刁大為
(黑龍江澳利達(dá)奈德制藥有限公司·150001)
近年來(lái)樟芝的知名度隨著研究的不斷深入,相關(guān)各種產(chǎn)品的知名度也越來(lái)越高。尤其其藥效更是被得到肯定,民間流傳在治療肝癌和子宮頸癌上療效顯著,也可用以治療急性腹痛、抗過(guò)敏等。
因樟芝能有效治療肝病及其它方面(如:抗腫瘤、抗病毒、抗過(guò)敏、降血脂、降血糖)的神奇療效消息傳出后,也因而導(dǎo)致樟芝的寄主——牛樟樹(shù)遭到了大量的砍伐與盜采,在物以稀為貴的預(yù)期心理作用之下,天然樟芝的價(jià)格也日漸地水漲船高,目前被稱(chēng)為是全世界市上最昂貴的野生真菌。
本研究通過(guò)用酒浸提法,提取出樟芝多糖有效成分,得到藥用價(jià)值很高的一種保健酒。
人工培植的樟芝(黑龍江澳利達(dá)藥物研究所研制生產(chǎn))、清香型白酒(市售),苯酚、葡萄糖和濃硫酸,均為分析純。
BPS-221型電子天平;PHS-3C數(shù)字酸度計(jì);TU-19紫外可見(jiàn)分光光度計(jì);HH-S型保溫水浴鍋。
樟芝→粉碎→稱(chēng)量→酒浸→過(guò)濾→濾液
經(jīng)粉碎、稱(chēng)量后的樟芝,以酒基濃度、浸提時(shí)間和浸提溫度為因素,每個(gè)因素設(shè)計(jì)三個(gè)水平,采用L9(34)進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn),用TU-19紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)對(duì)所得9組提取液與苯酚-硫酸配制的葡萄糖空白樣作比色,得到吸光度值,計(jì)算其多糖含量,從而確定最佳浸提工藝[2]。
樟芝多糖提取正交試驗(yàn)因素與水平見(jiàn)表1。
表1 樟芝多糖提取正交試驗(yàn)因素與水平
取樟芝,洗凈,去雜,粉碎至20目篩的樟芝粉,以1:8的比例置于酒基中在密閉浸提容器內(nèi)進(jìn)行充分振蕩,在18~32℃中保持15~60天。抽提液經(jīng)澄清過(guò)濾裝入密閉容器中保存。
2.4.1 多糖的測(cè)定方法。多糖的測(cè)定采用苯酚—硫酸法[3]。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密稱(chēng)取干燥至恒質(zhì)量的葡萄糖50mg,置于1000mL容量瓶中,配置成50μg/mL的葡萄糖溶液。精密吸取葡萄糖液0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mL于試管中,加水至2mL。加入0.5%苯酚1mL,搖勻,迅速加入硫酸5mL,搖勻后放置10min。置25℃水浴15min,取出冷卻至室溫。以第1管為空白,于486nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光值。葡萄糖吸光度回歸方程為:
Y=5.3X-0.0097,R2=0.9996。
式中: Y—在486波長(zhǎng)處測(cè)定的葡萄糖吸光度;
X—葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度,μg/mL。
樟芝浸提液多糖的測(cè)定 取適量樣品溶于定量水中,按(1)測(cè)定其吸光度,并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算多糖含量。
根據(jù)樟芝多糖提取正交試驗(yàn)因素與水平,利用L9(34)正交實(shí)驗(yàn)確定最佳浸提條件,樟芝多糖提取正交實(shí)驗(yàn)見(jiàn)表2。
表2 樟芝多糖提取正交實(shí)驗(yàn)
由表2可見(jiàn),根據(jù)級(jí)差值R的大小可以判斷各因素的主次順序?yàn)镃>A>B。最佳浸提條件為A3B2C3,即酒基濃度48,浸提時(shí)間30天,浸提溫度32℃。
3.2.1 感官指標(biāo)。色澤:呈淡黃色
氣味:應(yīng)具有本品特有滋氣味,無(wú)異味
外觀狀態(tài):澄清透明液體,久置充許有少量沉淀
雜質(zhì):無(wú)
3.3.2 理化指標(biāo)。酒精度,20℃,≥48%(vol);多糖,≥3.0g/100mL;甲醇,≤0.04g/100mL;鉛(Pb),≤1.0mg/L;錳(Mn),≤2.0mg/L 。
1)通過(guò)試驗(yàn)及分析可以得出,樟芝多糖的最佳提取條件為酒基濃度48度,浸提時(shí)間30天,浸提溫度32 ℃。
2)所得產(chǎn)品為淺棕黃色,甘甜適口,無(wú)異味、無(wú)沉淀。
3)樟芝保健酒采用上述工藝條件,方法簡(jiǎn)單可行,目前樟芝保健酒正在實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。
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