蒙松年

（邵陽醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校，湖南 邵陽 422000）

自Papanicoloau報(bào)道對(duì)陰道脫落細(xì)胞進(jìn)行固定著色，進(jìn)行女性生殖器惡性腫瘤的診斷，脫落細(xì)胞學(xué)檢查便逐步在臨床推廣應(yīng)用。

由于脫落細(xì)胞脫落后得不到氧氣和養(yǎng)分，加上酶的作用，易發(fā)生退化變性；若固定不及時(shí)，各種細(xì)胞成分自溶破壞，固定不好或過多的人為擠壓，也會(huì)影響細(xì)胞形態(tài)；此外，不同的染色方法，細(xì)胞的鏡下表現(xiàn)差別較大，染色操作不當(dāng)，往往造成人為假象，這些因素，均可干擾影響結(jié)果的判斷。

我們通過對(duì)2104例脫落細(xì)胞（包括細(xì)針吸取細(xì)胞）標(biāo)本進(jìn)行巴氏染色、HE染色和瑞氏染色結(jié)果對(duì)比分析，為各種標(biāo)本選擇合適的染色方法及在操作中應(yīng)特別注意的技術(shù)因素，進(jìn)行了有益的探討。

1 材料與方法

1.1 2104例脫落細(xì)胞標(biāo)本來自附屬醫(yī)院門診及住院病人，其中宮頸涂片722例，漿膜腔積液涂片276例，甲狀腺穿刺涂片312例，淋巴結(jié)穿刺涂片416例，乳腺穿刺涂片202例，痰液涂片176例。

1.2 對(duì)甲狀腺、淋巴結(jié)、乳腺的細(xì)針吸取細(xì)胞涂片、漿膜腔積液涂片進(jìn)行瑞氏染色，另做HE染色對(duì)照，對(duì)宮頸涂片、痰液涂片進(jìn)行巴氏染色，另做HE染色對(duì)照。

1.3 巴氏染色、HE染色和瑞氏染色按《脫落細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)》操作規(guī)程進(jìn)行[1]。

2 結(jié)果

2.1 巴氏染色、HE染色和瑞氏染色的各自結(jié)果，見表1。

2.2 巴氏染色、HE染色和瑞氏染色的各自特點(diǎn)，見表2。

2.3 巴氏染色、HE染色和瑞氏染色的質(zhì)量控制，見表3。

表1 三種染色方法結(jié)果比較

表2 三種染色方法特點(diǎn)比較

3 討論

3.1 細(xì)胞涂片的適時(shí)固定對(duì)保證染色質(zhì)量具有重要意義

放置過久而未進(jìn)行固定處理的涂片會(huì)使細(xì)胞脹大變形，甚至自溶腐敗，從而導(dǎo)致細(xì)胞著色差，結(jié)構(gòu)不清，影響觀察。當(dāng)涂片水分過多時(shí)，易引起涂片中細(xì)胞脫落。脫水不當(dāng)，易造成細(xì)胞過渡收縮和濃染，同樣無法顯示其清晰結(jié)構(gòu)。因此，為了保證染色效果，瑞氏染色應(yīng)在涂片晾干后及時(shí)進(jìn)行固定染色，HE染色及巴氏染色時(shí)涂片后應(yīng)及時(shí)浸入乙醇固定液中固定，如遇水分過多的涂片，可晾至涂片邊緣廓及涂片內(nèi)開始出現(xiàn)點(diǎn)狀干燥區(qū)域時(shí)立即浸入乙醇固定液中進(jìn)行固定、染色。

3.2 染色的目的

是將細(xì)胞在染液中染上不同深淺的顏色，產(chǎn)生不同的折射率以利于在顯微鏡下辨別各種細(xì)胞類別，正確的操作是保證染色效果的關(guān)鍵。三種染色方法中，瑞氏染色較為容易掌握，應(yīng)注意在加染液固定后，及時(shí)追加緩沖液，以防染液揮發(fā)產(chǎn)生沉渣附著在細(xì)胞上，影響效果。巴氏染色步驟較多，EA 36染液的PH值、在稀鹽酸中的分色，對(duì)巴氏染色的成功與否非常重要，應(yīng)嚴(yán)格按要求操作，同時(shí)，要經(jīng)常注意細(xì)胞著色的變化，及時(shí)更換染液，否則較難獲得理想的染色效果。HE染色時(shí)，要特別注意掌握分化的時(shí)間，一旦分化完成，必須立即用水洗去鹽酸酒精，否則細(xì)胞核的著色將被褪去。此外，啟用新的蘇木素染液時(shí)，應(yīng)添加一些老的染液使之混合，及時(shí)用濾紙吸去染液表層的金屬色澤膜，伊紅染液中不染太久，都是保證染色質(zhì)量的重要因素。

3.3 細(xì)胞學(xué)染色方法較多

HE染色、巴氏染色及瑞氏染色三種方法各有其優(yōu)缺點(diǎn)。對(duì)不同的標(biāo)本可選擇不同的染色方法，以滿足操作簡(jiǎn)便、結(jié)構(gòu)清新、易于判斷的要求。許多醫(yī)院習(xí)慣應(yīng)用操作簡(jiǎn)便的HE染色，巴氏染色并不很普及，巴氏染色和HE染色的涂片，在診斷價(jià)值上無根本區(qū)別，均能提供清楚的細(xì)胞核結(jié)構(gòu)，良惡性細(xì)胞核的顯色差異明顯，細(xì)胞核的形態(tài)及染色改變是細(xì)胞學(xué)上診斷癌的重要依據(jù)。巴氏染色細(xì)胞核細(xì)微結(jié)構(gòu)清晰，能辨認(rèn)染色質(zhì)的模式，胞漿透明、多彩，顯示細(xì)胞的分化程度[2]，應(yīng)用液基細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)[LCT]，染色過程由電腦全自動(dòng)控制，簡(jiǎn)化了繁雜的染色過程，唯費(fèi)用較高，在宮頸涂片檢查時(shí)國內(nèi)外推薦使用巴氏染色[3]。HE染色操作簡(jiǎn)便，雖對(duì)胞漿著色單一，但對(duì)胞核著色深淺有層次，惡性腫瘤細(xì)胞核深染明顯，有助于判斷，各種涂片均可采用此染色。瑞氏染色結(jié)果清晰，核漿分明，核的形態(tài)、核仁、包涵物明顯，雖良惡性細(xì)胞核顏色一致，從著色深淺上不能區(qū)別，但綜合涂片細(xì)胞胞體，特別是細(xì)胞核的大小、形態(tài)等改變，仍能對(duì)被檢細(xì)胞作出較正確的判斷，且其操作簡(jiǎn)便，質(zhì)控容易，尤其適用于穿刺細(xì)胞、漿膜腔積液細(xì)胞的檢查，若同時(shí)配合以HE染色，則對(duì)涂片細(xì)胞的評(píng)估及診斷更具幫助。

［1］梁英銳.脫落細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1991：32－37.

［2］舒儀經(jīng)，闞秀.細(xì)針吸取細(xì)胞病理學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2000：4－6.

［3］田玉旺，朱紅艷，邢宜，等.提高細(xì)胞學(xué)標(biāo)本陽性檢出率的制片技術(shù)探討[J].中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志，2012，21（4）：426.