張雪瑩徐娜左淑波

1.吉林省腫瘤醫(yī)院內(nèi)三科,吉林長春130012；2.吉林省腫瘤醫(yī)院內(nèi)五科,吉林長春130012

淋巴瘤化療后行DC治療的療效分析

張雪瑩1徐娜2左淑波2

1.吉林省腫瘤醫(yī)院內(nèi)三科,吉林長春130012；2.吉林省腫瘤醫(yī)院內(nèi)五科,吉林長春130012

目的研究采取樹突狀細(xì)胞(DC)對施行淋巴瘤化療的患者臨床療效分析。方法選取35例患有淋巴瘤的患者,經(jīng)過化療完全緩解,把培養(yǎng)后的樹突狀細(xì)胞經(jīng)過淋巴結(jié)部位皮下注射,觀察注射前后的治療效果。結(jié)果經(jīng)過注射DC的35例患者,在治療過程中未見明顯副反應(yīng),耐受性好,到目前為止沒有發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)的案例。結(jié)論采取樹突狀細(xì)胞對化療后的淋巴瘤患者療效確切,副作用少,安全有效,是一種行之有效的免疫治療方法,具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值,值得臨床推廣。

淋巴瘤；化療；DC治療；療效分析

淋巴瘤屬于造血系統(tǒng)的惡性腫瘤,主要分為兩類,即非霍奇金淋巴瘤及霍奇金淋巴瘤[1]。主要臨床癥狀為淋巴結(jié)及脾臟的腫大,病灶處可涉及相關(guān)聯(lián)器官,并可產(chǎn)生發(fā)熱堯出汗機(jī)機(jī)體消瘦等癥狀[2]。采取放化療的措施可以一定程度上消滅腫瘤,因?yàn)榱馨土鰧ζ漭^為敏感,而且化療也是目前治療此類疾病的基本措施。一般的常規(guī)化療方法能夠使一半以上患有霍奇金淋巴瘤的患者得到治愈?；蛘咴谳^長時(shí)間內(nèi)健康生活,也可對患有霍奇金淋巴瘤的患者有一般的治愈機(jī)會(huì)[3]。此種方法治療效果雖然較為顯著,但是由于化療藥物的殘留對機(jī)體的傷害較大,治療后復(fù)發(fā)也是臨床常見問題。因此,臨床上研究采取免疫治療的方法,來延長患者的復(fù)發(fā)期,盡最大限度延長患者的無病期,這種方法也是當(dāng)今社會(huì)研究的熱點(diǎn)[4]。樹突狀細(xì)胞是目前被知曉的功能最強(qiáng)的抗原提呈細(xì)胞,其特點(diǎn)是在成熟期會(huì)伸出一些樹突狀或是偽足樣突起,可以誘導(dǎo)抗原特異性免疫應(yīng)答反應(yīng)。經(jīng)過臨床研究DC與腫瘤有著緊密的關(guān)系,可以作為治療腫瘤的有效手段,而且可以協(xié)同增加抗腫瘤的療效。現(xiàn)將2012年8月要2013年8月期間該組收治的35名患者的報(bào)告總結(jié)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該組選取在該院接受治療的35名淋巴腫瘤患者。其中屬于霍奇金淋巴瘤的患者15名,非霍奇金淋巴瘤患者20名。19名男性,16名女性,年齡20~66歲之間,平均年齡是43歲,經(jīng)過化療均完全緩解,不選擇患有淋巴瘤初期的患者,存在難治性的及復(fù)發(fā)性的淋巴瘤患者,年齡在適宜范圍內(nèi),并且患者不存在嚴(yán)重的實(shí)質(zhì)性器官的損害及功能異常的患者。通過診斷均符合葉血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)曳,可以進(jìn)行后續(xù)治療。

1.2 樹突狀細(xì)胞的制備

抽取35名淋巴腫瘤患者的外周血液20 mL,進(jìn)行離心分離,放置于含有5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中放置2 h,37益保存。反復(fù)洗去不需要的貼壁細(xì)胞。隨后采取在細(xì)胞因子GM-CSF及IL-4作用下,對細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),需要一個(gè)星期的時(shí)間,使細(xì)胞分化成熟,采取淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)來證實(shí)經(jīng)過培養(yǎng)后的細(xì)胞是否為完好的樹突狀細(xì)胞,并且具有和人體內(nèi)成熟的樹突狀細(xì)胞功能相同的性質(zhì)[5]。

1.3 樹突狀細(xì)胞治療方案

將培養(yǎng)好的樹突狀細(xì)胞,采取淺表淋巴結(jié)皮下注射的方式,淋巴瘤患者每次注射樹突狀細(xì)胞106,每2~3 d注射一次,總共需要注射5次,治療結(jié)束后,根據(jù)葉血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)曳對淋巴瘤患者進(jìn)行療效評估[6]。

1.4 療效評價(jià)

一般參考葉血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)曳來評估判斷,是由張之南教授主編。根據(jù)其內(nèi)容療效評價(jià)可分為完全緩解堯部分緩解堯未緩解及進(jìn)展四種類型,并根據(jù)相應(yīng)的影像學(xué)診斷指標(biāo)進(jìn)行判斷。相關(guān)醫(yī)護(hù)人員以隨訪及電話訪問的方式對患者進(jìn)行跟蹤記錄[7]。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析和處理,其中,計(jì)數(shù)資料采用字2檢驗(yàn),用n表示。

2 結(jié)果

2.1 不良反應(yīng)

經(jīng)過皮下注射樹突狀細(xì)胞的患者沒有出現(xiàn)全身性的不良反應(yīng),只有少數(shù)的6名患者出現(xiàn)不同程度的皮膚紅腫的現(xiàn)象,有2名患者出現(xiàn)局部皮膚瘙癢的癥狀,以上癥狀不要做任何臨床處理,患者可以自行恢復(fù),在3 d左右癥狀可以減退消失。其中也有3名患者發(fā)生低熱的癥狀,兩天后患者退熱恢復(fù)到正常體溫。其他患者沒有發(fā)生臟器衰竭等嚴(yán)重不良反應(yīng),也沒有發(fā)現(xiàn)明顯的精神狀態(tài)方面的異常。接受樹突狀細(xì)胞治療前的患者均進(jìn)行了血常規(guī)及肝腎功能的檢查,治療前后患者狀況均處于正常水品,沒有發(fā)現(xiàn)異?，F(xiàn)象。

2.2 影像學(xué)檢查及臨床癥狀

進(jìn)行樹突狀細(xì)胞治療后,需要進(jìn)行CT及ECT等影像學(xué)的檢查,通過隨訪(采用電話隨訪堯上門隨訪及囑患者定期復(fù)查等方式)一年的時(shí)間,截止到2014年8月,所有患者沒有出現(xiàn)病情復(fù)發(fā),或是病情進(jìn)一步發(fā)展的狀況。所有患者在治療前后,沒有嚴(yán)重的不良反應(yīng)和臨床不適癥狀,但是有體重增加的現(xiàn)象。

2.3 療效評價(jià)

經(jīng)過注射DC的35例患者,在治療過程中未見明顯副反應(yīng),耐受性好,到目前為止沒有發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)的案例。

3 討論

淋巴瘤屬惡性腫瘤,其來源于人體的淋巴結(jié)以及淋巴組織,并可歸為兩類即霍奇金病和非霍奇金病。臨床上通過相關(guān)組織學(xué)方面的檢查,患有淋巴瘤的患者的淋巴細(xì)胞以及相關(guān)組織可以觀察到具有腫瘤特點(diǎn)的增生[8]。其中以無痛性淋巴結(jié)腫大為特征的患者在臨床上比較常見,還可觀察到脾臟變腫變大,其表面光滑,質(zhì)地堅(jiān)韌,用手觸摸有種乒乓球的感覺,其硬度和鼻尖的硬度相似,到了淋巴瘤晚期患者會(huì)出現(xiàn)發(fā)熱堯貧血等較嚴(yán)重不良反應(yīng)[9]?；颊叩念i部及鎖骨上的淋巴結(jié)腫大在臨床上也比較常見,但是患者若出現(xiàn)深度的淋巴結(jié)腫大,諸如發(fā)生在縱膈及腹腔盆腔淋巴結(jié)腫大,這些部位發(fā)生病癥不是十分明顯,癥狀比較隱匿,往往在發(fā)現(xiàn)時(shí)患者的淋巴結(jié)腫大的已經(jīng)相對明顯了[10]。

通過對患者進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)的檢查,可發(fā)現(xiàn)其細(xì)胞形態(tài)的多樣性,因?yàn)橛捎诨颊叩牟∽兾恢眉胺秶煌?臨床所表現(xiàn)的癥狀不盡相同?；疾〕跏伎赡馨l(fā)生在淋巴結(jié),也有發(fā)生在淋巴組織周圍的可能。如發(fā)生在扁桃體堯骨骼及脾臟等部位。對抗這種惡性腫瘤機(jī)體采取對抗腫瘤的細(xì)胞免疫過程,所謂細(xì)胞免疫是指身體中的T細(xì)胞,包括CD4+及CD8+,憑借淋巴免疫因子發(fā)揮相應(yīng)的免疫應(yīng)答作用。其主要免疫過程為在T細(xì)胞接受刺激后進(jìn)行增殖堯分化過程,最終演變成可以致敏的T細(xì)胞,也稱之為效應(yīng)T細(xì)胞。這種細(xì)胞的作用是使得一樣的抗原第二次進(jìn)入人身體中時(shí),進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),就可以激發(fā)效應(yīng)T細(xì)胞對抗原造成直接的損傷,并且受到刺激的致敏T細(xì)胞釋放的物質(zhì)也可起到殺傷作用,產(chǎn)生協(xié)同損傷的作用。

在細(xì)胞免疫中,抗原提呈細(xì)胞,簡稱APC,是在免疫反應(yīng)中起到關(guān)鍵的作用。它將蛋白類抗原經(jīng)過處理變成多肽類物質(zhì),這種多肽類物質(zhì)可以和MHC相結(jié)合,并將其轉(zhuǎn)到APC的表面上,激活活化后演變成TCR信號。而進(jìn)入人體的抗原可以與T淋巴細(xì)胞的表面相關(guān)的受體接觸,觸發(fā)產(chǎn)生第二信號。就這樣在兩種信號刺激下,T淋巴細(xì)胞被激活后進(jìn)而轉(zhuǎn)變成淋巴母細(xì)胞,其中一部分細(xì)胞進(jìn)行快速的增殖和分化變成可以致敏的淋巴細(xì)胞,而另一部分再分化的過程中停止下來,不再進(jìn)行分化,最終變成記憶細(xì)胞,但是這兩類細(xì)胞具有不同的殺傷能力。

而樹突狀細(xì)胞是目前人類所知的,功能最為強(qiáng)大的抗原提呈細(xì)胞,是于1973年由加拿大學(xué)者率先發(fā)現(xiàn)的,由于此類細(xì)胞在成熟時(shí)可見一些樹突狀的足或是偽足,因此被稱之為樹突狀細(xì)胞。此類細(xì)胞在人體內(nèi)大多處于非成熟狀態(tài),可以表達(dá)低水平的刺激及粘附因子,其激發(fā)體外相同種類復(fù)合的淋巴細(xì)胞的增殖能力比較低。在體內(nèi)這些尚未成熟的DC具有很強(qiáng)的抗原吞噬能力,經(jīng)過在體外處理或是在一些條件下激發(fā)時(shí)就可以變成成熟的樹突狀細(xì)胞,表達(dá)成為刺激因子及粘附因子。這些成熟的樹突狀細(xì)胞經(jīng)過機(jī)體外周組織進(jìn)到機(jī)體次級淋巴器官并和T細(xì)胞發(fā)生免疫過程。DC是機(jī)體專職的抗原呈遞細(xì)胞,其主要作用過程是與體內(nèi)腫瘤抗原結(jié)合,并且對相應(yīng)的抗原進(jìn)行加工,加工后將有關(guān)信息傳遞給淋巴細(xì)胞,刺激抗腫瘤細(xì)胞促使其發(fā)生抗腫瘤細(xì)胞的特異性免疫反應(yīng)。由于患者機(jī)體本身受到腫瘤釋放的抑制因子的妨礙,機(jī)體內(nèi)樹突狀細(xì)胞大幅度減少,而且功能上也存在一定的問題,這使得機(jī)體的免疫作用對腫瘤細(xì)胞起不到作用,由以上結(jié)果可知,經(jīng)過注射DC的35例患者,在治療過程中未見明顯副反應(yīng),耐受性好,到目前為止沒有發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)的案例,值得在臨床中推廣,同時(shí),此臨床結(jié)果與張璇等人[7]在關(guān)于共表達(dá)CD40L和IL-2的腺病毒對樹突狀細(xì)胞成熟和IL-12產(chǎn)生的影響一文中所表達(dá)的意義相一致,具有臨床意義。因此通過體外進(jìn)行誘導(dǎo)堯培養(yǎng)樹突狀細(xì)胞進(jìn)行相關(guān)治療是很重要的,而且要到達(dá)樹突狀細(xì)胞的治療劑量也是一大難題,迄今為止對樹突狀細(xì)胞的研究集中在體外研究階段,但是其在體內(nèi)的具體作用過程和相關(guān)功能尚不十分清楚。但是隨著相關(guān)技術(shù)的成熟和發(fā)展,可以通過體外擴(kuò)增技術(shù)制備大量的樹突狀細(xì)胞,這些擴(kuò)增后的細(xì)胞可以輸入到患者的身體內(nèi),并且效果良好。通過體外擴(kuò)增培養(yǎng)的樹突狀細(xì)胞對淋巴瘤細(xì)胞具有特異性殺傷能力,顯著性提高對患者的治療效果。目前為止。應(yīng)用樹突狀細(xì)胞進(jìn)行臨床治療還尚短,應(yīng)用時(shí)間不長,還不能進(jìn)行對其治療效果的長期跟蹤與療效測評。但可以肯定的是應(yīng)用樹突狀細(xì)胞進(jìn)行淋巴瘤免疫治療是一種行之有效,應(yīng)用前景十分廣闊的治療手段。為此,在對腫瘤患者進(jìn)行治療時(shí),可以把特異性免疫治療手段和基因治療技術(shù)相結(jié)合,共同提高對患者的治療效果,為患者提供治療效率高,副作用小的腫瘤治療措施。所以,樹突狀細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)后對化療后的淋巴腫瘤患者提供了很好的治療途徑,值得相關(guān)工作者進(jìn)行深入的研究。

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R733.1

A

1672-5654（2014）12（a）-0170-02

院：2014-09-03)

張雪瑩(1980.4-),女,吉林長春人,碩士,主治醫(yī)師,研究方向院生物治療。

左淑波(1979.4-),女,吉林長春人,碩士,主治醫(yī)生,研究方向院淋巴血液,郵箱院1375616493@qq.com。