(太原理工大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院,太原030024)

1 引言

苯唑西林鈉(oxacillin sodium )，屬半合成青霉素類抗生素，其抗菌作用方式與青霉素相似,對(duì)耐青霉素G 的金黃色葡萄球菌具有殺菌作用。 臨床主要用于治療敏感菌所致的各種感染，如肺炎、敗血癥、乳腺炎、燒傷創(chuàng)面感染、化膿性腦膜炎和骨髓炎、扁桃體炎、峰窩組織炎及膿皮病等。目前關(guān)于苯唑西林鈉已報(bào)道的分析方法主要有，高效液相色譜法[1-3]、分光光度法[4，5]、化學(xué)發(fā)光法[6]和電位滴定法[7]等。而利用四氯對(duì)苯醌作為配體與苯唑西林鈉反應(yīng)形成荷移絡(luò)合物測(cè)定苯唑西林鈉含量的方法尚未見文獻(xiàn)報(bào)道。實(shí)驗(yàn)參考有關(guān)文獻(xiàn)[8]，基于藥物分子中含有能夠給予電子的基團(tuán)，它與電子接受體四氯對(duì)苯醌發(fā)生荷移反應(yīng),在乙醇介質(zhì)中藥物分子與四氯對(duì)苯醌形成穩(wěn)定的1∶1荷移絡(luò)合物。詳細(xì)研究了苯唑西林鈉與四氯對(duì)苯醌形成荷移絡(luò)合物的反應(yīng)條件,探討了反應(yīng)機(jī)理,建立了一種簡(jiǎn)便，快速測(cè)定苯唑西林鈉含量的分光光度新方法，結(jié)果令人滿意。

2 實(shí)驗(yàn)部分

2.1 主要儀器與試劑

儀器：UV-265紫外可見分光光度計(jì)(日本島津公司)，HH-S 型恒溫水浴鍋(河南鞏義市英峪予華儀器廠)。

試劑：3×10-3mol.L-1四氯對(duì)苯醌乙醇溶液(上海易利生化試劑有限公司,AR)；2000 μg/mL苯唑西林鈉乙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液(中國(guó)藥品生物制品檢定所)；所用試劑均為分析純，實(shí)驗(yàn)用水為二次去離子水。

2.2 實(shí)驗(yàn)部分

準(zhǔn)確吸取一定量的2000 μg/mL苯唑西林鈉乙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液于10 mL容量瓶中,加入3×10-3mol/L 四氯對(duì)苯醌乙醇溶液4.0 mL，用乙醇稀至刻度,搖勻后在40℃恒溫水浴中放置10 min,用1cm 的比色池以試劑空白為參比，于波長(zhǎng)424.8 nm處測(cè)定其吸光度。

3 結(jié)果和討論

3.1 吸收光譜

按照實(shí)驗(yàn)方法配制溶液于分光光度計(jì)上掃描,所繪制吸收光譜見圖1,四氯對(duì)苯醌試劑的吸收波長(zhǎng)λmax=280.0 nm,苯唑西林鈉的吸收波長(zhǎng)λ max=339.0 nm，在苯唑西林鈉溶液中加入四氯對(duì)苯醌溶液后，在424.8 nm處出現(xiàn)一新的吸收峰，表明有新物質(zhì)生成，且吸光度值與濃度在一定范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。本實(shí)驗(yàn)以絡(luò)合物424.8 nm作為測(cè)定波長(zhǎng)，同時(shí)以試劑空白為參比，測(cè)定溶液的吸光度值。

圖1 吸收光譜A.四氯對(duì)苯醌；B.苯唑西林鈉；C.絡(luò)合物

3.2 溶劑的選擇

選用水、乙醇、甲醇、丙酮、乙腈、二甲基亞砜等不同的溶劑按照實(shí)驗(yàn)方法配制溶液,測(cè)量其吸光度，結(jié)果表明,苯唑西林鈉與四氯對(duì)苯醌在乙醇溶劑中測(cè)得其吸光度值最大，本實(shí)驗(yàn)選擇乙醇作為反應(yīng)溶劑。

3.3 反應(yīng)溫度與反應(yīng)時(shí)間的影響

按照實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，改變反應(yīng)溫度20～60 ℃和反應(yīng)時(shí)間5～30 min，測(cè)量其吸光度，結(jié)果表明苯唑西林鈉與四氯對(duì)苯醌生成的絡(luò)合物在反應(yīng)溫度40 ℃，反應(yīng)時(shí)間5～30 min時(shí)其吸光度達(dá)到最大值并趨于穩(wěn)定，本實(shí)驗(yàn)選擇反應(yīng)時(shí)間為10 min。

3.4 四氯對(duì)苯醌試劑用量的影響

按照實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行,改變四氯對(duì)苯醌試劑用量,結(jié)果表明,苯唑西林鈉與3×10-3mol/L四氯對(duì)苯醌反應(yīng)時(shí),四氯對(duì)苯醌試劑用量在3.0～6.0 mL范圍內(nèi)吸光度趨于穩(wěn)定，本實(shí)驗(yàn)選用四氯對(duì)苯醌試劑4.0 mL,見圖2。

圖2 四氯對(duì)苯醌試劑用量的影響

3.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線及靈敏度

分別取0.2 mL、0.6 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL的苯唑西林鈉2000 μg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照實(shí)驗(yàn)方法測(cè)量其吸光度，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，見圖3。苯唑西林鈉含量在40～400 ug/ml符合比爾定律，相關(guān)系數(shù)為 r=0.9997，線性方程A=0.0009358C+0.01065，表觀摩爾吸光系數(shù)ε=4.32×102L.mol-1.cm-1。

3.6 絡(luò)合物組成及反應(yīng)機(jī)理探討

用等摩爾連續(xù)變化法測(cè)定苯唑西林鈉與四氯對(duì)苯醌形成絡(luò)合物的組成比為1∶1,見圖4。在苯唑西林鈉分子中含有電子給予體的基團(tuán)存在[5，8]，而四氯對(duì)苯醌是一個(gè)良好的電子接受體[9]，在乙醇溶液中苯唑西林鈉與四氯對(duì)苯醌可生成穩(wěn)定的荷移絡(luò)合物，經(jīng)實(shí)驗(yàn)測(cè)得在波長(zhǎng)424.8 nm處有一強(qiáng)的特征吸收峰，與原來藥物吸收峰相比有明顯紅移，證明生成了荷移絡(luò)合物。

圖3 標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖4 等摩爾連續(xù)變化法[D]—苯唑西林鈉；[R]—四氯對(duì)苯醌

3.7 干擾物質(zhì)實(shí)驗(yàn)

在實(shí)驗(yàn)的最佳條件下考察了其它物質(zhì)對(duì)苯唑西林鈉測(cè)定的干擾情況。當(dāng)相對(duì)誤差在 ±5% 時(shí)，800倍量的乳糖或淀粉,400 倍量的蔗糖或萄葡糖,250倍量的硬脂酸鎂和100倍量的果糖等共存物質(zhì)均不干擾測(cè)定。

3.8 樣品分析

3.8.1 試樣溶液制備

分別取苯唑西林鈉膠囊20粒(苯唑西林鈉250 mg/粒)，將膠囊中藥劑倒出混勻,準(zhǔn)確稱取含有苯唑西林鈉的藥粉1/25(約含苯唑西林鈉200 mg)，用適量水溶解,并過濾于100 mL容量瓶中,用水洗滌,除去不溶物,用水稀釋至刻度(濃度約為2000 μg/mL),搖勻備用。

取注射用苯唑西林鈉1支(苯唑西林鈉500 mg/支)，準(zhǔn)確稱取苯唑西林鈉藥粉200 mg，用適量水溶解,至于100 mL容量瓶中,用水稀釋至刻度(濃度約為2000 μg/mL),搖勻備用。

3.8.2 樣品含量的測(cè)定

精密量取上述樣品制備溶液1.00 mL于10 mL的容量瓶中，按實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行測(cè)定，代入線性方程計(jì)算每枚藥物中苯唑西林鈉的平均含量，結(jié)果見表1。

3.8.3 方法的回收率和精密度

精密量取經(jīng)多次測(cè)定已知含量的同一批苯唑西林鈉適量樣品制備溶液,分別加入不同量的苯唑西林鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液,至于10 mL的容量瓶中，按實(shí)驗(yàn)方法測(cè)量其吸光度，平行測(cè)定5次，按標(biāo)準(zhǔn)加入法測(cè)定回收率為98.74%-100.3%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差≤2.56%，結(jié)果見表1。

表1 樣品測(cè)定結(jié)果及回收率(n=5)

膠囊：苯唑西林鈉膠囊由朗致集團(tuán)博康藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，標(biāo)示量為0.25g/粒。

針劑：注射用苯唑西林鈉由上海新先鋒藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，標(biāo)示量為0.5g/支。

4 結(jié)論

該方法利用四氯對(duì)苯醒試劑作為電子接受體與電子給予體苯唑西林鈉反應(yīng)，在乙醇溶液中形成穩(wěn)定的1∶1荷移絡(luò)合物,并在波長(zhǎng)424.8 nm處出現(xiàn)較強(qiáng)的絡(luò)合物特征吸收峰，證明生成了荷移絡(luò)合物，與原來藥物吸收峰相比有明顯紅移。經(jīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化，苯唑西林鈉含量在40～400 ug/ml符合比爾定律，相關(guān)系數(shù)為 r=0.9997，同時(shí)對(duì)市售樣品苯唑西林鈉針劑和膠囊進(jìn)行測(cè)定及回收率實(shí)驗(yàn)?；厥章蕿?8.74%～100.3%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差≤2.56%。該方法簡(jiǎn)便，快速，測(cè)定波長(zhǎng)在可見區(qū)，易于推廣，為定量測(cè)定苯唑西林鈉制劑提供了一種新方法。

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