芹菜粉復合腌制劑對腌肉制品品質的影響

石亞中，伍亞華，許 暉，錢時權，汪張貴

（蚌埠學院生物與食品工程系，安徽蚌埠233030）

腌肉（或稱咸肉、臘肉、Bacon或Cured Meat）在我國由來已久，腌制操作是用食鹽或以食鹽為主，并添加亞硝酸鈉、蔗糖等腌制材料處理肉類的過程[1]。由于亞硝酸鹽具有毒性，同時作為前體物生成的N-亞硝基化合物具有致突變和致癌性[2-3]，過量使用存在安全性問題，因此有必要降低腌肉制品中亞硝酸鹽殘留量，優(yōu)化腌肉制品的加工方式，生產天然肉制品[4]。國內外許多學者開展了亞硝酸鹽替代物[5-6]及N-亞硝基化合物抑制劑的研究[7-8]。同時有體外亞硝酸鹽的清除研究[9-11]及單因素實驗對腌肉亞硝酸鹽殘留的研究[12-13]報道。但以上方法只研究了亞硝酸鹽的體外清除效果或單種因素對腌肉制品的影響，目前對影響肉制品中亞硝酸鹽的殘留及抗氧化效果復合腌制劑研究尚少。本實驗在兼顧腌肉制品品質的前提下，對芹菜粉、石榴皮多酚與維生素C復合腌制劑影響腌肉制品品質的規(guī)律進行研究，為肉制品的安全生產提供一定理論參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

新鮮豬后腿肉 安徽宏業(yè)；石榴皮 安徽懷遠；芹菜 蚌埠市售；維生素C 食品級，青島天新食品添加劑有限公司；亞硝酸鈉 食品級，含量大于99%，天津市科密歐化學試劑有限公司；乙醇、甲醇、丙酮等 均為市售分析純。

722S型分光光度計 上海精密儀器有限公司；J-2型組織搗碎勻漿機 常州國華電器有限公司生產；DZF-6030A型真空干燥箱 上海一恒科技有限公司；Minolta Chroma MeterⅡ 日本；HH-S型電熱恒溫水浴鍋 南京昕航科學儀器有限公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 工藝流程 豬后腿肉→預處理→修整→開刀門→肉品腌制→4℃腌制4周→樣品檢測

1.2.2 芹菜粉制備 新鮮芹菜→預處理→破碎、打漿→新鮮芹菜汁→脫色、干燥→芹菜粉

1.2.3 石榴皮總多酚的制備[14]采用微波輔助提取工藝條件為：篩目40目、溫度75℃、料液比1∶30、提取時間140s，提取溶劑為蒸餾水，在此條件下獲得的提取液進行旋轉蒸發(fā)濃縮并冷凍干燥。

1.2.4 實驗設計 在前期實驗基礎之上，參照文獻[11，13，15]，將肉切成長約20cm、寬約8cm的塊狀，在表面均勻地擦抹食鹽、亞硝酸鹽，然后于4℃冷庫中腌制約4周。配料：食鹽2%；實驗組和對照組亞硝酸鹽的添加量均為100mg/kg，另實驗組按一定比例加入芹菜粉、石榴皮多酚和維生素C復合添加劑，并設3個水平，在腌制程序的上大鹽階段加入。以腌肉中亞硝酸鹽殘留量為考察指標，選擇L9（33）正交表安排實驗，因素水平見表1。

表1 正交實驗因素水平表Table 1 Factors and levels of orthogonal test

1.3 指標測定

各指標分別于腌制后1、2、3、4周進行測定，各組實驗設3次重復。

1.3.1 肉色測定 按張偉力[16]方法，用Minolta Chroma MeterⅡ型色度儀，測定肉L*（亮度）、a*（紅度）、b*（黃度）值。

有色度值=b*/a*。

1.3.2 感官評定 按照6分制進行[18]。邀請具備感觀評價知識的食品科學專業(yè)學生及老師各10人對樣品感官評價。每人分別進行評分，最后取其平均值。

4～6分：表面無粘液、霉變，樣品紅而鮮亮，特有香味，接受性好；2～4分：表面無粘液，顏色較紅亮，輕微香味，可接受；1～2分：表面有粘液，顏色暗淡發(fā)黑，無香味或有異味，接受性差。

1.3.3 亞硝酸鹽殘留量 按照GB 5009.33-2010《中華人民共和國國家標準食品衛(wèi)生檢驗方法理化部分食品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的測定》中鹽酸萘乙二胺法[19]，并作相關處理進行檢測，檢出限為1mg/kg。

1.3.4 TBARS值測定（硫代巴比妥酸實驗） 參照文獻[20]。

1.3.5 揮發(fā)性鹽基氮含量測量 參照文獻[21]。

1.4 數據處理

實驗數據結合Excel 2003采用SAS軟件統(tǒng)計程序進行方差分析。

2 結果與分析

2.1 正交實驗結果分析

以芹菜粉、石榴皮多酚與維生素C添加量為因素，腌制4周后腌肉中亞硝酸鹽殘留量為指標，進行正交實驗，結果見表2。

表2 L9（34）正交實驗結果Table 2 Results of orthogonal test

對表2的正交實驗結果進行分析，由極差R可知，降低腌肉亞硝酸鹽殘留量的因素主次順序為：石榴皮多酚（B）＞芹菜粉（A）＞維生素C（C），優(yōu)化組合為A3B1C2，即芹菜粉0.20%，石榴皮多酚200mg/kg，維生素C 300mg/kg。針對此結果進行驗證實驗，腌肉的亞硝酸鹽殘留量為3.15mg/kg。

2.2 腌肉感官評定

影響肉制品質構特性的因素有很多，如原輔料的種類和添加量、生產方法等對肉制品的質地有重要影響[22]。由表3可以看出，腌制4周后，最佳復合腌制劑組肉色的a*（紅度）及感官評分都高于對照組，但不顯著（p＞0.05），且b*（黃度）明顯低于對照組（p＜0.05）。有色度值越低，表明肉的顏色越鮮紅；飽和度值越高，表示顏色越深[23]。復合腌制劑組腌肉飽和度較高，且有色度值明顯小于對照組（p＜0.05），提示復合腌制劑能使腌肉外觀色澤更鮮紅、更飽滿。

表3 最佳復合腌制劑對腌肉感官評價的影響Table 3 Effect of compound curing agent on the sensory evaluation of cured pork

2.3 亞硝酸鹽殘留量

由圖1可見，腌制1周后，最佳復合腌制劑可以明顯減少腌肉中亞硝酸鹽的殘留（p＜0.05）。在貯藏的前2周，腌肉中亞硝酸鹽殘留量呈直線下降，2周時，復合腌制劑組和對照組亞硝酸鹽殘留量分別降至17.18、5.25mg/kg。有研究認為，亞硝酸鹽與肉中成分的反應主要發(fā)生在腌制初期，亞硝酸鹽殘留含量在腌制末期已經降到了很低，在冷藏期間繼續(xù)保持降低趨勢[24]。腌制2周后，各組腌肉亞硝酸鹽殘留量基本保持動態(tài)平衡，但復合腌制劑組含量一直低于對照組。4周時，復合腌制劑組腌肉的亞硝酸鹽殘留量為3.15mg/kg，其含量遠遠低于國家衛(wèi)生限量標準（≤30mg/kg），在一定程度上提高了腌肉食用安全性。其原因可能是在酸性條件下，芹菜粉、石榴皮多酚和維生素C的復合對NO2-具有較強的清除效果；這與邢必亮等[13，25]的研究結果相似。

圖1 復合腌制劑對腌肉亞硝酸鹽含量的影響Fig.1 Effect of compound curing agent on nitrite content

2.4 復合腌制劑對腌肉TBARS值影響

TBARS值即硫代巴比妥酸值，是細胞氧化損傷和脂過氧化程度的指標。其值越大，表明肉制品被氧化程度越嚴重。圖2提示，腌制過程中腌肉TBARS值在第1周迅速增加；隨著腌制時間的延長，其值在不斷緩慢增加，但復合腌制劑組TBARS值始終低于對照組，4周時復合腌制劑組、對照組的TBARS值分別為：0.44、0.56mg/kg。復合腌制劑組的TBARS值均保持在較低水平，說明貯藏過程中肉制品沒有發(fā)生明顯氧化，此現(xiàn)象提示：芹菜粉、石榴皮多酚和維生素C復合作為肉制品添加劑能產生良好的抗氧化效果。孫冬梅等[25]研究也證實芹菜粉對·OH、O2-·、DPPH·自由基，尤其是對O2-·的清除有一定效果。

圖2 復合腌制劑對腌肉MDA值的影響Fig.2 Effects of compound curing agent on the MDA of cured pork

2.5 腌制過程中揮發(fā)性鹽基氮含量變化

揮發(fā)性鹽基氮（TVB-N）指動物性食品由于酶和細菌的作用，在腐敗過程中，使蛋白質分解而產生氮以及胺類等堿性含氮物質[26]。從圖3可以看出，在腌制的前3周，腌肉揮發(fā)性鹽基氮（TVB-N）含量緩慢上升，SAS統(tǒng)計結果表明，第3周復合腌制劑組TVBN含量顯著低于對照組（p＜0.05）；在4周時復合腌制劑組、對照組TVB-N含量分別為10.11、15.18mg/100g，差異顯著（p＜0.05）。表明復合腌制劑可抑制腌肉蛋白質分解，能有效延長腌肉保質期。

圖3 復合腌制劑對腌肉TVBN含量的影響Fig.3 Effect of compound curing agent on the TVBN level of cured pork

3 結論

3.1 以芹菜粉、石榴皮多酚和維生素C制備復合腌制劑，對腌肉的亞硝酸鹽殘留量進行研究，采用正交實驗優(yōu)化腌制劑的配比，其影響因素的主次順序為：石榴皮多酚（B）＞芹菜粉（A）＞維生素C（C），優(yōu)化組合為芹菜粉0.20%，石榴皮多酚200mg/kg，維生素C 300mg/kg，該條件下，腌制4周時，腌肉中亞硝酸鹽殘留量為3.15mg/kg。

3.2 采用復合腌制劑腌肉使腌肉外觀色澤更鮮紅、飽滿，腌制4周后，腌肉有色度值為0.36，明顯低于對照組；TBARS值、TVB-N含量分別為0.44mg/kg、10.11mg/100g，低于對照組。表明復合腌制劑具有一定抗氧化效果，能有效提高腌肉制品品質。

[1]孔保華，羅欣，彭增起．肉制品工藝學[M]．哈爾濱：黑龍江科學技術出版，2001：203-216．

[2]丁之恩．亞硝酸鹽和亞硝胺在食品中的作用及其機理[J]．安徽農業(yè)大學學報，1994，21（2）：199-205．

[3]Cassens R G．Use of sodium nitrite in cured meats today[J]．Journal of Food Technology，1995，7：72-80．

[4]Sebranek J G，Bacus J N.Cured meat products without direct addition of nitrate and nitrite：What are the issues?[J]．Meat Science，2007，77（1）：136-147．

[5]唐愛明，夏延斌．肉制品中亞硝酸鹽降解方法、機理及研究進展[J]．食品與機械，2004，20（2）：35-37，44．

[6]At-Shuibi A M，At-Abdullah B M．Substitution of nitrite by sorbate and the effect on properties of mortadella[J]．Meat Science，2002，62：473-478．

[7]Dineen N M，Kerry J P，Lynch P B，et al．Reduced nitrite levels and dietary a-tocopheryl acetate supplementation：effects on the color and oxidative stability of cooked hams[J]．Meat Science，2000，55：475-482．

[8]Pourazranga H，Moazzamia A A，F(xiàn)azly Bazzazb B S．Inhibition of mutagenic N-nitroso compound formation in sausage samples by using l-ascorbic acid and a-toeopherol[J]．Meat Science，2002，62：479-483．

[9]劉鋼，賈冬英，趙甲元，等.石榴皮多酚提取物對亞硝酸鹽的體外清除作用研究[J]．中國調味品，2011，36（7）：41-44．

[10]吳佳，解成喜.石榴皮總黃酮的提取工藝及抑制亞硝化反應[J]．食品科學，2011，32（21）：112-114．

[11]張立華，張元湖，安春艷.石榴皮提取物的大孔樹脂純化及其抗氧化性能[J]．農業(yè)工程學報，2009，25（1）：142-145．

[12]楊國浩，李瑜．生姜微波浸提液對肉制品中亞硝酸鹽的清除效果[J]．食品與機械，2011，27（3）：98-100．

[13]邢必亮，徐幸蓮．降低腌肉亞硝胺含量的復合抗氧化劑研究[J]．食品科學，2011，32（1）：104-107．

[14]唐鵬程，焦士蓉，唐遠謀．石榴皮提取物體外抗氧化活性比較研究[J]．食品研究與開發(fā)，2012，33（1）：12-15．

[15]李志洲，劉軍.海石榴皮中多酚類物質的提取及其抗氧化性研究[J].食品與發(fā)酵工業(yè)，2009，35（11）：152-155.

[16]張偉力.豬肉質測定的采樣與前處理[J]．養(yǎng)豬，2002（1）：30-32．

[17]LIU YL，LYON BG，WINDHAM WR，et al．Prediction of color，texture，and sensory characteristics of beef steaks by visible and near infrared reflectance spectroscopy．A feasibility study[J]．Meat Science，2003，65：1107-1115．

[18]姜錦鵬，韋習會，陳杰，等．日糧添加脂肪細胞膜蛋白抗體對豬胴體品質和脂肪代謝相關激素和酶活性的影響[J]．中國農業(yè)科學，2007，40（7）：1515-1522．

[19]GB 5009.33-2010食品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的測定[S]．中華人民國家標準，2010．

[20]Namkc，Ahndu.Use of antioxidants to reduce lipid oxidation and off-odor volatiles of irradiated pork homogenates and patties[J].Meat Science，2003，63：1-8．

[21]張坤，彭科懷，杜洪鳳.分光光度法測定肉與肉制品中揮發(fā)性鹽基氮[J]．預防醫(yī)學情報雜志，2009，25（1）：78-80．

[22]殷露琴，徐寶才，楊明．火腿腸質構影響因素[J].肉類工業(yè)，2007（6）：13-15．

[23]席其樂木格，莎麗娜，武彩霞，等．蘇尼特綿羊肉理化品質的分析研究[J]．農產品加工·學刊，2007（5）：29-31．

[24]董慶利，屠康．豬肉腌制過程中亞硝酸鈉添加量對其質構的影響[J]．食品科學，2006，27（4）：62-66．

[25]孫冬梅，郇延軍.芹菜粉對自由基的清除作用及在肉制品中的應用[J]．肉類研究，2011，25（9）：1-4．

[26]王承，喬發(fā)東，靳偉．干腌肉塊復合腌制新技術研究[J].肉類研究，2009（5）：28-31．