劉東軍

（新疆石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，新疆石河子 832000）

牛支原體是危害我國養(yǎng)牛業(yè)的重要致病性支原體,目前已證實(shí)該病呈世界性分布,病原除導(dǎo)致牛肺炎、乳腺炎外,還導(dǎo)致關(guān)節(jié)炎、角膜結(jié)膜炎、耳炎、生殖道炎癥、流產(chǎn)與不孕等多種病癥。據(jù)報(bào)道,歐美國家約四分之一至三分之一的牛呼吸道疾病綜合征是由牛支原體引起的。同時(shí),牛支原體與其它病原的混合感染和協(xié)同致病性是牛支原體肺炎重要的致病機(jī)制之一。據(jù)報(bào)道,混合感染的常見病原菌主要包括:多殺性巴氏桿菌、化膿隱秘桿菌、溶血性曼氏桿菌、昏睡嗜血桿菌等；混合感染的常見病毒有:牛副流感病毒3型、皰疹病毒Ⅰ型、牛呼吸道合胞體病毒、牛病毒性腹瀉病毒和牛冠狀病毒。隨著新疆奶牛業(yè)的迅速發(fā)展，牛支原體肺炎造成的犢牛死亡成為制約奶牛業(yè)健康發(fā)展的嚴(yán)重障礙，給奶牛業(yè)造成嚴(yán)重的損失。通過我們對(duì)牛支原體肺炎的流行病學(xué)調(diào)查，制定了支原體肺炎的綜合防治技術(shù)措施，減少肺炎支原體的危害，提高犢牛成活率，為犢牛健康提供技術(shù)保障，促進(jìn)了新疆奶牛業(yè)的健康發(fā)展。

一、支原體的生物學(xué)特性

（一）形態(tài)與染色特征 支原體是一類能在無活細(xì)胞培養(yǎng)基中繁殖的最小微生物，無細(xì)胞壁，繁殖形式多種多樣。支原體的大小為0.2～0.3 um,可通過濾菌器，常給細(xì)胞培養(yǎng)工作帶來污染的麻煩。無細(xì)胞壁，不能維持支原體結(jié)構(gòu)固定的形態(tài)而呈現(xiàn)多形性。革蘭氏染色不易著色，故常用Giemsa染色法將其染成淡紫色。細(xì)胞膜中膽固醇含量較多，約占36%，對(duì)保持細(xì)胞膜的完整性具有一定作用。凡能作用于膽固醇的物質(zhì)（如兩性霉素B、皂素等）均可引起支原體膜的破壞而使支原體死亡。 支原體基因組為一環(huán)狀以雙鏈DNA，分子量?。▋H有大腸桿菌的五分之一），合成與代謝很有限。肺炎支原體的一端有一種特殊的末端結(jié)構(gòu)，能使支原體粘附于呼吸道黏膜上皮細(xì)胞表面，與致病性有關(guān)。

（二）營養(yǎng)要求與培養(yǎng)特性 營養(yǎng)要求比一般細(xì)菌高，除基礎(chǔ)營養(yǎng)物質(zhì)外還需加入10%～20%動(dòng)物血清以提供支原體所需的膽固醇。最適pH7.8～8.0，低于7.0則死亡，但解脲支原體最適pH6.0～6.5。大多數(shù)兼性厭氧，有些菌株在初分離時(shí)加入5%CO2生長更好。生長緩慢，在瓊脂含量較少的固體培養(yǎng)基上孵育2～3 d，出現(xiàn)典型的“荷包蛋樣”菌落：圓形（直徑10～16 um），核心部分較厚，向下長入培養(yǎng)基，周邊為一層薄的透明顆粒區(qū)。此外，支原體還能在雞胚絨毛尿囊膜或培養(yǎng)細(xì)胞中生長。

繁殖方式：繁殖方式多樣，主要為二分裂繁殖，還有斷裂、分枝、出芽等方式。

二、牛傳染性支原體肺炎流行病學(xué)特點(diǎn)

（一）牛支原體肺炎的發(fā)病機(jī)制牛支原體肺炎的發(fā)病機(jī)制主要由于支原體穿過宿主呼吸道黏膜表面的粘液纖毛層，粘附于黏膜上皮細(xì)胞上，此粘附作用與肺炎支原體表面的P1蛋白末端結(jié)構(gòu)有關(guān)。當(dāng)此粘附因子附著于呼吸道黏膜上皮細(xì)胞時(shí)，釋放的有毒代謝產(chǎn)物可導(dǎo)致纖毛運(yùn)動(dòng)減弱，細(xì)胞損傷。感染肺炎支原體后，可引起體液免疫和細(xì)胞免疫反應(yīng)。體液免疫應(yīng)答先出現(xiàn)特異性IgM抗體，然后出現(xiàn)IgG抗體，持續(xù)較長時(shí)間。鼻咽部局部產(chǎn)生的分泌性IgA抗體，能有效地抑制肺炎支原體與呼吸道上皮結(jié)合。呼吸道IgA抗體比血清中抗體對(duì)宿主的免疫狀態(tài)有更直接關(guān)系。在感染防御上局部抗體甚為重要。局部免疫除IgA外，局部細(xì)胞免疫也發(fā)揮作用。因?yàn)槌醮胃腥臼褂仔笾旅?，促使再次感染時(shí)發(fā)生較重的臨床表現(xiàn)，表明本病與感染肺炎支原體后機(jī)體產(chǎn)生超敏反應(yīng)的關(guān)系。

（二）流行病學(xué)特點(diǎn)

1.潛伏期。牛支原體自然感染的潛伏期較難確定。國外有報(bào)道 ,在健康犢牛群中引入感染牛 24 h后 ,就有犢牛從鼻腔中排出牛支原體 ,但大部分牛在接觸感染牛 7 d后經(jīng)鼻腔排出牛支原體 。有的牛在接觸感染牛 2周后發(fā)病。

2.感染日齡。一月齡的犢牛容易感染支原體肺炎，特別是一周齡的犢牛最易感染，而且病情急劇，癥狀明顯，發(fā)病急，病情重，死亡率較高。1～2月齡的犢牛發(fā)病率較低，2月齡以上的犢牛病例較少。

3.感染途徑。牛群一旦感染支原體發(fā)病或潛伏感染后很難被清除。如果牛群伴發(fā)其他呼吸道疾病 ,如溶血性巴氏桿菌病、牛傳染性鼻氣管炎、呼吸道合胞體病毒病、副流感、病毒性腹瀉-黏膜病牛的死亡率顯著增加。感染牛支原體的?？蓴y帶病原體數(shù)月甚至數(shù)年而成為一個(gè)傳染源。牛之間通過飛沫經(jīng)呼吸道傳播是主要途徑 ,其次是近距離接觸、吸乳汁或生殖道傳播 ,感染牛支原體公牛配種或使用其凍精進(jìn)行人工授精都可導(dǎo)致牛支原體的傳播和擴(kuò)散 。

4.牛品種差異。荷斯坦、娟姍牛等引進(jìn)品種的犢牛發(fā)病率和死亡率較高，本地原有的品種的犢牛發(fā)病率和死亡率較低。新引入的荷斯坦、娟姍牛犢牛在新引入的1～2年內(nèi)發(fā)病率和死亡率較高，經(jīng)過2～3年的風(fēng)土馴化后發(fā)病率和死亡率稍稍降低。

5.混合感染。由于牛支原體感染對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)造成極大的破壞作用 ,導(dǎo)致繼發(fā)感染或混合感染的其他病原微生物的致病力增強(qiáng)。國外報(bào)道的混合感染病原微生物有溶血性巴氏桿菌、牛傳染性鼻氣管炎病毒、呼吸道合胞體病毒、副流感病毒、病毒性腹瀉-黏膜病病毒等。

6.發(fā)病率和死亡率。牛支原體肺炎的發(fā)病率和死亡率和飼養(yǎng)管理水平相關(guān)，飼養(yǎng)管理較好的牛場(chǎng)發(fā)病的死亡率較低。一般冬季12月、1月、2月、3月發(fā)病率在15%～40%，其他月份發(fā)病較少，偶爾有發(fā)病的犢牛。

（三）犢牛支原體肺炎的臨床癥狀 根據(jù)病程和臨床癥狀可分為最急性、急性和慢性。臨床上急性、慢性病例較常見，最急性病例較少見。

1.最急性。最急性病例較少，病初體溫升高40.5℃～41.7℃，精神沉郁，食欲廢絕，呼吸急促，咳嗽，并流漿液性帶血液的鼻液，呈鐵銹紅色。肺部叩診出現(xiàn)濁音，聽診肺泡呼吸音呈捻發(fā)音。隨著病程加重病犢牛臥地不起，呼吸極度困難，全身顫抖，可視黏膜發(fā)紺。目光呆滯，有痛苦的呻吟聲，死亡較快。病程2～3 d，有些急性病例病程僅1 d左右。

圖1 病牛精神沉郁且被毛粗亂無光澤

圖2 牛支原體肺炎的肺部發(fā)生病理變化

2.急性。開始病犢?？人浴⒂袧{液性的鼻液，體溫升高，不愛運(yùn)動(dòng)，常臥于圈舍四周，驅(qū)趕后常出現(xiàn)咳嗽癥狀。2～3 d后咳嗽癥狀加重，鼻液變?yōu)檎骋盒?、膿性并呈鐵銹紅色或紅棕色，粘附在鼻孔周圍和上唇，形成干涸的污垢塊。按壓胸部病犢牛表現(xiàn)敏感、疼痛，聽診肺部出現(xiàn)支氣管呼吸音和喘鳴聲。病犢牛精神沉郁，反芻減少或停止。呼吸困難，腰背拱起，頭頸伸直。眼瞼腫脹，粘液性的分泌增加。最后病犢牛臥地不起，衰竭。有的發(fā)生瘤胃臌氣，有個(gè)別發(fā)生腹瀉。腹部的皮膚發(fā)生丘疹。瀕死期體溫降至常溫以下。病程通常7～10 d，不死的轉(zhuǎn)為慢性病例。

3.慢性。慢性病例較常見，多見于1～2月齡以上的犢牛。病犢牛全身癥狀較輕微,病牛有時(shí)侯咳嗽和腹瀉,鼻涕時(shí)有時(shí)無,身體衰弱，被毛粗亂無光。在此期間，如果飼養(yǎng)管理?xiàng)l件改善病犢?？梢宰匀豢祻?fù)，如果飼養(yǎng)管理?xiàng)l件較差，很容易病情加重或繼發(fā)其他疾病而死亡。

4.剖檢癥狀。病變多集中在胸部，打開胸腔，?？陕劦疆悩拥臍馕痘蚋瘮〕粑?，胸腔內(nèi)常有淡黃色的積液，?；煊懈瘮〉慕M織而呈現(xiàn)灰黃色或黃白色。暴露在空氣中積液形成纖維蛋白凝塊。急性病例肺部的損害多集中在一側(cè)，病變多集中在肺組織的心葉、尖葉、膈葉，肺臟上有肝變區(qū)，肝變區(qū)凸出于肺臟表面，顏色紅至灰色不等。切面呈大理石樣。纖維蛋白滲出液充盈使肺小葉間組織變寬，小葉界限明顯。肺氣腫，支氣管、細(xì)支氣管內(nèi)有大量的白色泡沫樣液體。胸膜變厚表面有大量的纖維蛋白性滲出物附著而變得粗糙。胸膜與肋骨或心包粘連。支氣管淋巴結(jié)和縱隔淋巴結(jié)腫大，切面多汁并有出血點(diǎn)。心包積液，心肌松弛、變軟。急性病例還可見肝臟腫大，膽囊充盈。腎臟腫大，表面有出血點(diǎn)。病程較長的病例肺肝變區(qū)機(jī)化，結(jié)締組織增生，甚至形成包囊化的壞死灶。

5.病理變化。主要為支氣管炎、毛細(xì)支氣管炎及間質(zhì)性肺炎。管壁水腫、增厚、有浸潤斑。支氣管及細(xì)支氣管內(nèi)有粘液甚至膿性分泌物。鏡下所示為急性細(xì)支氣管炎伴有間質(zhì)性肺炎。肺泡內(nèi)可見有少量水腫液及巨噬細(xì)胞。細(xì)支氣管壁有水腫、充血以及單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤，腔內(nèi)可見到中性粒細(xì)胞、脫落上皮細(xì)胞及細(xì)胞殘片。附近的肺泡間隔內(nèi)有淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞浸潤。重癥可見彌漫性肺泡壞死和透明膜病變。

三、牛支原體肺炎的綜合防治措施

（一）支原體疫苗免疫接種 牛支原體可誘導(dǎo)細(xì)胞免疫與體液免疫。給新生牛氣管內(nèi)接種牛支原體后 ,血清中 IgM在攻菌兩周后出現(xiàn)高峰 ,隨后出現(xiàn)了 Ig G1和 Ig G2。攻菌 4周后 Ig G1亞型抗體占優(yōu)勢(shì)。感染后 2～4周可觀察到含有 Ig的細(xì)胞聚集在肺實(shí)質(zhì)的壞死灶區(qū)域 ,且以 Ig G1型細(xì)胞為主 ,其次為 Ig G2型細(xì)胞。鼻腔和氣管的黏膜下層可檢測(cè)到 IgA陽性細(xì)胞。給犢牛氣管內(nèi)與鼻腔內(nèi)同時(shí)接種活的牛支原體后 ,也證實(shí)牛支原體主要誘導(dǎo) Th2型免疫反應(yīng) ,抗體以 Ig G1型為主。實(shí)際生產(chǎn)中采用奶牛產(chǎn)前60 d注射牛支原體滅活氫氧化鋁佐劑疫苗取得良好的效果，接種的奶牛產(chǎn)的犢牛支原體病的發(fā)病率明顯降低，病情較輕，病程短，死亡率降低。

（二）治療措施 發(fā)病犢牛及時(shí)使用抗生素治療，可以取得較好效果。常用的抗生素主要有氧氟沙星、環(huán)丙沙星、氟苯尼考、泰樂菌素、強(qiáng)力霉素等。生產(chǎn)中注意避免長時(shí)間小劑量預(yù)防用藥，以免產(chǎn)生抗藥性，影響治療效果。

1.胸腔注射。5%氧氟沙星10 ml胸腔注射對(duì)治療本病效果良好。具體做法是：病犢牛左側(cè)臥保定在肩關(guān)節(jié)水平線上距肘關(guān)節(jié)5 cm處剪毛、消毒，垂直進(jìn)針3～5 cm穿透皮膚、肋間隙到達(dá)胸腔，但不能刺傷肺臟，注射藥物。在操作時(shí)穿透皮膚后感覺到進(jìn)針的阻力突然減小，這是針尖到達(dá)了胸腔，當(dāng)針尖刺入肺臟時(shí)可以感覺到針尖隨著肺臟有節(jié)奏的來回運(yùn)動(dòng)，這時(shí)應(yīng)當(dāng)將針頭稍稍抽回一些。在操作中應(yīng)注意注射針頭和注射部位的消毒，防止感染。胸腔注射還可以采用氟苯尼考、強(qiáng)力霉素、林可霉素等藥物。胸腔注射每天注射一次，連續(xù)治療5～7 d，為一個(gè)療程。

2.對(duì)癥治療。對(duì)癥狀較重的病犢牛可采用輸液治療，5%碳酸 氫 鈉50～80 ml，25%葡 萄糖200～250 ml，葡萄糖酸鈣50～80 ml，阿奇霉素0.5～0.75 g，0.5%甲硝唑注射液200～250 ml，地塞米松5～10 mg，靜脈注射一天一次連用5～7 d。在肺部炎癥初期為防止?jié)B出，促進(jìn)炎性分泌物消散和吸收，可肌肉注射呋塞米4～5 ml，維生素C 5 ml。

3.預(yù)防用藥。飼料添加抗生素也有較好的預(yù)防效果。每噸精料添加土霉素1 800～2 000 g或恩諾沙星200～400 g連續(xù)飼喂7～10 d也有較好的預(yù)防治療效果。

（三）預(yù)防措施

1.加強(qiáng)犢牛飼養(yǎng)管理。犢牛群注意加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，提高犢牛的抵抗力，減少損失，在生產(chǎn)中我們發(fā)現(xiàn)冬季圈舍保持10℃～15℃的溫度時(shí)，進(jìn)行舍飼，并且盡量減少舍飼密度，可以有效降低發(fā)病率。新生犢牛加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，出生1 h以內(nèi)灌服3～4 kg初乳，間隔12 h灌服2 kg。出生3 d后注射亞硒酸鈉-VE注射液和牲血素注射液。一周后注射維丁膠鈣注射液，牛奶中適量添加葡萄糖酸鈣和維生素D。通過以上措施可以有效提高犢牛的健康水平。

2.加強(qiáng)犢牛圈舍衛(wèi)生。犢牛圈舍保持清潔干燥，糞便污水及時(shí)清除干凈，冬季注意保暖，在提高溫度的前提下，加強(qiáng)通風(fēng)，排除有害氣體，減少發(fā)病。圈舍墊草及時(shí)更換，發(fā)霉墊草及時(shí)清除。犢牛飼養(yǎng)器具和環(huán)境及時(shí)消毒，避免病菌滋生。

3.隔離治療患病犢牛。在預(yù)防本病時(shí)除了一般的預(yù)防措施以外，關(guān)鍵是防止引入病犢?；驇Ь鸂倥?，在引種時(shí)要了解當(dāng)?shù)氐囊咔?，加?qiáng)檢疫防止患病犢牛的引入。新引進(jìn)的犢牛隔離飼養(yǎng)一個(gè)月以上，隔離檢疫確認(rèn)無病后才能混群飼養(yǎng)。發(fā)病時(shí)及時(shí)對(duì)犢牛群逐頭檢查，病犢牛和假定健康犢牛要分開飼養(yǎng)。病犢牛污染的圈舍、飼草、場(chǎng)地要加強(qiáng)消毒或進(jìn)行無害化處理。

4.使用空氣消毒儀減少空氣中的病原菌。臭氧可以有效殺滅養(yǎng)殖環(huán)境中的病原微生物，消除空氣中的氨氣、硫化氫等有害氣體，改善養(yǎng)殖環(huán)境，促進(jìn)動(dòng)物福利。通過改善養(yǎng)殖環(huán)境，減少疾病的發(fā)生，減少化學(xué)藥品的使用，消除動(dòng)物產(chǎn)品的藥物殘留，生產(chǎn)有機(jī)的動(dòng)物產(chǎn)品。

（略）