大腸癌中Livin 和Survivin 的表達(dá)及相關(guān)性研究

鄭國文

(四川省樂山市中區(qū)人民醫(yī)院病理科，四川 樂山614000)

Livin 是近年新發(fā)現(xiàn)的IAP(inhibitor of apoptosis protein)家族中的一種細(xì)胞凋亡抑制基因，具有抗凋亡作用，其表達(dá)陽性與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移和預(yù)后密切相關(guān)［1］。Survivin 是IAP 家族的一個(gè)新成員，有學(xué)者研究也證實(shí)Survivin 在腫瘤發(fā)病中起重要作用，與凋亡指數(shù)呈負(fù)相關(guān)［2］。本研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP 法檢測40 例大腸癌組織Livin 和Survivin 的表達(dá)情況，進(jìn)一步探討Livin 和Survivin 的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2011 年8 月至2012 年8 月就診于我院的40 例經(jīng)病理檢查證實(shí)的大腸癌患者的癌組織及其癌旁組織標(biāo)本。標(biāo)本的獲取均經(jīng)患者知情同意，并簽署知情同意書。其中高、中分化28例，低分化l2 例;A-B 期16 例，C-D 期24 例;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移25 例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移15 例。

1.2 方法 采用免疫組化SP 法檢測組織中Livin和Survivin 蛋白的表達(dá)。SP 試劑盒及兔抗人Livin多克隆抗體、羊抗人Survivin 多克隆抗體購于北京中杉生物技術(shù)有限公司。實(shí)驗(yàn)過程按照產(chǎn)品說明書進(jìn)行，以PBS 緩沖液分別代替一抗作為陰性對照。

1.3 結(jié)果判定 嚴(yán)格按照試劑盒說明書的診斷標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。Livin、Survivin 陽性細(xì)胞是指細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃(褐)色顆粒。采用半定量積分法判定免疫組化染色結(jié)果:細(xì)胞無著色或陽性細(xì)胞的比例＜5%為陰性(-)，陽性細(xì)胞比例5% ～25%為弱陽性(+);陽性細(xì)胞比例～50%為中等陽性(++);陽性細(xì)胞比例＞50%為強(qiáng)陽性(+++)。由兩名富有經(jīng)驗(yàn)的擁有高級職稱的病理醫(yī)師獨(dú)立對免疫組化染色結(jié)果分別進(jìn)行評分［3］。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 12.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。率的比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Livin 和Survivin 在大腸癌組織及癌旁組織中的表達(dá) 大腸癌組織中Livin 蛋白的陽性表達(dá)率為75%，Survivin 蛋白的陽性表達(dá)率為70%，均高于癌旁組織的陽性表達(dá)率(分別為20.0%和2.5%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見圖1、圖2、表1。

2.2 Livin 和Survivin 在大腸癌組織中的表達(dá)及相關(guān)性分析 40 例大腸癌組織中，Livin 和Survivin蛋白表達(dá)均為陽性共26 例，均為陰性8 例。Livin和Survivin 在大腸癌組織中的表達(dá)有關(guān)(χ2=15.87，P＜0.05)，見表2。

圖1 Livin 蛋白表達(dá)(SP×100) a:在大腸癌旁組織中的表達(dá)(-);b:在大腸癌組織中的表達(dá)(+)

圖2 Survivin 表達(dá)(SP×100) a:在大腸癌組織中的表達(dá)(-);b:在大腸癌組織中的表達(dá)(+)

表1 Livin 和Survivin 在大腸癌及癌旁組織中的表達(dá)

表2 Livin 和Survivin 在大腸癌組織中的表達(dá)及相關(guān)性分析

3 討論

大腸癌是最常見的惡性腫瘤之一，近年來發(fā)病率呈逐年上升趨勢。對大腸癌的發(fā)生、發(fā)展分子作用機(jī)制的研究將有助于大腸癌的早期診斷、早期治療及預(yù)后判斷［4］。大腸癌的發(fā)病除了與飲食因素有關(guān)外，還與抑癌基因失活、癌基因突變、細(xì)胞凋亡周期失控、細(xì)胞增殖異常關(guān)系密切。

Livin 基因是一種新發(fā)現(xiàn)抗凋亡作用最強(qiáng)的凋亡抑制基因，大量的Livin 蛋白出現(xiàn)抑制了細(xì)胞的凋亡，延長了腫瘤細(xì)胞的生存期，增加了細(xì)胞發(fā)生基因突變的機(jī)會，從而有利于大腸癌的發(fā)生［5］。本研究中，大腸癌組織中存在Livin 過度表達(dá)(75%)，而正常組織中不表達(dá)或低表達(dá)(20%)，說明在大腸癌發(fā)生過程中Livin 的異常表達(dá)可能參與了大腸癌的發(fā)生，且對于大腸癌的惡性程度和預(yù)后的預(yù)測有一定的價(jià)值。

研究證實(shí)，Survivin 蛋白過表達(dá)是大腸癌發(fā)生中的一種獨(dú)立事件［6］。本研究結(jié)果顯示，Survivin 蛋白在大腸癌中表達(dá)的陽性表達(dá)率為70%，Survivin在正常組織中的陽性表達(dá)率2.5%，Survivin 在大腸癌中的高表達(dá)與其發(fā)生、發(fā)展、分期和轉(zhuǎn)移等相關(guān)［9］，這種高表達(dá)的差異使它有望成為新的腫瘤標(biāo)志物和預(yù)后因子，其表達(dá)水平與治療的敏感性相關(guān)，提示它是一個(gè)潛在的治療靶點(diǎn)［7］。

本研究中表2 結(jié)果顯示，Livin 和Survivin 蛋白在大腸癌組織的表達(dá)呈正相關(guān)，說明Livin 和Survivin 在大腸癌中具有協(xié)同作用［8］，聯(lián)合檢測Livin及Survivin 蛋白具有重要的臨床意義。

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