犬白血病診斷方法研究

吳海興 夏春香 趙 玲 陳麗玲

（1.云南省昆明市動(dòng)物疫病控制中心，昆明 650223；2.云南省昆明市益寵堂寵物醫(yī)院，昆明 650223；3.云南省昆明醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)部，昆明 650031）

異型淋巴細(xì)胞又稱病毒細(xì)胞、非典型淋巴細(xì)胞、傳染性單核細(xì)胞、刺激性淋巴細(xì)胞等[1]。細(xì)胞特點(diǎn)是胞體較大，胞質(zhì)有很強(qiáng)的嗜堿性，核大，染色質(zhì)疏松，甚至?xí)霈F(xiàn)模糊的核仁或核分裂象。正常犬的血液中偶見異型淋巴細(xì)胞，只有當(dāng)大量病毒感染或某些原因時(shí)才會(huì)升高，一般大于5%即有臨床意義，當(dāng)升高幅度大于10%～25% 時(shí)，對(duì)診斷更有價(jià)值[2]。筆者近10余年來檢查了64例患犬外周血異型淋巴細(xì)胞數(shù)量及所占比例，探討異型淋巴細(xì)胞增高與某些疾病的相互關(guān)系，現(xiàn)作報(bào)道。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及基本情況

1998年以來，來寵物醫(yī)院就診患犬，♂39例，♀25例；年齡4～7歲，64例均經(jīng)血涂片檢查外周血異型淋巴細(xì)胞。結(jié)果外周血異型淋巴細(xì)胞>0.05的有37例；品種：金毛犬10例、大麥町2例、秋田3例、阿拉斯加2例、巴塞特2例。邊境牧羊犬11例，昆明犬3例，北京犬3例、可卡犬1例。追蹤隨訪表明，37例都發(fā)展成淋巴細(xì)胞癌，病程3～9月，預(yù)后不良。統(tǒng)計(jì)大中型犬患病比率較高，特別是邊境牧羊犬和金毛犬。

1.2 臨床癥狀

病犬精神沉郁，食欲不振，消瘦，渴感強(qiáng)，部分出現(xiàn)高燒，腹圍增大，可視黏膜蒼白，呼吸急促或呼吸困難。頜下淋巴結(jié)增大、咽、頸、肩前、腹股溝淋巴結(jié)相繼腫大，皮下組織形成多發(fā)性小結(jié)節(jié)。腹部觸診，脾臟腫大、腹水增多。

1.3 血常規(guī)檢查

就診犬血常規(guī)檢查情況統(tǒng)計(jì)，詳見表1。

表1 血常規(guī)檢查

1.4 顯微鏡檢查

患犬血液常規(guī)涂片，經(jīng)瑞氏染色后，應(yīng)用雙目光學(xué)顯微鏡（日本奧林巴斯-CX21型）的油鏡鏡檢分類，對(duì)異型淋巴細(xì)胞數(shù)量> 0.05 以上者進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 各種疾病異型淋巴細(xì)胞檢出率

對(duì)就診犬異型淋巴細(xì)胞檢查結(jié)果統(tǒng)計(jì)，詳見表2。

2.2 診斷

根據(jù)淋巴異型性和犬的臨床癥狀可以初步診斷。淋巴異型細(xì)胞核超過3種以上大部分屬于犬淋巴細(xì)胞白血病。

表2 各種疾病異型淋巴細(xì)胞檢出率n（%）

圖1 犬外周血中淋巴細(xì)胞異型顯微鏡鏡檢圖

2.3 治療

2.3.1 沖擊療法 強(qiáng)的松龍，5 mg/kg，隔日1次。

2.3.2 增加免疫法 口服黃芪多糖膏或黃芪口服液或轉(zhuǎn)移因子口服液。5 ml/次，2次/d；

2.3.3 輸血療法 20 ml/kg體重，1次/周。

2.3.4 口服靈芝孢子粉膠囊 2 g/次，2次/d，注射白介素-11，20 IU/d。

經(jīng)過7～15 d治療，治療效果不太令人滿意，隨著體表淋巴結(jié)增多增大，犬四肢無力、血常規(guī)檢查細(xì)胞漸進(jìn)性減少，血小板也偏低很多，有的犬眼底出血，瞳孔放大不回縮，兩眼失明?？谏n白貧血、慢慢衰絕死亡。如圖1所示淋巴異型的犬最快2周后死亡，通過輸血和白介素-Ⅱ治療生命延長6～9月，后因貧血、肺水腫、哮喘消瘦衰絕。

3 分析與討論

淋巴異型細(xì)胞升高與感染有關(guān)的疾病如犬瘟熱（CDV）、犬細(xì)小病毒（CPV）、犬淋巴細(xì)胞白血病、弓形體病、腺病毒、自身免疫性疾病、傳染性單核細(xì)胞增多癥、病毒感染所致的急性傳染病有關(guān)。在外周血液都可出現(xiàn)大量的異型淋巴細(xì)胞（> 0.1）對(duì)診斷具有重要意義。犬患淋巴細(xì)胞白血病異型淋巴細(xì)胞逐日增多，一般在0.1～0.2，異型淋巴細(xì)胞的出現(xiàn)有助于犬淋巴細(xì)胞白血病的診斷。診斷時(shí)淋巴細(xì)胞至少顯示3種以上的異常細(xì)胞核構(gòu)型可被鑒定為惡性[3]。該病例出現(xiàn)細(xì)胞核仁明顯（圖1 A）、多核仁（圖1 C），細(xì)胞核染色質(zhì)成網(wǎng)狀（圖1 B）、同時(shí)可見大量的成淋巴細(xì)胞（圖1C）。近年來“三廢”排放、環(huán)境污染、食物添加劑等許多不明原因造成犬病的復(fù)雜化，高燒、嘔吐、腹瀉、體表淋巴結(jié)增大、傳染病篩查后，血液涂片發(fā)現(xiàn)淋巴細(xì)胞異型，進(jìn)一步臨床觀察和實(shí)驗(yàn)室診斷確診犬的淋巴細(xì)胞白血病[4]。根據(jù)異型的特點(diǎn)異型淋巴細(xì)胞是母細(xì)胞化的淋巴細(xì)胞，即成熟淋巴細(xì)胞向幼稚階段轉(zhuǎn)化，在轉(zhuǎn)化過程中形成多變?cè)俅斡龅娇乖碳r(shí)，被激活開始母細(xì)胞化，參與免疫反應(yīng)。病毒感染性疾病患犬外周血異型淋巴細(xì)胞就是激活的淋巴細(xì)胞，臨床試驗(yàn)觀察與研究發(fā)現(xiàn)，多種病毒感染均可引起細(xì)胞免疫應(yīng)答，導(dǎo)致血液中出現(xiàn)大量反應(yīng)性變異T淋巴細(xì)胞和少量的B細(xì)胞，形成的異型淋巴細(xì)胞。平時(shí)T、B淋巴細(xì)胞處于靜止期，當(dāng)被病毒激活時(shí)，形成異型淋巴細(xì)胞[3]。傳統(tǒng)將異型淋巴細(xì)胞分為三型：Ⅰ型（單核細(xì)胞型）、Ⅱ型（漿細(xì)胞型）、Ⅲ型（幼稚型），一般臨床上將不典型淋巴細(xì)胞統(tǒng)稱為異型淋巴細(xì)胞[6]。

[1] 汪華，劉興態(tài)，曾蓉.外周血異型淋巴細(xì)胞檢出情況分析[J].實(shí)用醫(yī)技雜志，2006，13（16）：2808-2009.

[2] 梁冬妮，李甘地，代琳，等.淋巴漿細(xì)胞性淋巴瘤伴巨球蛋白血癥的臨床病理和免疫表型分析[J].中華病理學(xué)雜志，2009，（11）：34-36.

[3] 劉瑞明，丁信軍，楊曉艷，等.血液異型淋巴細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果的實(shí)驗(yàn)室分析[J].吉林醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2001，23（2）：98.

[4] 黨愛民.犬的淋巴細(xì)胞白血病[J].中國寵物醫(yī)生，2009，（7）：223-226.

[5] 林培國，楊曉艷，劉瑞明，等.異型淋巴細(xì)胞在某些疾病診斷中的意義[J].江蘇醫(yī)藥雜志，2002，6（6）：472-473.

[6] 魏揚(yáng).外周血異型淋巴細(xì)胞增高患兒病原學(xué)和細(xì)胞免疫變化的探討[J].中國實(shí)驗(yàn)兒科雜志，2003，1（6）：362-363.