利巴韋林注射液中間產(chǎn)品含量快速測定方法

肖七琪 周其超 張 悅

（西南藥業(yè)股份有限公司，中國 重慶 400038）

利巴韋林注射液（1ml：100mg）是由利巴韋林和藥用炭配制成的水溶性溶液。利巴韋林是一種廣譜抗病毒藥，具有抑制呼吸道合胞病毒、流感病毒、甲肝病毒、腺病毒等多種病毒生長的作用。在當(dāng)前流感盛行的時期，利巴韋林注射液發(fā)揮了很大的作用。為了保證藥品質(zhì)量，生產(chǎn)車間需對該藥品實施中間產(chǎn)品監(jiān)控，對產(chǎn)品含量、pH值和顏色進(jìn)行測定，2010版《中國藥典》規(guī)定利巴韋林注射液的檢測方法為高效液相檢測法。由于高效液相色譜儀價格高昂，如果沒購買該設(shè)備，就無法對中間產(chǎn)品實行質(zhì)量控制，所以仍選用原有的氮測定法，而氮測定法方法操作較復(fù)雜，測定一份樣需要1.5小時，由于利巴韋林注射液市場需求量大，而現(xiàn)在每晚2個批次投產(chǎn)，平行檢測兩次，需要6小時左右，無法滿足生產(chǎn)需要，因此本研究擬探索一種通過紫外分光光度法，快速測定利巴韋林中間產(chǎn)品含量的新方法。

1 儀器與試藥

UV—2401PC型紫外分光光度計（日本島津），電子天平（sartotius）利巴韋林（廣東肇慶星湖制藥有限公司、10kg/桶、含量99.8%、原料批號 L080102），注射用水（自制）。

2 試驗方法

2.1 溶液的制備

2.1.1 對照品的制備

精密稱取利巴韋林對照品100mg，置100ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻。再精密量取1ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.1.2 供試品的制備

精密量取利巴韋林注射液 （1ml：100mg）1ml置100ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，再精密量取1ml置100ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得。

2.1.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

精密稱取經(jīng)105℃干燥至恒重的利巴韋林對照品100 mg，置100 mL量瓶中，加注射用水溶解并稀釋至刻度，精密取稀釋液0.2ml，0.4ml，0.8ml，1.0ml，1.6ml，2.0ml，置 100 ml容量瓶，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，即得濃度為 2.0μg/ml，4.0μg/ml，8.0μg/ml，10μg/ml，16μg/ml，20 μg/ml的利巴韋林對照品溶液（標(biāo)準(zhǔn)儲備液）。以注射用水為空白，在206nm波長處測定吸收度。以濃度(C)對吸收度(A)計算，得回歸方程為 C=0.0327A+0.148(r2=0.9995，n=6)。 表明利巴韋林濃度在 2～20μg/mL范圍內(nèi)與吸收度呈良好的線性關(guān)系。

圖1 利巴韋林線形圖

2.1.4 精密度測定

精密吸取1.0ml標(biāo)準(zhǔn)儲備液，分別按UV法測定，在206nm處測定溶液吸收度，經(jīng)6次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度，計算出含量，如下表：

表1 精密度試驗結(jié)果

計算出RSD=0.59%，符合標(biāo)準(zhǔn)。

2.1.5 穩(wěn)定性實驗

取濃度為20μg/ml利巴韋林對照品溶液，在25℃，分別于0h，1h，3h，5h，10h，24h內(nèi)，206nm處測定吸收度，結(jié)果表明吸收度無明顯變化，本品在24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.1.6 樣品測定

分別取對照品溶液及供試品溶液，以注射用水做空白，在206nm處測定吸收度，計算即得含量。

C供——供試品含量，A供——供試品吸收度，A對——對照品吸收度

3 討論

3.1 利巴韋林注射液（1ml：100mg），在處方上無輔料干擾。

3.2 確定利巴韋林溶液的吸收波長

3.2.1 結(jié)構(gòu)分析

利巴韋林是含有—OH、—NH2基團(tuán)的化合物，為N—à躍進(jìn)，從結(jié)構(gòu)確定有弱的紫外吸收。

3.2.2 確定波長

配制利巴韋林溶液的濃度為每1ml中約含被測物質(zhì)10ug，用UV—2401PC型紫外分光光度計在200～400nm波長處自動掃描，從圖4得知，利巴韋林在206nm波長處有最大吸收峰。

圖2 波長—吸收峰圖

3.3 確定吸收系數(shù)

根據(jù)郎伯比爾定律A=ECLC——被測物質(zhì)的質(zhì)量L——液層厚度，cm精密稱取利巴韋林原料1g，用注射用水稀釋至100ml，用1cm的石英池在206nm處測得為475。

4 結(jié)果

中間產(chǎn)品檢驗氮測定法與紫外分光光度法測定結(jié)果比較：對利巴韋林注射液進(jìn)行分析可用紫外分光光度法測定，現(xiàn)用氮測定法和紫外分光光度法，在允許誤差±2%范圍內(nèi)測定利巴韋林注射液中間產(chǎn)品含量，結(jié)果如表2所示：

表2 氮測定法與紫外分光光度法對比表

表3 紫外分光光度法與高效液相法含量測定法比較表

對生產(chǎn)的256個批次的利巴韋林注射液進(jìn)行追蹤監(jiān)控，車間的中間產(chǎn)品測定結(jié)果（紫外分光光度法之對照品法）與質(zhì)檢中心的成品測定結(jié)果（高效液相法）對比，結(jié)果穩(wěn)定，誤差均在規(guī)定范圍內(nèi)，全部符合公司內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)。現(xiàn)摘取12個批次，車間化驗室中間產(chǎn)品測定結(jié)果（紫外分光光度法之對照品法）與質(zhì)檢中心的成品測定結(jié)果（高效液相法）對比，結(jié)果見表3：

從表2、表3結(jié)果看，本法是切實可行的，可以快速準(zhǔn)確的測定含量。

［1］國家藥典委員會.2010版《中國藥典》二部附錄IV[M].中國醫(yī)藥科技出版社.

［2］國家藥典委員會.2010版《中國藥典》二部附錄VII[M].中國醫(yī)藥科技出版社.

［3］《探索利巴韋林注射液半成品含量快速測定的方法》QC成果報告[R].西南藥業(yè)股份有限公司.