李春莉 李芳玲 張?zhí)鞓?(山東省齊河縣畜牧獸醫(yī)局 251100)
蜂王漿是由5-15日齡的工蜂上顎腺所分泌的乳白色或淡黃色乳狀液體。鮮王漿中水分占62.5%~70.0%,干物質(zhì)占30.0%~37.5%。干物質(zhì)中蛋白占36.0%~55.0%,氨基酸約占王漿干重的0.8%,包含10-羥基癸烯酸等在內(nèi)的脂類物質(zhì)占7.5%~15%。此外,蜂王漿中還含有磷脂質(zhì)以及豐富的維生素,其中以B族維生素最豐富[1-3]。蜂王漿有改善睡眠的作用,不但可提高入眠速度,還能提高睡眠質(zhì)量,無任何毒副作用。本文就其改善睡眠的作用進行了研究及探討。
戊巴比妥鈉(進口瓶裝)、昆明種小白鼠(福建吳氏實驗動物研究中心提供)生產(chǎn)許可證號:SCXK(閩)2004-0002、AE200S型電子分析天平(mettler-Toledo Instr.Ltd shang hai)、一次性無菌注射器(1ml,江西洪達醫(yī)療器械集團有限公司生產(chǎn))。蜂王漿溶液:取蜂王漿(福建神蜂科技開發(fā)有限公司提供)4.165、6.250、8.333、10.417g溶于20ml蒸餾水配制成0.208、0.313、0.417、0.521g/ml的溶液分別用于2組、3組、4組、5組的實驗動物。
1.2.1 分組 正常成年人每次服用3g左右的蜂王漿就可以產(chǎn)生睡眠作用[4],即3g/60kg。按此50倍[5]的劑量將雄性小白鼠(每只約25g)隨機分為5組,即對照組(1組)、2g/60kg(2組)、3g/60kg(3組)、4g/60kg(4組)、5g/60kg(5組),每組10只,以此找出蜂王漿改善睡眠的低、中、高 3個劑量。動物試驗前均在實驗室適應(yīng)性喂養(yǎng)3d,然后在自然光照,自由飲食和自由進水的條件下,喂養(yǎng)28d。第30天起,每天早上8:00-10:00灌喂不同濃度的王漿0.2ml。
1.2.2 戊巴比妥鈉用量 為了確定100%的小白鼠進入睡眠的戊巴比妥鈉的最小劑量和其閾下睡眠劑量,即80%~90%的小白鼠翻正反射不消失的戊巴比妥鈉最大閾下睡眠劑量。小白鼠隨機分為6組,每組10只,各組動物腹腔注射戊巴比妥鈉不同劑量,記錄30min內(nèi)入睡的動物數(shù)[6]。
1.2.3 小白鼠的睡眠潛伏期 早上8:00-10:00之間,上述5組小白鼠連續(xù)灌胃25d,第26天灌胃15min 后,腹腔注射戊巴比妥鈉溶液;從注射完成到小白鼠翻正反射消失的時間段為睡眠潛伏期。戊巴比妥鈉所用劑量是根據(jù)預(yù)實驗確定使100%的小白鼠進入睡眠的戊巴比妥鈉的量,即50mg/kg。根據(jù)所用濃度,將0.25g戊巴比妥鈉溶于20ml蒸餾水中,0.1ml/只。
1.2.4 延長戊巴比妥鈉睡眠時間 早上8:00-10:00之間,將5組小白鼠連續(xù)灌胃25d,第26天灌胃15min后,腹腔注射戊巴比妥鈉溶液;從小白鼠翻正反射消失到小白鼠翻正反射恢復(fù)的時間段為睡眠時間。溶液配制和注射處理同睡眠潛伏期試驗一樣。
1.2.5 戊巴比妥鈉閾下睡眠劑量 在前面預(yù)試驗中,已經(jīng)知道使10%~20%的小白鼠睡眠的戊巴比妥鈉的閾下睡眠劑量為40mg/kg。配制0.4%的戊巴比妥鈉溶液,以100g/ml的劑量來注射。同上述試驗一樣灌胃15min后腹腔注射戊巴比妥鈉溶液,觀察30 min內(nèi)小白鼠的入睡數(shù)。
表1 戊巴比妥鈉不同劑量對小鼠睡眠的影響 (mg/kg、%)
表1說明,100%的小白鼠進入睡眠的戊巴比妥鈉最小劑量為50mg/kg;而戊巴比妥鈉閾下睡眠劑量為40mg/kg。
表2 戊巴比妥鈉對小鼠睡眠潛伏期的影響 (mg/kg、min)
結(jié)果表明,1~5組小白鼠在給藥后的翻正反射均消失,且2~5 組比1 組分別縮短了33.64%、38.63%、42.37%、4.36%,說明蜂王漿與戊巴比妥鈉可產(chǎn)生協(xié)同作用,促進小白鼠入睡,縮短進入睡眠狀態(tài)的時間。1組和5組之間差異不顯著,表明蜂王漿縮短小白鼠入睡時間的劑量并不是越大效果就越好。
表3 戊巴比妥鈉對小鼠睡眠時間的影響 (min)
表3表明,小白鼠在給藥后翻正反射均消失的時間2~ 5 組比1 組分別延長了27.21%、58.50%、69.06%、10.28%,說明蜂王漿與戊巴比妥鈉可產(chǎn)生協(xié)同作用,改善小白鼠的睡眠,延長小白鼠的睡眠時間。1組和5組差異不顯著(P>0.05),2組和3組、2組和4組、2組和5組差異極顯著(P<0.01),3組和4組差異不顯著(P>0.05),說明蜂王漿延長小白鼠的戊巴比妥鈉睡眠時間的效果與劑量有關(guān),即在一定的范圍內(nèi),蜂王漿劑量越大效果就越好,但是當(dāng)劑量達到一定程度后,效果就不是很明顯了。
表4 戊巴比妥鈉對小鼠閾下睡眠劑量作用的影響 (mg/kg、%)
由表4 可知,與對照組相比,2g/60kg 組提高了16.7%、3g/60kg 組提高了22.3%,4g/60kg 組提高了46.7%、5g/60kg組提高了4.2%。可見蜂王漿可以提高30 min內(nèi)小白鼠的入睡率。
蜂王漿對促進入睡、延長睡眠時間有極顯著效果。在延長睡眠時間方面,蜂王漿3g/60kg組與4g/60kg組效果顯著,而5g/60kg效果不顯著,說明王漿改善睡眠的效果與劑量有關(guān),不是劑量越大效果越好,其合適的劑量為3g/60kg左右。蜂王漿是理想的天然保健品,對人體無慢性危害。因此具有極大的開發(fā)價值和廣泛的應(yīng)用前景。但是蜂王漿不宜保存,值得人們進一步的研究。
蜂王漿是純天然綠色保健品,資料顯示蜂王漿中的10-羥基癸烯酸是鎮(zhèn)靜催眠的重要成分,此外王漿中的乙酰膽堿、?;撬?、維生素B等也可以明顯的改善睡眠,使人睡眠好、精力充沛、身體健壯。但是究竟王漿中的何種成分起作用,還不十分明確,有待于進一步的研究。總之蜂王漿對動物無毒性危害。因此具有極大的開發(fā)價值和廣泛的應(yīng)用前景。
[1]蘇曄, 敬璞, 丁曉雯等.蜂王漿的化學(xué)成分、生理活性及應(yīng)用[J].蜜蜂雜志, 2000, 9: 23-24.
[2]Tamura T.Royal jelly from the standpoint of clinical pharmacology[J].Honeybee Sci, 1985, 6(1): 117-124.
[3]Fujii A.Pharmacological effect of royal jelly[J].Honeybee Sci, 1995, 16(1): 97-104.
[4]郭芳彬.蜂王漿與美容[J].養(yǎng)蜂科技, 1998(5): 28-31.
[5]林貴兵.復(fù)方酸棗仁改善小鼠睡眠的初步研究[D].四川: 四川師范大學(xué), 2007.12-39..
[6]黨毅, 肖穎.中藥保健食品研制與開發(fā)[m].北京: 人民衛(wèi)生出版社.2002.307-308.