王嬌，楊寶翠，姜國志，陳鐘

(神威藥業(yè)集團有限公司，河北 石家莊 051430)

HPLC測定咳特靈膠囊中馬來酸氯苯那敏的含量及均勻度

王嬌*，楊寶翠，姜國志，陳鐘

(神威藥業(yè)集團有限公司，河北 石家莊 051430)

目的：建立咳特靈膠囊中馬來酸氯苯那敏的高效液相色譜分析方法。方法：C18柱，乙腈-0.3%十二烷基硫酸鈉溶液-磷酸(60∶40∶0.02)(用三乙胺調(diào)節(jié)pH值至3.3±0.1)為流動相，流速為1.0 mL·min-1；于225 nm測定咳特靈膠囊中的馬來酸氯苯那敏含量。結(jié)果：馬來酸氯苯那敏的線性范圍為156.08～936.48 μg，平均回收率為98.23%(RSD=0.12%)。結(jié)論：該方法簡便、準(zhǔn)確、無干擾，可用于咳特靈膠囊中馬來酸氯苯那敏的含量及含量均勻度的測定。

高效液相色譜法；咳特靈膠囊；馬來酸氯苯那敏；含量均勻度

咳特靈膠囊收載于《部頒標(biāo)準(zhǔn)·中藥成方制劑》第十四冊，組方為小葉榕干浸膏與馬來酸氯苯那敏，具有鎮(zhèn)咳、祛痰、平喘、消炎的作用，用于治療咳喘及慢性支氣管炎咳嗽，療效確切。該品種每粒含馬來酸氯苯那敏僅1.4 mg，處方量較小，標(biāo)準(zhǔn)中只對馬來酸氯苯那敏的限度進行檢查，要求吸收值范圍在0.35～0.65，范圍較寬，并且該方法操作復(fù)雜，誤差較大?！吨袊幍洹?010年版二部[1]規(guī)定，硬膠囊劑每粒標(biāo)示量不大于25 mg者，均應(yīng)檢查含量均勻度。為更好地控制產(chǎn)品質(zhì)量，參考有關(guān)文獻[2-8]，建立了馬來酸氯苯那敏的含量及含量均勻度檢測方法，該方法簡便、準(zhǔn)確、無干擾，現(xiàn)介紹如下。

1 儀器與試藥

Ultimate 3000高效液相色譜儀(美國戴安公司)；CPA2250型分析天平(Sartorius公司)。馬來酸氯苯那敏對照品(批號：100047-200606，含量99.7%，中國食品藥品檢定研究院)；乙腈為色譜純；其他試劑均為分析純?？忍仂`膠囊(神威藥業(yè)集團有限公司，批號：1108021，1108022，1108023)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗

色譜柱為Phenomenex C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流動相為乙腈-0.3%十二烷基硫酸鈉溶液-磷酸(60∶40∶0.02)(用三乙胺調(diào)節(jié)pH值至3.3±0.1)；流速為1.0 mL·min-1；進樣量為20 μL；檢測波長為225 nm。理論板數(shù)按氯苯那敏峰(色譜圖中馬來酸峰在前，氯苯那敏峰在后)計算不低于2 000。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取105 ℃干燥3 h的馬來酸氯苯那敏對照品適量，加乙腈溶解并定量稀釋制成每1 mL中約含60 μg的溶液，精密量取5 mL，置10 mL量瓶中，加0.3%十二烷基硫酸鈉溶液稀釋至刻度，搖勻即得。

2.3 供試品溶液的配制

取本品內(nèi)容物，研細，稱取0.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙腈25 mL，密塞，稱定重量，超聲處理1 h(功率300 W，頻率40 kHz)，放冷，再稱定重量，用乙腈補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5 mL，置10 mL量瓶中，加0.3%十二烷基硫酸鈉溶液稀釋至刻度，搖勻即得。

2.4 專屬性試驗

按處方組成、制法制成缺馬來酸氯苯那敏的陰性樣品，同供試品溶液制備方法制得陰性供試品溶液。結(jié)果陰性供試品溶液與對照品溶液、樣品溶液色譜保留時間相應(yīng)的位置上無其他色譜峰出現(xiàn)，說明其他成分和輔料對測定無干擾。見圖1～3。

圖1 馬來酸氯苯那敏對照品HPLC圖

圖2 咳特靈膠囊樣品HPLC圖

圖3 咳特靈膠囊陰性樣品HPLC圖

2.5 線性關(guān)系的考察

精密稱取105 ℃干燥3 h的馬來酸氯苯那敏對照品適量，加乙腈溶解并定量稀釋制成每1 mL中約含60 μg的溶液，精密量取5 mL，置10 mL量瓶中，加0.3%十二烷基硫酸鈉溶液稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。精密量取5,10,15,20,25,30 μL注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定。以對照品溶液的量為橫坐標(biāo)(X)，峰面積為縱坐標(biāo)(Y)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為Y=0.032 4X-0.040 9，r=0.999 9。結(jié)果表明，馬來酸氯苯那敏在156.08～936.48 μg線性關(guān)系良好。

2.6 重復(fù)性考察

取對照品溶液，精密量取20 μL注入液相色譜儀，連續(xù)測定6次，結(jié)果馬來酸氯苯那敏峰面積RSD=0.081%，說明含量測定方法的重復(fù)性良好。

2.7 溶液穩(wěn)定性考察

取供試品溶液，分別于0,2,4,8,16 h精密量取20 μL注入液相色譜儀，結(jié)果馬來酸氯苯那敏峰面積RSD=1.10%，說明供試品溶液在16 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.8 重現(xiàn)性考察

制備供試品溶液6份，分別精密量取20 μL注入液相色譜儀，測得峰面積并計算含量，結(jié)果馬來酸氯苯那敏的平均含量為1.374 mg/粒，RSD=1.98%。

2.9 回收率試驗

精密稱取處方量80%、100%、120%的馬來酸氯苯那敏，制成模擬樣品，精密稱取不同水平模擬樣品各3份，測定含量，并計算回收率，結(jié)果見表1。

表1 馬來酸氯苯那敏回收率試驗

2.10 樣品含量測定

將1108021，1108022，1108023 3批樣品按2.3方法分別制成供試品溶液，各精密量取20 μL注入液相色譜儀，測得峰面積并計算含量，結(jié)果分別為1.284,1.281,1.275 mg/粒。

2.11 樣品含量均勻度測定[1]

取供試品1粒，依2.3供試品溶液的制備方法從“內(nèi)容物置具塞錐形瓶”開始操作。1108021，1108022，1108023 3批樣品分別制成10個供試品溶液，各精密量取20 μL注入液相色譜儀，測得峰面積并計算含量均勻度，A+1.8S分別為7.2，7.0，6.6，均小于15.0，說明含量均勻度符合規(guī)定。

3 結(jié)論與討論

實驗中，比較了提取時間對提取效果的影響，確定超聲1 h提取最完全。由二極管陣列檢測器獲得的氯苯那敏色譜峰UV掃描圖譜得知，在225 nm處有最大吸收，因此選擇檢測波長為225 nm。

參考大量文獻，池浩波等[3]處理樣品時用水溶解，調(diào)pH值，用三氯甲烷、正己烷提取，飽和氯化鈉水洗等；簡淑娟[4]處理樣品時三氯甲烷超聲，水浴蒸干，甲醇定容；范蕾等[5]處理時二氯甲烷冷浸，蒸干，稀鹽酸定容；周娟等[6]處理樣品時無水乙醇超聲，反復(fù)洗滌、濾過、超聲等，這些處理方法復(fù)雜，操作誤差大。本文建立的處理方法只需乙腈超聲處理，0.3%十二烷基硫酸鈉溶液定容，操作簡便。

本文建立的方法簡便、準(zhǔn)確、無干擾，可用于測定咳特靈膠囊中馬來酸氯苯那敏的含量及含量均勻度。

[1] 國家藥典委員會.中國藥典[S].二部.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄88.

[2] 國家食品藥品監(jiān)督管理局.國家藥品標(biāo)準(zhǔn)·酚氨咖敏顆粒[S].WS-10001-(HD-1108)-2002.

[3] 池浩波，曾偉杰.HPLC法測定咳特靈膠囊(片)中馬來酸氯苯那敏的含量[J].廣東藥學(xué)，2003，13(4)：19-21.

[4] 簡淑娟.HPLC法測定咳特靈片及膠囊中氯苯那敏的含量及含量均勻度[J].中國藥師，2005，8(4)：313-314.

[5] 范蕾，趙娟，王蘭，等.HPLC法測定咳特靈膠囊中馬來酸氯苯那敏的含量[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報，2006，12(11)：62-63.

[6] 周娟，朱玲.HPLC法測定咳特靈膠囊中馬來酸氯苯那敏的含量及含量均勻度[J].安徽醫(yī)藥，2010，14(4)：406-407.

[7] 江溱. HPLC法測定咳特靈糖漿中馬來酸氯苯那敏的含量及含量均勻度[J].中國民族民間醫(yī)藥，2011,(18)：50-51.

ContentUniformityDeterminationofChlorphenamineMaleateinKetelingCapsulesbyHPLC

WANG Jiao,YANG Bao-cui,JIANG Guo-zhi,CHEN Zhong

(ShinewayPharmaceuticalGroupLtd.,Shijiazhuang051430,China)

Objective： To establish HPLC method for content uniformity determination of chlorphenamine maleate in Keteling Capsules.Methods： C18column was used,the mobile phase is acetonitrile-0.3% SDS-phosphoric acid (60∶40∶0.02,adapt pH to 3.3 with triethylamine),the flow rate is 1.0 mL·min-1,detecting wavelength is 225 nm.Results： The linear range of chlorphenamine maleate was 156.08～936.48 μg. The average recovery was 98.23% with RSD 0.12%.Conclusion： The method is simple,sensitive,rapid and accurate,can be used for the quality control of Keteling Capsules.

HPLC； Keteling Capsules； Chlorphenamine maleate； Content uniformity

2013-02-26)

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王嬌，E-mail：wangjiaowangjiao1212@126.com