黏蛋白1在大腸癌患者血清中的表達(dá)水平及臨床意義

王曉磊++++++邢燕來++++++王新濤++++++段文飛++++++郭偉

[摘要] 目的 探討大腸癌患者血清中黏蛋白1的表達(dá)及臨床意義。 方法 應(yīng)用放射免疫法檢測 40例大腸癌患者術(shù)前血清MUC1的表達(dá)水平，并與20例健康體檢者對照。 結(jié)果 大腸癌患者血清MUC1的表達(dá)水平明顯高于對照組。大腸癌中，侵及漿膜外、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Dukes C+D期、低分化組的表達(dá)顯著高于未侵及漿膜外、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Dukes A+B期、中高分化組（P<0.05）；但與患者的性別、年齡、腫瘤大小均無明顯關(guān)系（P>0.05）。 結(jié)論 血清MUC1表達(dá)與大腸癌生物學(xué)行為有關(guān)，檢測血清MUC1的表達(dá)水平對于大腸癌的診斷、惡性程度及預(yù)后的判斷均有一定價值。

[關(guān)鍵詞] 血清MUC1；大腸癌； 放射免疫法

[中圖分類號] R735.3 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B [文章編號] 1673-9701（2014）01-0155-03

大腸癌是常見的惡性腫瘤之一，多種基因相互作用及其調(diào)控蛋白的差異表達(dá)包含在其發(fā)生、發(fā)展及侵襲轉(zhuǎn)移的整個過程中；其中就包括黏蛋白1（MUC1）；MUC1是黏蛋白家族成員之一，研究表明，MUC1與腫瘤相關(guān)；本課題應(yīng)用放射免疫法對40例大腸癌患者術(shù)前及20例健康體檢者的血清標(biāo)本進(jìn)行MUC1表達(dá)水平的檢測；以揭示MUC1在大腸癌血清中的表達(dá)規(guī)律及其可能預(yù)示的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源

收集2011年8月～2013年1月在河南大學(xué)第一附屬醫(yī)院普通外科手術(shù)治療的大腸癌的術(shù)前血清標(biāo)本40例，所有的患者術(shù)前均未接受放療和化療，術(shù)后病理診斷均證實(shí)為結(jié)腸癌或直腸癌。

1.2 一般資料

男23例，女17例；年齡：>60歲21例，≤ 60歲19例；結(jié)腸22例；直腸18例；直徑>4 cm 18例，≤ 4 cm 22例；未侵及漿膜外22例，侵及漿膜外18例；高分化3例，中分化27例，低分化10例；Dukes分期：A期6例，B期17例，C期13例，D期4例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者15例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者25例；有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者4例，無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者36例。選擇20例健康體檢者作為對照組。

1.3 檢測方法

對照組血液標(biāo)本晨起空腹采集；實(shí)驗(yàn)組的血液標(biāo)本均于術(shù)前晨起空腹時采集外周靜脈血3 mL；自然凝固后， 3000 r/min離心， 取上清，分離后置-20℃凍存待檢。采用放射免疫法檢測血清中MUC1的水平。試劑盒購自美國雅培制藥有限公司；檢測方法按照試劑盒的說明書進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示；組間的比較采用t檢驗(yàn)；P <0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

MUC1在大腸癌組織的表達(dá)（20.50±5.20）U/mL；明顯高于對照組（5.10±1.13）U/mL，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 MUC1在大腸癌中的表達(dá)與患者的性別、年齡、腫瘤大小、大體類型均無明顯相關(guān)（P>0.05）；MUC1在侵及漿膜外[（25.31±4.89）U/mL]、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移[（30.22±6.13）U/mL]、Dukes C+D期[（27.81±3.78）U/mL]、低分化組[（32.2±3.78）U/mL]的表達(dá)顯著高于未侵及漿膜外[（6.56±3.92）U/mL]、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移[（16.47±4.21）U/mL]、Dukes A+B期[（15.10±4.23）U/mL]、中高分化組[（16.60±5.33）U/mL]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。如表1。

表1 MUC1表達(dá)與大腸癌臨床病理特征的關(guān)系（x±s，n=40，U/mL）

3 討論

MUC1是黏蛋白家族中的一種I型跨膜蛋白，具有多種生理功能。本研究顯示大腸癌患者血清中MUC1的表達(dá)高于對照組（P<0.05），說明MUC1的高表達(dá)可能與大腸癌的發(fā)生有關(guān)。國外有研究表明[1]，MUC1在腺癌中表達(dá)增高。國內(nèi)周世廣等[2]應(yīng)用免疫組化方法檢測從正常大腸組織大腸腺瘤到大腸癌組織，MUC1的表達(dá)從弱到強(qiáng)；提示MUC1的高表達(dá)參與了大腸癌的發(fā)生。其相關(guān)的機(jī)制研究顯示[3]，MUC1-C端能在轉(zhuǎn)化細(xì)胞核內(nèi)結(jié)構(gòu)性地結(jié)合KLF4，通過與P53啟動子上的PE21元件結(jié)合；進(jìn)而抑制P53的轉(zhuǎn)錄功能。影響P53修復(fù)損傷的DNA功能，P53基因的失活可導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。還有研究[4]認(rèn)為，MUC1和β-連環(huán)蛋白、c-Src等癌蛋白相互作用導(dǎo)致細(xì)胞惡變。同時MUC1還可活化IKKbeta，胞漿中過量表達(dá)的MUC1可使IKKbeta-NF-kappaB信號通路持續(xù)激活[5]，促進(jìn)腫瘤發(fā)生。

本組實(shí)驗(yàn)中，低分化組的表達(dá)為（32.2±3.78）U/mL，高、中分化組的表達(dá)為（16.60±5.33）U/mL，差別有顯著性（P<0.05）；說明MUC1與大腸癌的惡性程度正相關(guān)。在侵襲深度方面，侵及漿膜外的表達(dá)[（25.31±4.89）U/mL]高于侵及漿膜內(nèi)者[（16.56±3.92）U/mL]；差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Dukes C+D期大腸癌組織中MUC1的表達(dá)為（27.81±3.78）U/mL，Dukes A+B期的MUC1的表達(dá)為（15.10±4.23）U/mL，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；表明隨著大腸癌臨床分期的進(jìn)展，MUC1表達(dá)逐漸升高，MUC1可能參與了大腸癌的進(jìn)展。伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者M(jìn)UC1的表達(dá)為（30.22±6.13）U/mL，高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者的（14.67±4.21）U/mL，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；表明MUC1可能參與了大腸癌的侵襲及轉(zhuǎn)移。有研究顯示[6]，MUC1在結(jié)直腸癌中的陽性表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，提示MUC1的高表達(dá)參與了結(jié)直腸癌的侵襲和轉(zhuǎn)移。還有研究表明[7]，MUC1通過激活TNF受體相關(guān)因子，抑制細(xì)胞凋亡；可誘導(dǎo)血管內(nèi)皮生長因子等的生成，促進(jìn)腫瘤血管形成和轉(zhuǎn)移。endprint

研究報道[8]，應(yīng)用免疫組化方法檢測MUC1在大腸癌中的表達(dá)，顯示MUC1的表達(dá)與結(jié)直腸癌的浸潤深度、Dukes分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移正相關(guān)，其表達(dá)上調(diào)參與結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展。認(rèn)為MUC1有望成為大腸癌的腫瘤標(biāo)志物之一，對預(yù)后判斷有重要意義。體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)[9]，MUC1上的TF抗原與重組Gal-3相結(jié)合，暴露出細(xì)胞黏附分子的結(jié)合部位，通過CD44H、E-選擇素等增加對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的黏附性，促進(jìn)癌細(xì)胞擴(kuò)散，認(rèn)為MUC1可能在腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移過程中起作用。Selvi等[10]研究發(fā)現(xiàn)，MUC1-C-Gal-3作為依賴MiR-322的調(diào)控環(huán)的一部分而發(fā)揮作用，而EGFR在調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的生長、修復(fù)、新生血管生成、侵襲轉(zhuǎn)移中具有重要的作用，故認(rèn)為MUC1可能在腫瘤的進(jìn)展過程中起作用。

本組資料顯示， MUC1在大腸癌中的表達(dá)與患者的性別、年齡、腫瘤的大小均無明顯關(guān)系，表明性別、年齡、腫瘤大小對MUC1的表達(dá)無明顯影響。也進(jìn)一步說明MUC1在促進(jìn)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移方面比促進(jìn)腫瘤發(fā)生方面起更大作用。但有一些實(shí)驗(yàn)表明[11]，結(jié)直腸癌細(xì)胞中MUC1表達(dá)與腫瘤惡性生物學(xué)行為之間無顯著相關(guān)性，雖然MUC1與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移有一定關(guān)系，但目前還不能把MUC1作為獨(dú)立的結(jié)直腸腫瘤標(biāo)志物。

總之，血清MUC1表達(dá)與大腸癌生物學(xué)行為有密切關(guān)系，檢測血清MUC1的表達(dá)水平對于大腸癌的診斷、惡性程度及預(yù)后的判斷均有一定價值，也為結(jié)腸癌的靶向治療提供新的思路[12，13]。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Finn OJ，Gantt KR，Lepisto AJ，et al. Importance of MUC1 and spontaneous mouse tumor models for understanding the immunobiology of human adenocarcinomas[J]. Immunol Res，2011，50（2-3）：261-268.

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[8] 李杰，郭衛(wèi)東，張惠潔. 黏蛋白MUC-1、MUC-2和MUC-3在大腸癌中的表達(dá)與臨床意義[J]. 內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)雜志，2011， 43（9）：1034-1037.

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[10] Selvi Ramasamy，Sekhar Duraisamy，Sergei Barbashov，et al. The MUC1 and galectin-3 oncoproteins function in a microRNA-dependent regulatory loop[J]. Molecular Cells，2007，27：992-1004.

[11] Inagaki Y，Xu H，Nakata M，et al. Clinicopathology of sialomucin：MUC1，particularly KL-6 mucin，in gastrointestinal hepatic and pancreatic cancers[J]. Biosci Trends，2009，3（6）：220-232.

[12] 杜敏，葛海燕，徐彬，等. 外源性MUC1、Survivin和Nanog基因啟動子在結(jié)腸癌干細(xì)胞中的表達(dá)活性[J]. 第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報，2012，33（10）：1082-1085.

[13] 周永，李杰恩. 黏蛋白與腫瘤轉(zhuǎn)移[J]. 醫(yī)學(xué)綜述，2000，6 （7）：325.

（收稿日期：2013-09-24）endprint

研究報道[8]，應(yīng)用免疫組化方法檢測MUC1在大腸癌中的表達(dá)，顯示MUC1的表達(dá)與結(jié)直腸癌的浸潤深度、Dukes分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移正相關(guān)，其表達(dá)上調(diào)參與結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展。認(rèn)為MUC1有望成為大腸癌的腫瘤標(biāo)志物之一，對預(yù)后判斷有重要意義。體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)[9]，MUC1上的TF抗原與重組Gal-3相結(jié)合，暴露出細(xì)胞黏附分子的結(jié)合部位，通過CD44H、E-選擇素等增加對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的黏附性，促進(jìn)癌細(xì)胞擴(kuò)散，認(rèn)為MUC1可能在腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移過程中起作用。Selvi等[10]研究發(fā)現(xiàn)，MUC1-C-Gal-3作為依賴MiR-322的調(diào)控環(huán)的一部分而發(fā)揮作用，而EGFR在調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的生長、修復(fù)、新生血管生成、侵襲轉(zhuǎn)移中具有重要的作用，故認(rèn)為MUC1可能在腫瘤的進(jìn)展過程中起作用。

本組資料顯示， MUC1在大腸癌中的表達(dá)與患者的性別、年齡、腫瘤的大小均無明顯關(guān)系，表明性別、年齡、腫瘤大小對MUC1的表達(dá)無明顯影響。也進(jìn)一步說明MUC1在促進(jìn)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移方面比促進(jìn)腫瘤發(fā)生方面起更大作用。但有一些實(shí)驗(yàn)表明[11]，結(jié)直腸癌細(xì)胞中MUC1表達(dá)與腫瘤惡性生物學(xué)行為之間無顯著相關(guān)性，雖然MUC1與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移有一定關(guān)系，但目前還不能把MUC1作為獨(dú)立的結(jié)直腸腫瘤標(biāo)志物。

總之，血清MUC1表達(dá)與大腸癌生物學(xué)行為有密切關(guān)系，檢測血清MUC1的表達(dá)水平對于大腸癌的診斷、惡性程度及預(yù)后的判斷均有一定價值，也為結(jié)腸癌的靶向治療提供新的思路[12，13]。

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研究報道[8]，應(yīng)用免疫組化方法檢測MUC1在大腸癌中的表達(dá)，顯示MUC1的表達(dá)與結(jié)直腸癌的浸潤深度、Dukes分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移正相關(guān)，其表達(dá)上調(diào)參與結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展。認(rèn)為MUC1有望成為大腸癌的腫瘤標(biāo)志物之一，對預(yù)后判斷有重要意義。體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)[9]，MUC1上的TF抗原與重組Gal-3相結(jié)合，暴露出細(xì)胞黏附分子的結(jié)合部位，通過CD44H、E-選擇素等增加對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的黏附性，促進(jìn)癌細(xì)胞擴(kuò)散，認(rèn)為MUC1可能在腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移過程中起作用。Selvi等[10]研究發(fā)現(xiàn)，MUC1-C-Gal-3作為依賴MiR-322的調(diào)控環(huán)的一部分而發(fā)揮作用，而EGFR在調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的生長、修復(fù)、新生血管生成、侵襲轉(zhuǎn)移中具有重要的作用，故認(rèn)為MUC1可能在腫瘤的進(jìn)展過程中起作用。

本組資料顯示， MUC1在大腸癌中的表達(dá)與患者的性別、年齡、腫瘤的大小均無明顯關(guān)系，表明性別、年齡、腫瘤大小對MUC1的表達(dá)無明顯影響。也進(jìn)一步說明MUC1在促進(jìn)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移方面比促進(jìn)腫瘤發(fā)生方面起更大作用。但有一些實(shí)驗(yàn)表明[11]，結(jié)直腸癌細(xì)胞中MUC1表達(dá)與腫瘤惡性生物學(xué)行為之間無顯著相關(guān)性，雖然MUC1與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移有一定關(guān)系，但目前還不能把MUC1作為獨(dú)立的結(jié)直腸腫瘤標(biāo)志物。

總之，血清MUC1表達(dá)與大腸癌生物學(xué)行為有密切關(guān)系，檢測血清MUC1的表達(dá)水平對于大腸癌的診斷、惡性程度及預(yù)后的判斷均有一定價值，也為結(jié)腸癌的靶向治療提供新的思路[12，13]。

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