翁善鋼
( 外高橋出入境檢驗檢疫局,上海 200137)
豬傳染性胸膜肺炎的病原為胸膜肺炎放線桿菌(Actinobacillus P1europeumoniae,APP)。因分離的年代和時間不同,曾被稱為副溶血嗜血桿菌(H.parahaemolyticus) 和胸膜肺炎嗜血桿菌(H. pleuropneumoniae)。
APP 已有15 個公認的血清型,分別命名為APP-1 至APP-15,這15 種血清型的致病力大不相同。豬群內(nèi)不同血清型的流行情況在不同的國家也大不相同。這也使得不同國家采取的檢測以及診斷方法有所不同。有些國家主要檢測幾種毒力較強的血清型,還有些國家檢測所有血清型的APP。
影響APP 毒力的因素有多種,其中最為重要的是ApxI,ApxII 和ApxIII 3 個基因。這些基因使細菌產(chǎn)生的毒素,抑制豬的中性粒細胞和巨噬細胞的產(chǎn)生,即抑制細胞的吞噬功能,損害急性感染豬機體的防御機制。某些血清型的APP 只含有一種Apx 基因,也有些血清型的APP 含有2 種Apx 基因,這使其具有更強的細胞毒性(見表1)。幾乎所有血清型的APP 都存在ApxIV基因,該基因的致病潛力還沒有被確定。但ApxIV 具有高度的種特異性,因此,近幾年發(fā)展起來的多種診斷方法都基于該基因。
表1 不同血清型APP 所含有的毒力基因
已有多種實驗室方法用于診斷APP感染。采用何種診斷方法要注意結(jié)合臨床情況,同時也要考慮APP 的血清型以及毒力情況很復(fù)雜的實際情況。
1)采集肺部以及扁桃體的病變組織作細菌培養(yǎng),純培養(yǎng)物進一步進行血清型分型。
2)PCR 方法可直接用于檢測ApxIV 基因。病變的肺部組織,扁桃體拭子以及鼻拭子樣品或者來源于這些樣品的純培養(yǎng)物都可以采用PCR 方法鑒定出不同的血清型。
3)對APP 的純培養(yǎng)物采用PCR檢測ApxI、ApxII 和ApxIII 基因有助于了解APP 的毒力。
4)也可以采集新鮮的病變肺組織制作成壓片或者冰凍切片,利用免疫熒光實驗檢測肺組織中的APP 抗原。
1)現(xiàn)在已有檢測針對ApxIV 基因抗體的ELISA 方法。
2)檢測針對APP 的莢膜多糖的ELISA 方法,有助于鑒定出針對不同血清型的APP 的抗體。
3)檢測針對不同血清型APP 抗體的ELISA 方法也有很多報道。
盡管上文介紹了不少檢測抗原和抗體的方法,很多方法事實上并沒有廣泛應(yīng)用,每個國家的APP 感染流行現(xiàn)狀不同,科技水平也不同,這直接影響到具體檢測方法的使用。
在這種情況下,關(guān)鍵因素是及時確認豬群是否存在APP 感染。最好的辦法是將死豬和發(fā)病豬送實驗室進行剖檢。采集典型的急性胸膜肺炎病變的樣本,采用恰當?shù)姆椒ㄟM行細菌培養(yǎng)(見圖1)。純培養(yǎng)物可以進一步用于血清分型。樣品保存好后也可以使用PCR,間接免疫熒光等方法進行檢測。
病豬的扁桃體試子樣品可以采用PCR 方法檢測ApxIV 基因。
出現(xiàn)較為復(fù)雜的胸膜肺炎時很有可能存在多種病原共同感染。此時,需要采集新鮮的肺組織進行細菌學(xué)和病毒學(xué)檢查,采用PCR 的方法檢測是否還存在其他病原。在3 個不同的部位采集具有典型肺部病變的組織進行病理組織學(xué)觀察有助于進一步了解肺部病變的性質(zhì)。慢性病例中,APP 感染引起的病變逐漸皺縮,最終局限于斑點狀的病變(見圖2)。這種情況下,對肺組織進行PCR 檢測,或者對處于恢復(fù)期的豬檢測抗體有助于診斷。通常,APP 感染10~14 d 后就可以檢測到抗體。
疫苗是控制APP 感染的重要手段。目前市場上有亞單位苗和滅活苗出售,但各種疫苗都有其不足之處,不能抵抗所有血清型的攻擊,不能消除患病動物的帶菌狀態(tài)。近來各國都在積極探索基因缺失弱毒苗對胸膜肺炎的保護效果,有望取代目前的滅活苗,因為基因缺失弱毒苗的交叉保護力更強,初步的動物實驗表明可抵抗多數(shù)血清型的攻擊。
根據(jù)近來國內(nèi)外的用藥情況及相關(guān)報道顯示,APP 對頭孢噻夫、替米考星、氟甲砜霉素、先鋒霉素、環(huán)丙沙星、單諾沙星、恩諾沙星、四環(huán)素、慶大霉素、卡那霉素等較敏感。金霉素與泰樂菌素的聯(lián)合用藥在臨床上使用也較多。對有明顯臨床癥狀的發(fā)病豬,可用首選藥物進行口服和注射同時給藥,具有良好的效果。對未發(fā)病豬群在飼料或飲水中添加給藥,先用治療劑量給藥數(shù)天后,改用預(yù)防量給藥數(shù)周或數(shù)月可控制此病的發(fā)生。
各種細菌都會產(chǎn)生抗藥性,且不同的菌株產(chǎn)生的耐藥性也不相同。因此,在本病的防治過程中,對用于預(yù)防的藥物應(yīng)有計劃地定期輪換使用,最好做藥敏實驗。
很多豬場存在多種病原微生物的混合感染。偽狂犬病、豬瘟、PRRS、支原體肺炎、副豬嗜血桿菌感染等疾病或破壞豬的免疫系統(tǒng),或破壞豬肺臟的防御功能,很容易使豬只對 APP 的易感性增加,因而一定要做好這些疾病的防控工作。豬舍及環(huán)境均定期消毒,減少病原微生物的生存。減少豬的應(yīng)激,改善和加強飼養(yǎng)管理,采用全進全出的飼養(yǎng)方式。