膠體金免疫層析法聯(lián)檢食品中5 種典型沙門氏菌模型的建立和優(yōu)化

夏詩琪，徐超蓮，劉道峰，郭 琦，吳松松，賴衛(wèi)華*

（南昌大學(xué) 食品科學(xué)與技術(shù)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江西 南昌 330047）

膠體金免疫層析法聯(lián)檢食品中5 種典型沙門氏菌模型的建立和優(yōu)化

夏詩琪，徐超蓮，劉道峰，郭 琦，吳松松，賴衛(wèi)華*

（南昌大學(xué) 食品科學(xué)與技術(shù)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江西 南昌 330047）

采用膠體金標(biāo)記抗沙門氏菌單克隆抗體，將沙門氏菌單克隆抗體和驢抗鼠抗體（二抗）噴涂于硝酸纖維膜上分別作為檢測線和質(zhì)控線，研制能聯(lián)檢5 種典型沙門氏菌（甲型副傷寒沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌、腸炎沙門氏菌、鴨沙門氏菌）的膠體金免疫層析試紙條。結(jié)果表明，該試紙條能達(dá)到同時檢測5 種沙門氏菌的目的，其中甲型副傷寒沙門氏菌的檢測靈敏度最高，為105CFU/mL；鼠傷寒沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌、腸炎沙門氏菌和鴨沙門氏菌的檢測靈敏度為106CFU/mL。沙門氏菌加入量為10～100 CFU時，增菌16～20 h，該試紙條能夠檢測出牛奶、雞蛋樣本中的5 種沙門氏菌。本實(shí)驗(yàn)研制的試紙條能快速高效地聯(lián)檢食品中5 種典型的沙門氏菌，特異性高、靈敏度好，在對多種沙門氏菌進(jìn)行聯(lián)檢方面有很重要的應(yīng)用價值。

沙門氏菌；膠體金免疫層析試紙條；聯(lián)檢；食品樣本

沙門氏菌（Salmonella）是一類重要的食源性致病菌。目前，沙門氏菌血清型約有2 500多種[1]，它可以引發(fā)胃腸炎、傷寒、敗血癥等多種疾病[2-3]。沙門氏菌的暴發(fā)具有全球性，據(jù)統(tǒng)計，全球每年因感染沙門氏菌而患胃腸炎的患者約有9 380萬，死亡人數(shù)高達(dá)15萬人[4]。美國、丹麥、俄羅斯等發(fā)達(dá)國家均有沙門氏菌感染事件的報道。在美國，每年被食源性病原菌感染的患者中約100萬 例是由沙門氏菌導(dǎo)致的[5]。2010年3—9月，在丹麥由鼠傷寒沙門氏菌引起的感染病例高達(dá)172 例[6]。2013年，俄羅斯彼爾姆某學(xué)校暴發(fā)了一場因沙門氏菌而引起的食物中毒案例，導(dǎo)致150 名中學(xué)生患病[7]。近年來，我國受沙門氏菌的威脅越來越大。2001年我國疾病預(yù)防控制中心在全國11 個省市設(shè)點(diǎn)采樣并檢測了七大類農(nóng)產(chǎn)品及食品（生肉、熟肉、生奶、冰激淋、酸奶、水產(chǎn)品和蔬菜共4 034 份樣品），沙門氏菌平均檢出率為3.32%[8]。2009—2011年，相關(guān)部門對在東北、西北、華東地區(qū)農(nóng)貿(mào)市場隨機(jī)抽取的1 779 份禽肉樣品進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示樣品沙門氏菌的平均污染率為12.5%[9]。因此，建立快速有效的檢測方法對于沙門氏菌的臨床診斷與預(yù)防具有重大的意義。

膠體金免疫層析技術(shù)（colloidal gold immunochromatographic assay，GICA）是一種以膠體金為示蹤標(biāo)記物，基于抗原抗體反應(yīng)的免疫標(biāo)記技術(shù)[10]。該方法快速便捷，操作簡單，不需要特殊設(shè)備就能得到肉眼可見的結(jié)果，適用于現(xiàn)場大量樣品的快速篩查[11-13]。沙門氏菌可分為五大類，其中包括甲組的甲型副傷寒沙門氏菌（Salmonella paratyphi A）、乙組的鼠傷寒沙門氏菌（Salmonella typhimurium）、丙組的豬霍亂沙門氏菌（Salmonella choleraesuis）、丁組的腸炎沙門氏菌（Salmonella enteritidis）和戊組的鴨沙門氏菌（Salmonella anatum）。本研究建立雙抗夾心模型，研制膠體金試紙條聯(lián)檢食品樣本中5 種典型的沙門氏菌，并對試紙條的靈敏度和特異性進(jìn)行了評價。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑與儀器

牛奶、雞蛋 南昌天虹購物中心。

氯化金（HAuCl4）、酪蛋白、檸檬酸三鈉 美國Sigma公司；正辛酸（純度＞98.0%） 梯希愛（上海）化成工業(yè)發(fā)展有限公司；BPW培養(yǎng)基、SBG磺胺增菌液、P-10B新生霉素、P-73 0.1%煌綠溶液 北京陸橋技術(shù)有限公司；5 種沙門氏菌（包括甲型副傷寒沙門氏菌（ATCC 9150）、鼠傷寒沙門氏菌（ATCC 13311）、豬霍亂沙門氏菌（ATCC 10708）、腸炎沙門氏菌（ATCC 13076）和鴨沙門氏菌（ATCC 9150），編號分別為A、B、C、D、E）、單核增生李斯特菌ATCC 13932、弗氏檸檬酸桿菌ATCC 43864 美國典型菌種保藏中心；19 種非沙門氏菌，包括阪崎腸桿菌CMCC 45401、阪崎腸桿菌CMCC 45402、大腸桿菌CMCC 25922、金黃色葡萄球菌CMCC 45401、單核增生李斯特菌CMCC 54007、威爾李斯特菌CMCC 35897、西爾李斯特菌CMCC 35967、英諾克李斯特菌CMCC 11288、綿羊李斯特菌CMCC 19119、格式李斯特菌CMCC 25401、蠟樣芽胞桿菌CMCC 49027、福氏志賀氏菌CMCC 2457、宋內(nèi)氏志賀氏菌CMCC 51592 中國醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏管理中心；枯草芽孢桿菌168、白色假絲酵母Z1、大腸桿菌NCTC 12900、副溶血弧菌ZDBE 江西疾病預(yù)防控制中心。

鼠抗沙門氏菌單克隆抗體（鼠抗甲型副傷寒沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、腸炎沙門氏菌、鴨沙門氏菌單克隆抗體，編號為8H10-B3，試紙條T線上的相應(yīng)抗體編號為5G6-D7；鼠抗豬霍亂沙門氏菌單克隆抗體，編號為11D8-D4，試紙條T線上的相應(yīng)抗體編號為9G6-A4）為本實(shí)驗(yàn)室制備（免疫原：該5 種沙門氏菌外膜蛋白，制備方法：有限稀釋法，效價：8H10-B3為640 000；5G6-D7為2 560 000；11D8-D4為2 560 000；9G6-A4為1 280 000）；驢抗鼠IgG 無錫中德伯爾生物技術(shù)有限公司。

硝酸纖維素膜、吸水紙、樣品墊、結(jié)合墊 美國密理博公司；紫外分光光度計 上海棱光技術(shù)有限公司；點(diǎn)樣儀、試紙條切刀 美國BioDot公司；磁力攪拌器 江蘇金壇市金城國盛實(shí)驗(yàn)儀器廠；BHC-1300ⅡA/B3生物安全柜 蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司；ZHWY-2102C恒溫培養(yǎng)振蕩器 上海智誠分析儀器制造有限公司；TGL-16臺式離心機(jī) 湖南長沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司；膠體金讀取儀 上海互幗科學(xué)儀器有限公司。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)菌培養(yǎng)

將-80 ℃保存的沙門氏菌劃線接種于SS瓊脂培養(yǎng)基平板上，37 ℃培養(yǎng)18 h后挑取典型單菌落接種于液體LB培養(yǎng)基上，37 ℃培養(yǎng)18 h。其他菌在LB平板上劃線，方法同沙門氏菌。用0.01 mol/L 磷酸鹽緩沖溶液（phosphate buffered saline，PBS，pH 7.4）梯度稀釋后進(jìn)行菌落計數(shù)。

1.2.2 腹水辛酸硫酸銨沉淀法純化抗體

取腹水離心（9 000 r/min、4 ℃、30 min）后取上清液，向上清中加入2 倍體積的0.06 mol/L CH3COONa溶液（pH 5.0），用1 mol/L HCl溶液調(diào)節(jié)pH 4.2～4.8。在攪拌條件下向每毫升原始腹水中逐滴加入33 μL正辛酸（純度＞98.0%）后，繼續(xù)攪拌30 min，4 ℃靜置2 h。離心（9 000 r/min、4 ℃、45 min），收集上清液，向上清液中加入1/10體積的0.1 mol/L PBS緩沖溶液（pH 7.4），用1 mol/L NaOH溶液調(diào)節(jié)pH 7.4。4 ℃條件下緩慢加入(NH4)2SO4至終質(zhì)量濃度為0.277 g/mL（30 min內(nèi)完成），4 ℃靜置過夜。離心（9 000 r/min、4 ℃、45min），棄上清液，收集沉淀。沉淀用0.01 mol/L PBS緩沖溶液（pH 7.4）溶解，4 ℃透析3 d。

1.2.3 檸檬酸三鈉法制備膠體金

將100 mL 0.01% HAuCl4溶液加熱至沸騰，在攪拌的條件下迅速加入1.3 mL 1%檸檬酸三鈉溶液，繼續(xù)加熱攪拌，當(dāng)溶液的顏色完全變成紅色時，繼續(xù)加熱10 min后停止加熱，冷卻至室溫，4 ℃條件下保存。

1.2.4 膠體金的標(biāo)記

取60 個小燒杯按5×12呈矩陣排列，向每個小燒杯中分別加入1 mL膠體金。每列小燒杯用0.1 mol/L K2CO3溶液依次調(diào)節(jié)pH值至6、7、8、9、10。將每行小燒杯分為兩組，前6 行燒杯為第一組，其余為第2組。第1組標(biāo)記抗體8H10-B3，第2組標(biāo)記抗體11D8-D4，每一組每行抗體標(biāo)記量分別為5、10、15、20、25、30 μg/mL。封閉劑為5%酪蛋白。

1.2.5 膠體金標(biāo)記pH值和抗體標(biāo)記量的優(yōu)化

將A、B、C、D、E沙門氏菌菌液用0.01 mol/L PBS緩沖溶液（pH 7.4）稀釋至107CFU/mL。分別取100 μL A、B、D、E沙門氏菌菌液分別與4 μL第1組金標(biāo)抗體孵育5 min，用T線上噴有1.5 mg/mL抗體5G6-D7的試紙條檢測，10～15min后用膠體金讀取儀讀取試紙條T線的信號值；取100 μL C沙門氏菌菌液與4μL第2組金標(biāo)抗體孵育5min，用T線上噴有1.5 mg/mL抗體9G6-A4的試紙條檢測，10～15 min后用膠體金讀取儀讀取試紙條T線的信號值。對照組為0.01mol/L PBS緩沖溶液（pH 7.4）。

1.2.6 試紙條T線抗體質(zhì)量濃度的確定

按照表1制備5 種不同T線抗體質(zhì)量濃度的試紙條，編號為a、b、c、d、e。在最優(yōu)pH值和抗體標(biāo)記量條件下，分別制備標(biāo)記了抗體8H10-B3和11D8-D4的免疫金。將A、B、C、D、E沙門氏菌菌液用0.01 mol/L PBS緩沖溶液（pH 7.4）稀釋至107CFU/mL，分別取100 μL菌液與4 μL免疫金（2 μL抗體8H10-B3免疫金、2 μL抗體11D8-D4免疫金）孵育5 min，用5 種試紙條單檢。對照組為0.01 mol/L PBS緩沖溶液（pH 7.4）。

表1 試紙條T線質(zhì)量濃度實(shí)驗(yàn)方案Table 1 Concentrations for test line mg/mL

1.2.7 試紙條靈敏度實(shí)驗(yàn)

將A、B、C、D、E沙門氏菌菌液用0.01 mol/L PBS緩沖溶液（pH 7.4）稀釋至104～108CFU/mL，分別取100 μL菌液與4 μL免疫金（2 μL抗體8H10-B3免疫金、2 μL抗體11D8-D4免疫金）孵育5 min，用最優(yōu)T線濃度的試紙條檢測，10～15 min 后讀取結(jié)果。對照組為0.01 mol/L PBS緩沖溶液（pH 7.4）。

1.2.8 試紙條特異性實(shí)驗(yàn)

將培養(yǎng)好的非靶標(biāo)細(xì)菌用0.01 mol/L PBS緩沖溶液（pH 7.4）稀釋至107CFU/mL，各取100 μL菌液加入試紙條中，10～15 min后讀取結(jié)果。對照組為0.01 mol/L PBS緩沖溶液（pH 7.4）。

1.2.9 試紙條穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

將密封好的試紙條放入60 ℃恒溫箱中加速保藏，每24 h取出，檢測105～106CFU/mL沙門氏菌，重復(fù)測定3 次。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定試紙條穩(wěn)定性。

1.2.10 食品樣本的檢測

1.2.10.1 樣品前處理

將市售盒裝牛奶在無菌條件下分裝成每等份25 mL。將市售雞蛋（全蛋）在無菌條件下攪拌勻漿后分裝成每等份25 mL。

1.2.10.2 增菌

向225 mL BPW培養(yǎng)基中加入25 mL樣品，分別接種A、B、C、D、E 5 種沙門氏菌菌液。每份雞蛋基質(zhì)中另需加入1 mL新生霉素和2.5 mL 0.1%煌綠溶液，牛奶基質(zhì)不加入。37 ℃振蕩培養(yǎng)前增菌8 h。取1 mL菌液轉(zhuǎn)種到10 mL SBG磺胺增菌液中進(jìn)行選擇性增菌，37 ℃振蕩培養(yǎng)8～12 h。

1.2.10.3 檢測

選擇性增菌8 h后，每隔1 h各取100 μL菌液加入試紙條中，10～15 min后讀取結(jié)果。

2 結(jié)果與分析

2.1 膠體金的表征分析

圖1 膠體金紫外-可見掃描圖Fig.1 UV-visible spectrum of colloidal gold

從圖1可以看出，膠體金在530 nm左右有強(qiáng)吸收峰。用透射電子顯微鏡觀察可以看出膠體金顆粒大小均一，約為35 nm左右（圖2）。

圖2 膠體金電鏡圖Fig.2 TEM image of colloidal gold particles

2.2 標(biāo)記pH值的優(yōu)化結(jié)果

抗體標(biāo)記量為10 μg/mL，標(biāo)記pH值為6、7、8、9、10時，用膠體金讀取儀讀取試紙條T線的信號值結(jié)果如圖3所示。當(dāng)pH值為7時，甲型副傷寒沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、腸炎沙門氏菌和鴨沙門氏菌試紙條T線信號值最高，因此選擇pH值為7作為抗體8H10-B3標(biāo)記pH值。豬霍亂沙門氏菌試紙條T線的信號值在pH值為6時最高，因此選擇pH值為6作為抗體11D8-D4標(biāo)記pH值。

圖3 標(biāo)記pH值的優(yōu)化結(jié)果Fig.3 Optimization of pH for antibody labeling

2.3 抗體標(biāo)記量的優(yōu)化結(jié)果

在最優(yōu)標(biāo)記pH值條件下，抗體標(biāo)記量的優(yōu)化結(jié)果如圖4所示。當(dāng)抗體標(biāo)記量為15 μg/mL時，甲型副傷寒沙門氏菌、腸炎沙門氏菌、鴨沙門氏菌試紙條T線信號值最高，抗體標(biāo)記量為15 μg/mL和20 μg/mL時鼠傷寒沙門氏菌試紙條T線信號值相差不大，從節(jié)約抗體用量的角度考慮，本實(shí)驗(yàn)選擇15 μg/mL作為抗體8H10-B3標(biāo)記量。當(dāng)抗體標(biāo)記量為5 μg/mL時，豬霍亂沙門氏菌試紙條T線的信號值最高，因此本實(shí)驗(yàn)選擇5 μg/mL作為抗體11D8-D4標(biāo)記量。

圖4 抗體標(biāo)記量的優(yōu)化結(jié)果Fig.4 Optimization of the amount of antibody labeled

2.4 試紙條T線抗體質(zhì)量濃度的優(yōu)化結(jié)果

表2 試紙條T線抗體質(zhì)量濃度的優(yōu)化結(jié)果Table 2 Optimization of test line concentration

表2結(jié)果顯示，試紙條T線抗體質(zhì)量濃度編號為a（抗體5G6-D7質(zhì)量濃度1.5 mg/mL，抗體9G6-A4濃度2.0 mg/mL）時，T線顯色最強(qiáng)。因此，本實(shí)驗(yàn)選擇T線抗體質(zhì)量濃度為a號的試紙條。

2.5 試紙條靈敏度分析

本實(shí)驗(yàn)制備的膠體金試紙條能聯(lián)檢5 種沙門氏菌。甲型副傷寒沙門氏菌靈敏度最高，為105CFU/mL；鼠傷寒沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌、腸炎沙門氏菌和鴨沙門氏菌靈敏度為106CFU/mL，結(jié)果見圖5。

圖5 試紙條靈敏度實(shí)驗(yàn)結(jié)果Fig.5 Sensitivity of the strip

2.6 試紙條特異性分析

圖6 試紙條特異性實(shí)驗(yàn)結(jié)果Fig.6 Specificity of the strip

試紙條與19 株非沙門氏菌的反應(yīng)結(jié)果如圖6所示。試紙條與大腸桿菌CMCC 25922（3號）、大腸桿菌NCTC 12900（4號）、金黃色葡萄球菌CMCC 45401（6號）、弗氏檸檬酸桿菌ATCC 43864（18號）存在弱陽性反應(yīng)；與其他菌以及PBS緩沖溶液呈陰性反應(yīng)。與大腸桿菌CMCC 25922（3號）、大腸桿菌NCTC 12900（4號）和弗氏檸檬酸桿菌（18號）存在交叉反應(yīng)的原因可能是因?yàn)楸緦?shí)驗(yàn)的目的菌與這3株菌有較多的相似抗原。金黃色葡萄球菌CMCC 45401（6號）細(xì)胞壁表面含有蛋白A，它和許多抗體的Fc片段具有親和能力，這可能是導(dǎo)致陽性結(jié)果的原因。

2.7 試紙條穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析

結(jié)果顯示，從第3天開始試紙條T線顯色變?nèi)?。根?jù)經(jīng)驗(yàn)，膠體金免疫層析試紙條在60 ℃條件下穩(wěn)定1 d，相當(dāng)于室溫保質(zhì)3 個月。因此，本方法研制的試紙條在常溫干燥的條件下預(yù)計能保存6 個月。

2.8 食品樣品檢測

前處理后的食品樣本通過SS瓊脂培養(yǎng)基平板計數(shù)確定為陰性樣本；通過LB平板計數(shù)，確定加入樣品中增菌的目的菌均為10～100 CFU。取選擇性增菌8、9、10、11、12 h的沙門氏菌菌液用試紙條進(jìn)行檢測。試紙條的檢測結(jié)果如表3所示，在食品樣本（牛奶、雞蛋）中，通過前增菌8 h，選擇性增菌12 h能夠檢出該5 種沙門氏菌。這說明本實(shí)驗(yàn)研制的試紙條是可以用于食品樣本中5 種沙門氏菌的檢測。

表3 食品樣品檢測結(jié)果Table 3 Detection of target Salmonella in food samples using the strip

3 結(jié) 論

食源性致病菌的監(jiān)控與預(yù)防是全球面臨的重要問題之一，其中沙門氏菌的安全風(fēng)險監(jiān)測是我國疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)的重要任務(wù)之一。近年來，膠體金免疫層析試紙條法在沙門氏菌的檢測中應(yīng)用得越來越廣泛，與其他快速檢測方法（酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增技術(shù)等）相比，膠體金免疫層析試紙條法具有花費(fèi)低、操作簡單、適合用于非專業(yè)人員對大量樣本進(jìn)行檢測的特點(diǎn)。柳健等[14]制備免疫層析試紙條檢測腸炎沙門氏菌的最低檢測量為2×105CFU/mL。李翠萍等[15]對沙門氏菌膠體金試紙條進(jìn)行了評價，該方法的檢測靈敏度為106CFU/mL。Preechakasedkit等[16]研制一步法膠體金免疫層析試紙條檢測鼠傷寒沙門氏菌，檢測靈敏度為1.14×106CFU/mL。

多元檢測是膠體金免疫層析法發(fā)展的趨勢，它能同時高效地檢測目標(biāo)物，降低檢測成本，在對多個指標(biāo)進(jìn)行聯(lián)檢方面有很重要的應(yīng)用價值[17]。Moongkarndi等[18]首次建立了有兩條T線的免疫層析試紙條模型，可以同時檢測腸炎沙門氏菌和鼠傷寒沙門氏菌，檢測靈敏度分別為106CFU/mL和104CFU/mL。本實(shí)驗(yàn)針對5 種典型的沙門氏菌（甲型副傷寒沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌、腸炎沙門氏菌和鴨沙門氏菌），建立能同時檢測該5 種沙門氏菌的膠體金免疫層析方法，結(jié)果表明本實(shí)驗(yàn)研制的試紙條能達(dá)到聯(lián)檢的目的，檢測靈敏度為105～106CFU/mL，特異性較高。此外，鄢志剛等[19]通過比較膠體金免疫層析技術(shù)、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)3 種方法對牛奶、雞蛋等401 份樣品中沙門氏菌的檢測結(jié)果，最終確定在大量樣品的檢測過程中可采用膠體金免疫層析技術(shù)進(jìn)行篩檢。通過兩步增菌，本方法研制的試紙條可以同時檢測出食品樣本（牛奶、雞蛋）中5 種沙門氏菌，在對大量食品樣本現(xiàn)場篩檢方面具有重要的應(yīng)用價值。

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Preparation and Optimization of Colloidal Gold Strip for Simultaneously Detecting Five Typical Salmonella in Foods

XIA Shi-qi, XU Chao-lian, LIU Dao-feng, GUO Qi, WU Song-song, LAI Wei-hua*
(State Key Laboratory of Food Science and Technology, Nanchang University, Nanchang 330047, China)

Colloidal gold immunochromatographic assay was chosen to simultaneously detect five typical Salmonella (Salmonella paratyphi A, Salmonella typhimurium, Salmonella choleraesuis, Salmonella enteritidis and Salmonella anatum) in foods. In this assay, anti-Salmonella monoclonal antibody was labeled with colloidal gold while anti-Salmonella monoclonal antibody and donkey anti-mouse IgG were dispensed onto nitrocellulose membrane as the test line and the control line, respectively. The sensitivity of the developed strip to Salmonella paratyphi A was 105CFU/mL and to the other four strains was 106CFU/mL. When food samples (e.g., milk and egg) were inoculated with 10–100 CFU Salmonella and cultured for 16–20 h, positive results appeared on the test line of the strip. The developed method is rapid, effi cient, sensitive and specifi c. Therefore, it provides a valuable tool for simultaneously detecting different Salmonella species.

Salmonella; colloidal glod immunochromatographic assay; detection; food samples

TS207.3

A

1002-6630（2014）22-0154-05

10.7506/spkx1002-6630-201422029

2014-03-30

“十二五”國家科技支撐計劃項(xiàng)目（2011BAK10B01）；江西科技廳社會發(fā)展攻關(guān)項(xiàng)目（20111BBG70010-3）；江西省生豬產(chǎn)業(yè)質(zhì)量安全崗位專家項(xiàng)目（JXARS-03）

夏詩琪（1992—），女，碩士研究生，研究方向?yàn)槭称焚|(zhì)量與安全。E-mail：496508689@qq.com

*通信作者：賴衛(wèi)華（1968—），男，教授，博士，研究方向?yàn)槭称焚|(zhì)量與安全。E-mail：talktolaiwh@163.com