高笑敏 施華琴

浙江奧托康制藥集團股份有限公司，浙江金華 321053

甘草酸二銨注射液工藝處方的研究

高笑敏 施華琴

浙江奧托康制藥集團股份有限公司，浙江金華 321053

目的 探討甘草酸二銨注射液的處方篩選、制備工藝、影響因素試驗，確定產(chǎn)品的最佳處方和工藝。 方法通過對不同pH值、藥用炭用量的篩選確定最佳處方，并對所生產(chǎn)的產(chǎn)品進行影響因素試驗。 結(jié)果 確定甘草酸二銨注射液在pH為6.5～7.5，活性炭用量為0.1%，按此工藝生產(chǎn)的產(chǎn)品對光照和高溫均比較穩(wěn)定。 結(jié)論 本研究研制的甘草酸二銨注射液的工藝處方合理，質(zhì)量穩(wěn)定。

甘草酸二銨注射液；處方篩選；制備工藝；影響因素

甘草酸二銨是從中藥甘草中高效分離，經(jīng)差向異構(gòu)篩選出的α體的甘草酸二銨鹽，具有較強的抗炎作用。本品能降低實驗動物因四氯化碳、D-氨基半乳糖等毒物引起的血清丙氨酸氨基酸轉(zhuǎn)移酶（ALT）和門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）升高，明顯減輕D-氨基半乳糖造成的肝臟損傷，并能增強肝臟的解毒功能[1]。有臨床研究報道，甘草酸二銨不僅具有良好的改善肝功能作用，還具有抗肝纖維化作用[2]；對丙型肝炎也具有和乙型肝炎同樣的療效[3]。可明顯降低酒精性脂肪肝患者的ALT和AST[4]，對肝纖維化有明顯的改善作用[5]，對全身化療引起的肝功能異常有預(yù)防作用[6]。本研究從藥品的處方篩選和制備工藝兩個方面著手，研制開發(fā)甘草酸二銨注射液。

1 材料與方法

1.1 主要儀器與試藥

PHS-3C酸度計；島津 LC-20AT（230 V）高效液相；紫外分光光度計PU1901；煙酰胺對照品來源：中國藥品生物制品檢定所（批號：100115-200302）；配制罐；DGA6/1-20安瓿洗灌封聯(lián)動線；甘草酸二銨：西安富捷生物技術(shù)發(fā)展公司（批號：040112）；無水碳酸鈉：湖南爾康制藥有限公司；藥用炭：江西懷玉山活性碳分公司。

1.2 方法

1.2.1 對不同pH進行穩(wěn)定性篩選

已上市產(chǎn)品甘草酸二銨注射液注射液（50 mg∶10 ml）的pH值為7.04，以上原輔料按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[7-9]檢驗合格，稱取甘草酸二銨樣品5 g，加注射用水至1000 ml；配制成每10毫升含甘草酸二銨50 mg的溶液，測得溶液的pH值為4.84，含量為99.7%；將該溶液分成6份，每份約150 ml，分別用10%碳酸鈉溶液調(diào)節(jié) pH 值至 5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0，分別將上述 6種不同pH值的溶液灌封裝于安瓿中，分別放在水浴鍋上加熱，控制溫度為（80±5）℃，24 h 后測定含量和顏色，與零時比較。

1.2.2 藥用炭用量的篩選

稱取處方量的甘草酸二銨10 g，加入2000 ml約60℃注射用水，攪拌使溶解，加入10%碳酸鈉溶液調(diào)節(jié)pH至6.5，測定含量為99.2%。然后將藥液分成4等份（每份 500 ml），各加入 0.05%、0.1%、0.2%、0.5%（w/v）的藥用炭，加熱微沸條件下攪拌吸附30 min，過濾脫炭使藥液澄明，考察藥液澄明度及活性炭對藥物含量[10]的影響。

1.2.3制備樣品的質(zhì)量研究

根據(jù)篩選所得的處方制備樣品進行影響因素試驗[9]，從光照、高溫（40℃和 60℃）等方面考察，考查項目：性狀、pH值、顏色、有關(guān)物質(zhì)、澄明度、含量，研究產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。

1.2.3.1 光照試驗 取上述樣品，除去外包裝，直接置4500 Lx照度下照射，分別在第5天和第10天時取樣并與0 d樣品測定數(shù)據(jù)進行比較。

1.2.3.2 高溫試驗 取上述樣品，分別放置于40℃和60℃的電熱恒溫箱中，分別在第5天和第10天時取樣并與0 d樣品測定數(shù)據(jù)進行比較。

2 結(jié)果

2.1 不同pH值溶液穩(wěn)定性試驗

溶液pH值在6.0～7.5范圍內(nèi)含量和顏色變化相對穩(wěn)定，優(yōu)化選擇為 6.5～7.5（表 1）。

表1 不同pH值溶液穩(wěn)定性試驗的結(jié)果

2.2 藥用炭用量的篩選

藥用炭對甘草酸二銨有吸附作用，用量為0.1%～0.2%（w/v）時，可同時滿足甘草酸二銨注射液澄明度和含量的質(zhì)量要求（表2）。

表2 藥用炭不同用量對藥物澄明度及含量的影響（w/v）

2.3 研究所得的處方工藝

根據(jù)表1、表2的研究結(jié)果，優(yōu)化確定中間體pH值控制在6.5～7.5，活性炭的用量為0.1%（w/v）的甘草酸二銨注射液處方如下：稱取甘草酸二銨50 g，先加入全量的20%注射用水溶解（即加入2000 ml注射用水），微熱條件下攪拌使溶解，再加入注射用水至全量（10 L），用 10%Na2CO3溶液調(diào)節(jié) pH 至 6.5～7.5，加 0.1%（w/v）藥用炭，微沸攪拌30 min，過濾脫炭。至澄明度合格后，充氮、灌封，于100℃、30 min流通蒸汽滅菌。

2.4 影響因素光照試驗

光照對產(chǎn)品的pH、含量沒有影響，但有關(guān)物質(zhì)的量略有增加，產(chǎn)品在光照條件下質(zhì)量穩(wěn)定（表3）。

表3 影響因素光照試驗的結(jié)果

2.5 影響因素高溫（40℃）試驗

高溫40℃試驗，產(chǎn)品的pH、含量沒有影響，但有關(guān)物質(zhì)的量略有增加，產(chǎn)品的質(zhì)量在高溫40℃條件下質(zhì)量穩(wěn)定（表4）。

表4 影響因素高溫（40℃）試驗的結(jié)果

2.6 影響因素高溫（60℃）試驗

高溫40℃試驗，產(chǎn)品的pH沒有影響，但含量略有下降，有關(guān)物質(zhì)的量略有增加。產(chǎn)品的質(zhì)量在高溫60℃條件下質(zhì)量不是很穩(wěn)定（表5）。

表5 影響因素高溫（60℃）試驗的結(jié)果

3 討論

對所生產(chǎn)的產(chǎn)品進行影響因素試驗：光照試驗，本品經(jīng)4500 Lx光照條件照射下，其結(jié)果與0 d數(shù)據(jù)相比，各項均無明顯變化，表明本品對光穩(wěn)定；高溫試驗：40℃和60℃條件下放置5～10 d，各項主要指標(biāo)與0 d比較，除60℃10 d條件下有關(guān)物質(zhì)有所增加，含量有所下降外，其他各項指標(biāo)均無明顯變化，表明研究的工藝處方生產(chǎn)的樣品在光照和40℃條件下穩(wěn)定。

建議產(chǎn)品的保存條件為：遮光，密閉，陰涼保存。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典臨床用藥須知：化學(xué)藥和生物制品卷[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2005：308-309.

[2]許偉華，劉斌，林森，等.甘草酸二銨治療肝纖維化的動態(tài)觀察[J].中國新藥與臨床雜志，2003，22（6）：352-354.

[3]楊麗蓉，徐曉玉.甘利欣的藥理作用與臨床應(yīng)用[J].中國醫(yī)院用藥評價與分析，2003，3（3）：191-192.

[4]趙蓉，呂凌.甘草酸二銨藥理研究和臨床應(yīng)用進展[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2008，4（3）：31-36.

[5]歐強，陳良，譚德明，等.甘草酸二銨抗大鼠免疫性肝纖維化作用研究[J].中成藥，2006，（7）：1046-1047.

[6]林雯，林英城，林懿，等.甘草酸二銨注射液預(yù)防化療引起的肝功能異常的效果[J].汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2004，17（2）：78-79.

[7]WS1-（X-460）-2003Z.甘草酸二銨質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[S].

[8]GB/T 639-2008.無水碳酸鈉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[S].

[9]國家藥典委員會.中國藥典（二部）[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005.

[10]WS1-（X-407）-2003Z.甘草酸二銨注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[S].

Research of the preparation process of diammonium glycyrrhizinate injection

GAO Xiao-min SHI Hua-qin
Zhejiang Otto Kang Pharmaceutical Group Co.,LTD.,Jinhua 321053,China

ObjectiveTo explore the optimum formulation and preparation process of diammonium glycyrrhizinate injection by studying prescription screening,preparation technology and impact factors.Methods To determine the best prescription according to different pH and carbo activatus dosage screening,and investigate the stability of the product through influence factor experiments.ResultsWhen the pH was adjusted between 6.5-7.5,and 0.1%activated carbon was used,the products prepared using confirmed formulation and preparation process proved good stability under light and heat.ConclusionThis study developed two ammonium glycyrrhetate injection process prescription is reasonable,the quality is stable.

Diammonium glycyrrhizinate injection;Prescription screening;Preparation process;Influence factor

R932

A

1674-4721（2014）04（c）-0130-03

2014-01-10 本文編輯：林利利）