檢出幼蟲(chóng)，陽(yáng)性率19%。雄性和雌性大白鼠陽(yáng)性率的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表1。

表1 雌雄大白鼠鼠蟯蟲(chóng)糞檢情況

2月齡大白鼠33只，8只檢出幼蟲(chóng)或成蟲(chóng)，陽(yáng)性率24%。1月齡大白鼠36只，9只檢出幼蟲(chóng)，陽(yáng)性率25%，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表2。

表2 不同月齡大白鼠鼠蟯蟲(chóng)糞檢情況

2.2 蟲(chóng)種鑒定 測(cè)量蟲(chóng)卵20個(gè)，見(jiàn)圖1，平均大小82.6 μm×31.9 μm，與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)〔4〕中鼠管狀線蟲(chóng)（Syphacia.muris）75 μm×29 μm類(lèi)似。成蟲(chóng)長(zhǎng)約1.4 mm，寬約126 μm，頸翼膜清晰，食道球呈圓形，陰門(mén)位置靠近身體前端，尾部尖細(xì)，據(jù)文獻(xiàn)描述〔5-6〕，初步判定本次檢到的蟲(chóng)體為鼠管狀線蟲(chóng)。另外我們還在部分鼠糞內(nèi)觀察到了雌性成蟲(chóng)排卵的整個(gè)過(guò)程，見(jiàn)圖2，盡管已有文獻(xiàn)做過(guò)描述〔7〕，但不如圖片直觀。圖2中可以清晰看到雌蟲(chóng)陰門(mén)突出，鏡下蟲(chóng)卵隨子宮收縮不斷沖擊陰門(mén)并排出。糞便生理鹽水涂片法檢查整個(gè)涂片，蟲(chóng)體有1-6條不等。

圖1 鼠管狀線蟲(chóng)蟲(chóng)卵（40×10）

圖2 排卵中的雌性成蟲(chóng)（10×10）

3 討論和建議

科研常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有大白鼠、小白鼠、地鼠等，根據(jù)不同目的，選用適宜的動(dòng)物。此次調(diào)查大白鼠蟯蟲(chóng)感染率較文獻(xiàn)報(bào)道〔8〕低，可能與每周更換墊料和籠具并嚴(yán)格消毒以及本次調(diào)查蟲(chóng)種單一有關(guān)。鼠蟯蟲(chóng)分隸2屬（無(wú)刺屬Aspiculuris及管狀屬Syphacia）4種（四翼無(wú)刺線蟲(chóng)A.tetraptera、隱藏管狀線蟲(chóng)S.Obvelata、鼠管狀線蟲(chóng)S.muris及地鼠管狀線蟲(chóng)S.mesocriceti）。

Syphacia muris宿主為實(shí)驗(yàn)用大鼠，生長(zhǎng)于結(jié)腸與盲腸腸道黏膜，一般并不引起臨床癥狀，嚴(yán)重感染時(shí)可引起下痢、生長(zhǎng)遲緩、皮毛粗剛，腸阻塞、腸套疊，使動(dòng)物品質(zhì)低落且不適于營(yíng)養(yǎng)學(xué)、免疫學(xué)、血液學(xué)研究。生活史為直接型，蟲(chóng)卵直接或間接被動(dòng)物食入而造成感染，進(jìn)入鼠體后以其頭部附著于腸粘膜上。10～11 d后，發(fā)育成熟的雌蟲(chóng)與雄蟲(chóng)交配后爬到肛周皮膚產(chǎn)卵，故在肛周用透明膠紙法能查到蟲(chóng)卵。蟲(chóng)卵可在空氣中漂浮，并可在動(dòng)物房條件下存活數(shù)周。蟯蟲(chóng)的蟲(chóng)荷數(shù)與動(dòng)物的年齡、性別和免疫狀態(tài)有關(guān)。對(duì)鼠蟯蟲(chóng)感染的控制，以預(yù)防為主，定期進(jìn)行健康監(jiān)測(cè)，嚴(yán)格消毒，保證飼料與墊料的清潔，增加換籠的頻度都可以有效的控制蟯蟲(chóng)癥的感染。85℃干烤20 min以上或70%酒精全面噴灑才可完全殺滅蟲(chóng)卵。一般不主張對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用藥治療。徹底凈化時(shí)，可用腸蟲(chóng)清，治療量為10 mg/只，加250 mL水，3 d用完，2周為1療程，連用3個(gè)療程〔9〕。

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定〔3〕在實(shí)驗(yàn)鼠的等級(jí)分類(lèi)中取消普通級(jí)，而分為清潔級(jí)、無(wú)特定病原體級(jí)（SPF）和無(wú)菌級(jí)。清潔級(jí)鼠中必須排除體外寄生蟲(chóng)、弓形蟲(chóng)和全部蠕蟲(chóng)感染，但文獻(xiàn)回顧發(fā)現(xiàn)清潔級(jí)、SPF級(jí)均有不同程度的寄生蟲(chóng)感染〔10-12〕。因?yàn)榘踩雷o(hù)不到位，已有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物致人感染的報(bào)道〔13-15〕。醫(yī)藥院校學(xué)生進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)，應(yīng)充分認(rèn)識(shí)到動(dòng)物安全的重要性。此外，部分文獻(xiàn)用SPF級(jí)鼠建立寄生蟲(chóng)感染動(dòng)物模型等實(shí)驗(yàn)時(shí)〔16-17〕未見(jiàn)有關(guān)對(duì)實(shí)驗(yàn)用鼠進(jìn)行體檢的描述。筆者認(rèn)為，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的質(zhì)量不僅要靠動(dòng)物房工作人員控制，也需要廣大科研人員積極參與，發(fā)現(xiàn)問(wèn)題及時(shí)溝通，而且實(shí)驗(yàn)前對(duì)動(dòng)物進(jìn)行體檢了解其健康狀態(tài)對(duì)于提高實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確度、嚴(yán)謹(jǐn)性、可重復(fù)性還是十分有幫助的。

〔1〕李學(xué)勇，李根平，賀爭(zhēng)鳴，等.2006—2008年北京地區(qū)常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物和寄生蟲(chóng)檢測(cè)結(jié)果分析〔J〕.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)，2009，26（5）：35-38.

〔2〕Tanideh N，Sadjjadi SM，Mohammadazadeh T，et al.Helminthic Infections of Laboratory Animals in Animal House of Shiraz University of Medical Sciences and the Potential Risks of Zoonotic Infections for Researchers〔J〕.IRCMJ，2010，12（2）：151-157.

〔3〕GB14922.1-2001，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物寄生蟲(chóng)學(xué)等級(jí)及監(jiān)測(cè)方法〔S〕.

〔4〕GB/T18448.1～18448.10-2001，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物寄生蟲(chóng)學(xué)檢測(cè)方法〔S〕.

〔5〕National Research council.Infectious Diseases of Mice and Rats〔M〕.Washington,D.C.:National Acadmies Press，1991：156-158.

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