酸棗仁配方顆粒的質(zhì)量控制研究

徐振球，陳哲妮

(佛山市食品藥品檢驗(yàn)所，廣東 佛山 528000)

酸棗仁配方顆粒的質(zhì)量控制研究

徐振球，陳哲妮*

(佛山市食品藥品檢驗(yàn)所，廣東 佛山 528000)

目的：對酸棗仁配方顆粒進(jìn)行薄層色譜鑒別及HPLC含量測定研究，以客觀評價(jià)酸棗仁配方顆粒的質(zhì)量。方法：薄層色譜鑒別以酸棗仁對照藥材和酸棗仁皂苷A、酸棗仁皂苷B混合對照品為對照，以水飽和的正丁醇為展開劑，噴以1%香草醛硫酸溶液，立即檢視；含量測定采用Ultimate XB-C18色譜柱(200 mm×4.6 mm，5 μm)，流動(dòng)相為乙腈-水(梯度洗脫)，流速：1.0 mL·min-1,蒸發(fā)光散射檢測器檢測。結(jié)果：酸棗仁配方顆粒在對照藥材和對照品相同位置上顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；含量測定樣品中酸棗仁皂苷A峰分離度良好。結(jié)論：首次建立了酸棗仁配方顆粒中酸棗仁的薄層色譜鑒別方法，并進(jìn)行了酸棗仁皂苷A的含量測定，提供了控制酸棗仁配方顆粒質(zhì)量的科學(xué)依據(jù)。

酸棗仁配方顆粒；酸棗仁皂苷A；酸棗仁皂苷B；薄層色譜；HPLC

酸棗仁為鼠李科植物酸棗ZiziphusjujubaMill.var.spinosa(Bunge)Hu ex H.F.Chou的干燥成熟種子[1-3]。原植物生于向陽或干燥山坡、山谷、丘陵等地，分布于遼寧、內(nèi)蒙古、河北、河南、山東、山西、陜西、甘肅、安徽、江蘇[3]。又名山棗，刺酸棗[2]?；瘜W(xué)成分含三萜皂苷、黃酮、脂肪油[3-4]以及有機(jī)酸、糖分、蛋白質(zhì)、生物堿[5]等。酸棗仁具有養(yǎng)心補(bǔ)腎，寧心安神，斂汗，生津的功能[1，3-4]。酸棗仁配方顆粒是用符合炮制規(guī)范的酸棗仁中藥飲片作為原料，經(jīng)現(xiàn)代制藥技術(shù)提取、濃縮、分離、干燥、制粒、包裝精制而成的純中藥產(chǎn)品系列。其有效成分、性味、歸經(jīng)、主治、功效與傳統(tǒng)酸棗仁中藥飲片一致，保持了酸棗仁中藥飲片的主要特征，既能保證中醫(yī)傳統(tǒng)的君、臣、佐、使和辨證施治、靈活加減的特點(diǎn)，又免去了病人傳統(tǒng)煎煮的麻煩，同時(shí)還可靈活地單味顆粒沖服。酸棗仁皂苷A、B是《中國藥典》2010年版中所規(guī)定的酸棗仁中的專屬活性成分，而且皂苷A是酸棗仁中起主要作用的功能性成分[1]。有鑒于此，作者對酸棗仁配方顆粒所含酸棗仁皂苷A、酸棗仁皂苷B進(jìn)行了薄層色譜鑒別，并對酸棗仁皂苷A進(jìn)行了HPLC含量測定研究，以期為酸棗仁配方顆粒的采購、生產(chǎn)、臨床應(yīng)用提供客觀和科學(xué)的質(zhì)量控制依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器

METTLER TOLEDO AB265-S電子天平(瑞士)；KQ-250B超聲波清洗器(昆山)；Agilent 1100高效液相色譜儀，蒸發(fā)光檢測器。

1.2 材料

酸棗仁對照藥材、酸棗仁皂苷A對照品(批號：110734-200509)、酸棗仁皂苷B對照品(批號：110814-200505)，均購自中國食品藥品檢定研究院；酸棗仁配方顆粒(三九醫(yī)藥股份有限公司，批號：1006181S，1006241S，1006281S，每袋裝0.9 g；相當(dāng)于飲片10 g)。乙腈為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 薄層色譜鑒別[1]

取酸棗仁配方顆粒粉末1袋，加甲醇30 mL，超聲處理20 min，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液。另取酸棗仁對照藥材1 g，同法制成對照藥材溶液，再取酸棗仁皂苷A對照品、酸棗仁皂苷B對照品，加甲醇制成每1 mL各含1 mg的混合溶液，作為對照品溶液。上述3種溶液各5 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以水飽和的正丁醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1%香草醛硫酸溶液，立即檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。見圖1。

1.供試品(1006181S) 2.供試品(1006241S) 3.供試品(1006281S) 4.酸棗仁對照藥材 5.酸棗仁皂苷A、酸棗仁皂苷B混合對照品圖1 酸棗仁配方顆粒薄層鑒別色譜圖

2.2 含量測定[1]

2.2.1 色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性 色譜柱：Ultimate XB-C18(200 mm×4.6 mm，5 μm)，流動(dòng)相：以乙腈為流動(dòng)相A，以水為流動(dòng)相B，按表1規(guī)定梯度洗脫，柱溫：30 ℃，蒸發(fā)光散射檢測器檢測。理論板數(shù)按酸棗仁皂苷A峰計(jì)算應(yīng)不低于2 000。對照品與樣品色譜圖見圖2。

表1 梯度洗脫規(guī)定

A. 酸棗仁皂苷A對照品 B. 酸棗仁配方顆粒(批號：1006241S)圖2 酸棗仁配方顆粒HPLC圖

2.2.2 對照品溶液的制備 取酸棗仁皂苷A對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL含0.1 mg的溶液，即得。

2.2.3 供試品溶液的制備 取酸棗仁配方顆粒，研細(xì)，取約0.45 g，精密稱定，至錐形瓶中，加入70%乙醇20 mL，加熱回流2 h，濾過，藥渣用70%乙醇5 mL洗滌，合并洗液與濾液，回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状既芙猓D(zhuǎn)移至5 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻?yàn)V過，取續(xù)濾液，即得。

2.2.4 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密吸取同一供試品溶液，分別在制備后的0,2,4,6,8,24 h，注入高效液相色譜儀，測定各時(shí)間點(diǎn)酸棗仁皂苷A的峰面積，計(jì)算6個(gè)時(shí)間點(diǎn)的RSD=2.9%，結(jié)果表明酸棗仁皂苷A在上述色譜條件及溶液中穩(wěn)定性良好。

2.2.5 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一供試品，研細(xì)，精密稱取6份，按擬定含量測定方法測定供試品中酸棗仁皂苷A的含量，計(jì)算6份樣品的RSD=2.8%，表明本方法重復(fù)性良好。

2.2.6 準(zhǔn)確度試驗(yàn) 取同一已知含量的供試品(批號：1006241S，含酸棗仁皂苷A 0.964 mg·g-1)，精密稱取6份(每份約0.45 g)，各加入酸棗仁皂苷A對照品溶液(0.010 78g→50 mL)2 mL，水浴揮干溶劑，按擬定含量測定方法，測定供試品中酸棗仁皂苷A的含量，計(jì)算6份的平均回收率為96.11%，RSD=2.3%。表明該方法準(zhǔn)確度良好。

2.2.7 樣品含量測定 取3批酸棗仁配方顆粒(批號：1006181S，1006241S，1006281S)，照2.2.3項(xiàng)下制備供試品溶液，分別吸取對照品和供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，測定含量，結(jié)果酸棗仁皂苷A的含量分別為1.074，0.868，0.742 mg/袋。

3 討論

薄層色譜鑒別中，供試品與酸棗仁對照藥材和酸棗仁皂苷A、酸棗仁皂苷B混合對照品色譜可見相同的兩個(gè)明顯藍(lán)綠色斑點(diǎn)，因此，采用酸棗仁作為對照藥材及酸棗仁皂苷A、酸棗仁皂苷B作為對照品可體現(xiàn)酸棗仁配方顆粒有效成分的特征。

酸棗仁皂苷A是酸棗仁配方顆粒的主要有效成分，含量較高(大于0.7 mg/袋)。實(shí)驗(yàn)建立了酸棗仁配方顆粒中酸棗仁皂苷A含量的HPLC測定方法，結(jié)果表明該方法檢測靈敏度高、操作簡便、結(jié)果準(zhǔn)確，因此選擇其作為酸棗仁配方顆粒的質(zhì)量控制方法較為合適。

[1] 國家藥典委員會.中國藥典[S].一部.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：343-344.

[2] 苗明三，李振國.現(xiàn)代實(shí)用中藥質(zhì)量控制技術(shù)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2000：1075-1080.

[3] 國家藥典委員會,中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所.中華人民共和國藥典中藥材及原植物彩色圖鑒[M].下冊.北京：人民衛(wèi)生出版社，2010：1144-1145.

[4] 江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典[M].上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1977：2534-2536.

[5] 尹升鎮(zhèn)，金河奎，金寶淵.酸棗仁生物堿的研究[J].中國中藥雜志，1997,22(5)：296.

QualityControlofSuanzaorenFormulaParticles

XU Zheng-qiu,CHENG Zhe-ni*

(FoshanInstituteForFoodandDrugControl,Foshan528000,China)

Objective： To evaluate quality of Suanzaoren formula particles by TLC and HPLC analysis.Methods： TLC identify with controlled suanzaoren herbs and jujuboside A,jujuboside B were mixed as the control reference substances,water saturated n-butanol as the agent,view thin layer plate immediately after spraying with 1% vanillin sulfuric acid solution. The content was measured by HPLC with Ultimate XB-C18column (200 mm×4.6 mm,5 μm),mobile phase： acetonitrile - water (gradient elution),flow rate： 1.0 mL·min-1,evaporative light scattering detector detection.Results： Suanzaoren formula particles showed the same color fluorescent spots in the same position of the reference herbs and substances. Peak separation of jujuboside A determination is good.Conclusion： This stuffy established TLC identification method for Semen ziziphi spinosae from Suanzaoren formula particles for the first time,supplied quantitative determination method for Jujuboside A,and provided a scientific basis for the quality control of Suanzaoren formula particles.

Suanzaoren formula particles； Jujuboside A； Jujuboside B；TLC； HPLC

2013-01-09)

*

陳哲妮，E-mail：hetherine@21cn.com