崔貞玉，韓素霞，馮磊，董曉光，郭李平，常建梅

氯沙坦影響大鼠心肌梗死后心室重塑的機(jī)制研究*

崔貞玉**，韓素霞，馮磊，董曉光，郭李平，常建梅

目的：探討血管緊張素轉(zhuǎn)換酶（ACE）2對大鼠心肌梗死（MI）后心肌組織中血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）的表達(dá)與心肌重塑的影響，進(jìn)一步闡明氯沙坦對大鼠MI后心肌重塑的作用機(jī)制。

血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2；心肌梗死；血管緊張素Ⅱ；心肌重塑；氯沙坦

(Chinese Circulation Journal, 2014,29:629.)

心血管疾病嚴(yán)重危害著人類健康，據(jù)《中國心血管病報(bào)告》我國心血管疾病患者已達(dá)2.3億，每年約300萬人死于心血管病，位居死亡原因首位，發(fā)病率不斷增加。統(tǒng)計(jì)資料顯示，全球每年有1700萬人死于心血管疾病，其中一半以上死于急性心肌梗死（AMI）。近十年來，我國AMI的發(fā)病率呈明顯上升趨勢，已接近國際平均水平。AMI起病突然，急性期死亡率約為30%[1]。眾所周知，血管緊張素轉(zhuǎn)化酶-血管緊張素Ⅱ-血管緊張素Ⅱ1型受體（ACE-AngⅡ-AT1）受體軸可使全身微動脈和靜脈收縮，動脈血壓增高，回心血量增加，AngⅡ是已知最強(qiáng)的縮血管活性物質(zhì)之一。AngⅡ與AT1結(jié)合，介導(dǎo)了心室重塑過程中一系列生物化學(xué)反應(yīng)[2]。2000 年歐洲D(zhuǎn)onoghue 等[3]報(bào)道了一種新發(fā)現(xiàn)的與人類ACE相關(guān)的羧肽酶, 稱之為血管緊張素轉(zhuǎn)換酶 （ACE） 2，ACE2 在結(jié)構(gòu)上有42%的成分與ACE 保持一致。自發(fā)現(xiàn)ACE2 以來，越來越多的證據(jù)顯示，ACE2在調(diào)節(jié)心臟和血管生理功能方面發(fā)揮重要作用。本文探討ACE2對大鼠心肌梗死（MI）后心肌組織中AngⅡ的表達(dá)與心肌重塑的影響，進(jìn)一步闡明氯沙坦對大鼠MI后心肌重塑的作用機(jī)制。

1 材料與方法

材 料：2012-03至2013-12選 取SPF級、 體 重（200±20） g、雄性SD大鼠32只（購自新疆醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物研究中心；倫審號：IACUC-20121127010）；氯沙坦鉀片（杭州默沙東制藥有限公司生產(chǎn)）。

大鼠心肌梗死（MI）模型的建造：將大鼠采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為4組：假手術(shù)組、MI組、MI+氯沙坦小劑量組和MI+氯沙坦大劑量組，每組8只。術(shù)前禁食12 h。將氯胺酮、阿托品、地西泮各1支混合后稀釋一倍，按4 ml/kg腹腔內(nèi)麻醉，固定，記錄心電圖。經(jīng)口腔行氣管插管，接呼吸機(jī)。消毒切口，鋪無菌單，在左側(cè)2、3肋間開胸，于左心耳右下緣1 mm、肺動脈圓錐左緣處用6號帶針縫線結(jié)扎冠狀動脈前降支，心電圖顯示不同肢體導(dǎo)聯(lián)QRS波增寬增高，ST段弓背向上抬高0.2 mV以上。肉眼觀察結(jié)扎后梗死區(qū)變蒼白，則提示結(jié)扎成功。結(jié)扎成功后關(guān)胸。假手術(shù)組在心臟相應(yīng)部位掛線，不結(jié)扎。4組術(shù)后24 h內(nèi)給予嗎啡4 mg/（kg.6 h）肌注鎮(zhèn)痛，術(shù)后3天連續(xù)給予青霉素50萬IU/（kg.d）肌注預(yù)防感染。于術(shù)后24 h開始灌胃給藥，給藥期1個月。假手術(shù)組和MI組給予蒸餾水等量灌胃，MI+氯沙坦小劑量組給予氯沙坦10 mg/（kg.d），MI+氯沙坦大劑量組給予氯沙坦20 mg/（kg.d）。

超聲心動圖檢查：心肌取材前，各組大鼠行超聲心動圖檢查，測量指標(biāo)有：左心室收縮末期容積（LVESV）、左心室舒張末期容積（LVEDV）。計(jì)算左心室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）。

左心室重量指數(shù)測定及取材：完成血流動力學(xué)測定后，將大鼠稱重，腹腔內(nèi)麻醉后腹主動脈放血致死，迅速打開胸腔，在心臟未停跳之前注入10% KCl液2～3 ml，使心臟于舒張末期停跳，取出心臟置于冰鹽水中，沖洗干凈，沿室間隔剪去右心室，濾紙吸干后稱取左心室（包括室間隔）重量，計(jì)算左心室重量指數(shù)（LVMI）。最后，將左心室即心尖部心肌組織縱剖為二，分別置于液氮和4%多聚甲醛中保存。

心肌組織形態(tài)學(xué)觀察：組織于4%多聚甲醛中固定，24 h后換一次液，48 h后進(jìn)行石蠟包埋，切片。行蘇木素伊紅（HE）染色，光鏡下觀察心肌組織梗死后心肌細(xì)胞腫脹、壞死和炎癥細(xì)胞浸潤情況。

定量逆轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）：用Trizol試劑盒（瑞士roche公司）按說明書抽提心肌組織總RNA，逆轉(zhuǎn)錄試劑盒（瑞士roche公司）將1 μg RNA按其說明書逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，最后以cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增。引物設(shè)計(jì)參考文獻(xiàn)，由上海生工公司合成并純化，ACE2引物： 上 游 5'-GTGGAGCACTGACTGGAGC-3'，下 游 5'-GACAGGAGGCTCGTAAGGTG-3'，擴(kuò) 增 片 段 長： 403 bp；AngⅡ 引 物： 上 游5'-TTGGGTGCTGAGGCAAATCT-3'， 下 游5'-TTGGGTGCTGAGGCAAATCT-3'， 擴(kuò) 增 片段長：244 bp；β肌動蛋白（β-actin）引物：上游 5’-CCCTGTGCTGCTCACCGA-3’， 下 游5’-ACAGTGTGGGTGACCCCGTC-3’，擴(kuò)增片段長度：186 bp。β-actin的反應(yīng)體系為40μl，AngⅡ和ACE2的反應(yīng)體系為25 μl。目的基因的擴(kuò)增條件：95℃下預(yù)變性5 min后，95℃變性30 s，最適退火溫度30 s，72℃延伸30 s，35個循環(huán)后，72℃延伸7 min。其中AngⅡ、ACE2和β-actin的退火溫度分別為60℃、55℃、57℃。取5 μl PCR產(chǎn)物于2%瓊脂糖凝膠85 V電泳30 min。凝膠用全能型凝膠成像分析儀（美國Bio-Rad公司）攝像，錄入計(jì)算機(jī)，用凝膠成像分析系統(tǒng)分析電泳條帶的面積和平均灰度，計(jì)算樣本的灰度值（面積×平均灰度），以各組β- actin灰度值為內(nèi)參照，計(jì)算各指標(biāo)的mRNA的相對表達(dá)量（相對灰度%）。

蛋白印跡（Western blot）法：用Western blot法檢測心肌組織內(nèi)ACE2和AngⅡ的蛋白表達(dá)量。提取心肌蛋白：取冷凍待用的心肌組織，加入10倍體積的蛋白裂解液+蛋白酶抑制劑，組織勻漿器勻漿，冰上裂解30 min后，超聲粉碎機(jī)超聲2 min，13000 r/min離心收集上清。用BCA蛋白定量試劑盒（北京天根公司）測定總蛋白含量，操作方法按照試劑盒說明書進(jìn)行。確定電泳上樣量50 μg,行聚丙烯酰氨凝膠電泳，積層膠電壓80 V 15 min，分離膠電壓120 V 1 h。電泳后用濕轉(zhuǎn)法轉(zhuǎn)膜5 h，將蛋白轉(zhuǎn)移NC膜上。3%脫脂牛奶封閉1 h。膜用ACE2（1：1000，多克隆鼠抗）、AngⅡ（1:200，多克隆兔抗）抗體于4℃孵育過夜。以β-actin（1:500,多克隆鼠抗）作為內(nèi)參對照。0.05%TBST洗液洗膜3次，每次5 min。分別以對應(yīng)二抗常溫孵育2 h。再用0.05%TBST洗膜3次，每次5 min。底物二氨基聯(lián)苯胺（DAB）呈色法顯色。各蛋白表達(dá)水平經(jīng)全能型凝膠成像分析儀檢測分析其吸光度值（A值），并以其內(nèi)參的比值作為半定量指標(biāo)進(jìn)行各組間的比較。

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：所有統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)均采用Excel軟件及統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 16.0處理。數(shù)據(jù)采用表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)。多組間差異采用方差分析。多組間兩兩比較采用q檢驗(yàn)。以 P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

大鼠心肌梗死前后心電圖結(jié)果：大鼠MI后與MI前相比， ST段抬高，QRS波增寬顯著。圖1

圖1 大鼠心肌梗死前、后心電圖結(jié)果

超聲心動圖結(jié)果：①M(fèi)I組與假手術(shù)組比較，左心室重量指數(shù)升高、左心室射血分?jǐn)?shù)降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；②MI+小劑量氯沙坦組與MI組比較，左心室重量指數(shù)降低、左心室射血分?jǐn)?shù)升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；③ MI+大劑量氯沙坦組與MI+小劑量氯沙坦組比較，左心室重量指數(shù)降低、左心室射血分?jǐn)?shù)升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。表1

表1 各組大鼠超聲心動圖結(jié)果比較

表1 各組大鼠超聲心動圖結(jié)果比較

注：與假手術(shù)組比較*P＜0.05；與MI組比較ΔP＜0.05；與MI+小劑量氯沙坦組▲P＜0.05。MI：心肌梗死

MI+大劑量氯沙坦組 (n=8)體重 (g) 305.3±11.4 268.3±18.8 282.9±16.7 284.8±17.1左心室重量 (mg) 667.3±65.8 795.7±86.3 752.8±78.4 721.9±80.2左心室重量指數(shù) (mg/g) 2.15±0.39 3.12±0.22* 2.79±0.26Δ 2.46±0.21▲左心室收縮末容積 (ml) 0.26±0.56 0.67±0.29 0.57±0.27 0.41±0.24左心室舒張末容積 (ml) 0.92±0.21 1.26±0.52 1.23±0.43 1.03±0.29左心室射血分?jǐn)?shù) (%) 69.34±2.3 44.83±2.6* 52.20±3.9Δ 60.21±4.1▲參數(shù) 假手術(shù)組(n=8) MI組(n=8) MI+小劑量氯沙坦組 (n=8)

病理形態(tài)變化：HE染色顯示MI組梗死區(qū)心肌細(xì)胞腫脹、變形、破裂、排列雜亂，細(xì)胞質(zhì)流入細(xì)胞間隙，幾乎沒有明顯的殘存心肌細(xì)胞，細(xì)胞間質(zhì)增生,炎癥細(xì)胞浸潤明顯；MI+氯沙坦大劑量組心肌細(xì)胞壞死少見，細(xì)胞腫脹減輕，心肌纖維排列紊亂，部分肌纖維斷裂，伴少量炎性細(xì)胞浸潤；MI+氯沙坦小劑量組居中；假手術(shù)組心肌纖維排列規(guī)則，無病理改變（圖2）。

RT-PCR結(jié)果（PCR條帶灰度值）：①心尖部心肌組織ACE2/β-actin的表達(dá)量：MI組高于假手術(shù)組；MI+小劑量氯沙坦組和MI+大劑量氯沙坦組均高于MI組，且MI+大劑量氯沙坦組較MI+小劑量氯沙坦組升高更顯著，組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。②心尖部心肌組織AngⅡ/β-actin的表達(dá)量：MI組高于假手術(shù)組；MI+小劑量氯沙坦組和MI+大劑量氯沙坦組均低于MI組，且MI+大劑量氯沙坦組較MI+小劑量氯沙坦組降低更顯著，組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。表2、圖3、4

圖2 各組大鼠心肌組織蘇木素伊紅染色結(jié)果（×400）

表2 逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)條帶灰度值及蛋白印跡條帶灰度值（n=8，

表2 逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)條帶灰度值及蛋白印跡條帶灰度值（n=8，

注：與假手術(shù)組比較*P＜0.05；與MI組比較ΔP＜0.05；與MI+小劑量氯沙坦組比較▲P＜0.05。RT-PCR：逆轉(zhuǎn)錄－聚合酶鏈反應(yīng) Western bolt：蛋白印跡 ACE2/β-actin：血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2/ β肌動蛋白 AngⅡ/β-actin：血管緊張素II/β肌動蛋白 MI：心肌梗死

參數(shù) 假手術(shù)組 MI組 MI+小劑量氯沙坦組 MI+大劑量氯沙坦組RT-PCR結(jié)果ACE2/β-actin 0.16±0.02 0.38±0.03* 0.40±0.05Δ 0.69±0.12▲AngⅡ/β-actin 0.14±0.03 0.60±0.06* 0.30±0.02Δ 0.24±0.04▲Western blot結(jié)果ACE2/β-actin 0.41±0.05 0.85±0.11* 1.13±0.19Δ 1.29±0.14▲AngⅡ/β-actin 0.07±0.01 0.38±0.07* 0.22±0.09Δ 0.09±0.03▲

圖3 各組大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2的逆轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈反應(yīng)結(jié)果

圖4 各組大鼠血管緊張素Ⅱ的逆轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈反應(yīng)結(jié)果

Western blot結(jié)果（Western blot條帶灰度值）：心尖部心肌組織ACE2/β-actin的表達(dá)量：MI組高于假手術(shù)組；MI+小劑量氯沙坦組和MI+大劑量氯沙坦組均高于MI組，且MI+大劑量氯沙坦組較MI+小劑量氯沙坦組升高更顯著，組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。心尖部心肌組織AngⅡ/ β-actin的表達(dá)量：MI組高于假手術(shù)組；MI+小劑量氯沙坦組和MI+大劑量氯沙坦組均低于MI組，且MI+大劑量氯沙坦組較MI+小劑量氯沙坦組降低更顯著，組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。表2、圖5、6

圖5 各組大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2的蛋白表達(dá)結(jié)果

圖6 各組大鼠血管緊張素‖的蛋白表達(dá)結(jié)果

3 討論

AMI后心室重塑主要表現(xiàn)為梗死區(qū)膨展和非梗死區(qū)失代償性肥厚，嚴(yán)重影響了心臟的收縮和舒張功能。本研究以左心室收縮末期容積、左心室舒張末期容積和左心室射血分?jǐn)?shù)來反映心功能，以左心室重量和左心室重量指數(shù)反映心肌肥厚程度，以病理結(jié)果反映心肌細(xì)胞損傷程度。結(jié)果提示AMI導(dǎo)致了明顯的心室重塑和心臟功能損害。以往研究提示AngⅡ在心肌梗死后心室重塑中起重要的作用。AMI后，心肌局部AngⅡ增加，可導(dǎo)致膠原合成增加，加速心肌纖維化的進(jìn)程[4]。本研究中，MI組心肌組織AngⅡ水平明顯高于假手術(shù)組，ACE2表達(dá)量較假手術(shù)組略有增加，進(jìn)一步證實(shí)了急性MI后心室重塑和心功能受損與心肌組織中 腎素-血管緊張素系統(tǒng)（RAS）的激活有關(guān)。根據(jù)以往研究推測MI組ACE2升高是由心肌梗死后慢性長期的組織修復(fù)導(dǎo)致[5]。

近年來研究發(fā)現(xiàn)了RAS系統(tǒng)中一些新成員，如腎素受體、Ang 1-7及其受體Mas、Ang2-7、Ang3-7、AngⅢ、AngⅣ等。在這些新發(fā)現(xiàn)的成員中，ACE2、Ang1-7及其受體MAS構(gòu)成了一個新的RAS分支：ACE2-Ang1-7-MAS受體軸，該軸是與ACE-AngⅡ-AT1受體軸這一作用明確的途徑相抗衡的生物學(xué)分支，ACE2是降解AngⅡ產(chǎn)生Ang1-7的主要效應(yīng)酶[6]，發(fā)揮著拮抗AngⅡ的作用，舒張血管、抑制心肌細(xì)胞增殖、逆轉(zhuǎn)心室重塑、改善心臟功能、抗炎抗凝和抗心律失常[7-9]。因此ACE2成為備受關(guān)注的熱點(diǎn)。近年來的研究工作還提出了“局部RAS”的新概念，即RAS不僅存在于循環(huán)系統(tǒng)中，還存在于其他組織器官，如心臟、血管平滑肌、腦、腎臟、腎上腺、骨骼肌、性腺等。心臟不僅是RAS的重要靶器官，而且是合成RAS的重要場所，已經(jīng)證實(shí)心肌組織可以自身合成RAS的大部分成員。ACE基因表達(dá)廣泛分布于全身循環(huán)系統(tǒng)和局部組織器官中,而ACE2的表達(dá)具有高度的組織特異性, 主要局限在心臟和腎臟內(nèi)皮細(xì)胞、遠(yuǎn)端腎小管上皮細(xì)胞和睪丸, 也可在消化等其他一些有限的器官。并且有研究表明，這種相對獨(dú)立的局部RAS通過旁分泌和自分泌的方式調(diào)節(jié)心血管活動，比循環(huán)RAS在心血管活動的調(diào)解中起著更直接、更重要的生理與病理作用[10]。

氯沙坦是第一個AT 1受體拮抗劑類的抗高血壓藥物。本研究結(jié)果顯示，氯沙坦的藥物作用使得各組大鼠心肌組織中ACE2表達(dá)量產(chǎn)生了梯度差異，呈劑量依賴性增加，而AngⅡ表達(dá)量則呈劑量依賴性減少，我們推測氯沙坦通過增加大鼠MI后心肌組織中ACE2的表達(dá)量來抑制AngⅡ的表達(dá)，進(jìn)一步抑制心肌重塑。Kassiri等[11]研究均證實(shí)，在ACE2基因敲除MI小鼠體內(nèi)，表現(xiàn)出早期的心肌肥厚和嚴(yán)重的心室重塑，可以通過厄貝沙坦治療來減少NADPH氧化酶活性、MI面積、心肌細(xì)胞炎癥等來增加MI后的心功能。Sukumaran等[12]分別從蛋白和基因水平印證了替米沙坦通過增加ACE2/Ang1-7的表達(dá)量來抑制實(shí)驗(yàn)性自身免疫性心肌炎性大鼠的心室重塑。Burrell等[5]研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)小鼠梗死邊緣與未梗死交界區(qū)和梗死后存活心肌中ACE2 基因表達(dá)顯著增加，提示ACE2與心肌重塑的關(guān)系。王江等[13]研究發(fā)現(xiàn)心衰大鼠心肌組織ACE2表達(dá)上調(diào)，貝那普利可進(jìn)一步刺激ACE2表達(dá)增強(qiáng)。徐晤等[14]研究發(fā)現(xiàn)豬心房顫動結(jié)構(gòu)重構(gòu)與ACE2表達(dá)失衡密切相關(guān)，替米沙坦可明顯增加ACE2的表達(dá)量。本研究結(jié)果與以往研究結(jié)果一致。

本試驗(yàn)通過觀察AT 1受體拮抗劑氯沙坦對MI后大鼠纖維化心肌組織中ACE2表達(dá)的影響,探討并證實(shí)了氯沙坦對大鼠MI后心肌組織的可能作用機(jī)制，為闡明疾病的發(fā)病提供新機(jī)制，對疾病的治療提供新思路。

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Effect of Losartan on Myocardial Remodeling in Myocardial Infarction Rats’ Model

CUI Zhen-yu***, HAN Su-xia, FENG Lei, DONG Xiao-guang, GUO Li-ping, CHANG Jian-mei.
Department of Cardiology, The Fifth Aff i liated Hospital of Xinjiang Medical University, Urumqi (830054), Xinjiang, China

HAN Su-xia, Email: Email:hxs0016@163.com

Objective: To investigate the effect of losartan on angiotensin II (Ang II) expression and myocardial remodeling in myocardial infarction (MI) rats’ model.Methods: A total of 32 SD male rats were divided into 4 groups, Sham operation group, MI group, MI with losartan 10mg/(kg.d) group and MI with losartan 20mg/(kg.d). n=8 in each group. MI model was established and the electrocardiogram changes before and after MI were recorded, hemodynamic indexes were detected at 4 weeks after MI, pathological changes of myocardial tissue were examined by HE staining. The myocardial mRNA and protein expressions of ACE2 and Ang II were detected by RT-PCR and Western Blot analysis.Results: Compared with Sham operation group, MI group showed increased LVMI and decreased LVEF P＜0.05; the above changes were getting better in both MI with losartan groups in a dose-dependent manner. The pathological examination presented that MI group had myocardial cell swelling, fracture, hyperplasia and inflammatory cell infiltration, those damages were less in MI with losartan groups in a dose-dependent manner, Sham operation grouphad no pathological changes. Compared with Sham operation group, the mRNA and protein expressions of Ang II were obviously higher in MI group, P＜0.05 and the expressions were decreased in MI with losartan groups in a dosedependent manner; the mRNA and protein expressions of ACE2 were slightly increased in MI group and the expressions were further increased in MI with losartan groups in a dose-dependent manner.Conclusion: Losartan could increase ACE2 expression and therefore, inhibit Ang II expression and improve the ventricular remodeling in MI rats’ model.

Angiotensin converting enzyme2; Myocardial infarction; Angiotensin II; Myocardial remodelling; Losartan

2013-11-29)

（編輯：梅平）

國家自然科學(xué)基金（項(xiàng)目批準(zhǔn)號：81060023，申請代碼：H0207）

830054 新疆維吾爾自治區(qū)烏魯木齊市，新疆醫(yī)科大學(xué)第五附屬醫(yī)院 心血管內(nèi)科

崔貞玉 住院醫(yī)師 碩士研究生 研究方向：ACE2、ARB類藥物與心肌梗死后心室重塑的關(guān)系 Email：616366039@qq.com 通訊作者：韓素霞Email: hxs0016@163.com**現(xiàn)在河南省安陽市人民醫(yī)院 心內(nèi)科（455000）***Now working at Department of Cardiology, The People's Hospital of Anyang, Anyang (455000), China

R541

A

1000-3614（2014）08-0629-05

10.3969/j.issn.1000-3614.2014.08.018

方法：將32只健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、MI組、MI+氯沙坦小劑量組［MI+10 mg/（kg.d）］和MI+氯沙坦大劑量組［MI+20 mg/（kg.d）］，各組均8只，隨后將MI組和氯沙坦組大鼠建立心尖部MI模型。術(shù)中檢測梗死前后心電圖變化情況。術(shù)后24 h開始灌胃給藥，給藥期1個月，給藥結(jié)束后測大鼠的血流動力學(xué)指標(biāo)，并取大鼠心尖部心室肌組織，測其重量，隨后組織固定切片，蘇木素伊紅（HE）染色觀察心肌組織病理改變情況，逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）法和蛋白印跡（Western Blot）法檢測心肌組織ACE2和AngⅡ的mRNA和蛋白表達(dá)量。

結(jié)果：MI組左心室重量及左心室重量指數(shù)（LVMI）均明顯高于假手術(shù)組（P＜0.05），左心室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）明顯低于假手術(shù)組（P＜0.05），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；氯沙坦各組的上述指標(biāo)均有所改善，呈劑量依賴性。病理結(jié)果顯示，MI組大鼠梗死區(qū)域可見心肌細(xì)胞腫脹、破裂，間質(zhì)增生,炎癥細(xì)胞浸潤明顯；MI+氯沙坦大劑量組心肌細(xì)胞壞死少見，腫脹減輕；MI+氯沙坦小劑量組居中；假手術(shù)組心肌纖維排列規(guī)則，無病理改變。MI組心肌內(nèi)AngⅡ的mRNA和蛋白表達(dá)量顯著高于假手術(shù)組（P＜0.05），給予氯沙坦后，表達(dá)量呈劑量依賴性下降。MI組心肌內(nèi)ACE2的mRNA和蛋白的表達(dá)量均略高于假手術(shù)組（P＜0.05），氯沙坦各組繼續(xù)升高，呈劑量依賴性。

結(jié)論：氯沙坦可增加大鼠ACE2表達(dá)量，進(jìn)而通過抑制心肌組織內(nèi)AngⅡ表達(dá)來改善MI后的心室重塑。