李松賓

（河南省商丘市食品藥品檢驗(yàn)所，商丘 476000）

芪蛭通脈膠囊是經(jīng)河南省食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑，由細(xì)辛、山楂、黃芪、水蛭、紅花、桃仁、當(dāng)歸等10味中藥材加工制成，具有和血益氣，化瘀通脈，強(qiáng)心健步，益腦開竅之功效，用于氣虛血瘀所致的中風(fēng)，冠心病，心肌缺血，高血壓，癥見半身不遂，口眼歪斜，胸悶等[1]，長期的臨床經(jīng)驗(yàn)證明其具有良好的治療作用。山奈素為紅花的主要有效成分[2]，紅花具有活血通經(jīng)，散瘀止痛功效。用于經(jīng)閉，痛經(jīng)，惡露不行，癥瘕痞塊，胸痹心痛，瘀滯腹痛，胸脅刺痛，跌撲損傷，瘡瘍腫痛，對芪蛭通脈膠囊療效的發(fā)揮起重要作用。國內(nèi)現(xiàn)行的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中未收載山奈素含量測定項(xiàng)目，為了有效地控制制劑質(zhì)量，本文采用高效液相色譜法測定了紅花中山奈素的含量，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 AUW-220D電子分析天平 （精密至0.01mg），戴安U3000高效液相色譜儀。

1.2 試藥 山奈素對照品 （批號(hào)：11736-201035，來源：中國藥品生物制品檢定所）；純化水，甲醇為色譜純，磷酸為分析純。芪蛭通脈膠囊 （樣品由柘城縣人民醫(yī)院提供，批號(hào)140626；140412；130904）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱：ODS-C18色譜柱 (5μm，4.6×250mm)，0.4%磷酸： 甲醇 （48∶52） 為流動(dòng)相； 檢測波長367nm； 流速1.0ml·min-1； 進(jìn)樣量10μl。 理論板數(shù)按山奈素峰計(jì)算不低于3000。

2.2 對照品制備 取山奈素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml中含山奈素16.40μg的溶液，作為對照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備 取本品內(nèi)容物約11g（約相當(dāng)于紅花約0.5g），精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液15ml，置平底燒瓶中，加鹽酸溶液(15→37)5ml，搖勻，置水浴中加熱水解30分鐘，立即冷卻，轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.4 線性關(guān)系考察 取山奈素對照品溶液，按照 “2.1”項(xiàng)色譜條件，分別進(jìn)樣2、5、10、15、20μl，記錄山奈素峰面積值，以峰面積 （A）為縱坐標(biāo)，以對照品進(jìn)樣量 （C）為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程：Y=1.1067X-0.1968 r=0.9999。結(jié)果顯示，在0.0328～0.3280μg范圍內(nèi)山奈素進(jìn)樣量與峰面積值呈良好的線性關(guān)系。

2.5 干擾試驗(yàn) 取不含紅花的陰性樣品 （自制）約11g，照供試品溶液制備方法制備，注入液相色譜儀，進(jìn)樣量10μl，陰性對照液對測定無干擾，結(jié)果見圖1。

圖1高效液相色譜圖

2.6 精密度試驗(yàn) 取同一濃度的對照品溶液 （16.40μg/ml），重復(fù)進(jìn)樣6次，每次10μl，測定山奈素峰面積，RSD=0.44%(n=6)，表明儀器精密度良好。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一濃度供試品溶液，分別在0、2、4、8、12h進(jìn)樣測定，結(jié)果山奈素峰面積RSD=0.94%，顯示供試品溶液在12小時(shí)內(nèi)峰面積基本穩(wěn)定。2.8加樣回收率試驗(yàn) 稱取已知含量為0.04714mg/g的樣品9份，精密稱定，分別精密加入對照品儲(chǔ)備液（0.1040mg/ml） 1ml、 2ml、 3ml， 按照供試品溶液制備方法制備，按照 “2.1”項(xiàng)色譜條件，分別測定，結(jié)果見表1。

表1加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.9 含量測定 取3批樣品，按制備供試品溶液方法制備樣品溶液，按照 “2.1”項(xiàng)色譜條件測定，按外標(biāo)法計(jì)算山奈素的含量，結(jié)果見表2。

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3 討論

芪蛭通脈膠囊是醫(yī)院制劑，為了保證藥品質(zhì)量，以其中的紅花所含山奈素為質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，采用了高效液相色譜法測定制劑中山奈素的含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，高效液相色譜法用于芪蛭通脈膠囊的質(zhì)量控制，方法簡便快捷，穩(wěn)定，結(jié)果準(zhǔn)確。

[1]河南省醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑標(biāo)準(zhǔn)．豫藥制字：Z20120776.

[2]國家藥典委員會(huì)中華人民共和國藥典(一部)[S]，北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：141-142.