北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部清潔級動物實驗設(shè)施發(fā)展與管理現(xiàn)狀

田 楓，張云鳳，馬利偉，鄭振輝

（1.北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實驗動物科學(xué)部，北京100191；2.北京大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)系，北京100191）

目前大學(xué)及科研院所的動物實驗設(shè)施已成為生命科學(xué)研究的重要支撐條件。北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部及各大附屬醫(yī)院涉及大鼠、小鼠的動物實驗主要在醫(yī)學(xué)部實驗動物科學(xué)部清潔級動物設(shè)施中進行，該設(shè)施的硬件條件及軟件水平直接影響到科研數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性［1］。建立合理的設(shè)施布局、完善設(shè)施管理體系勢在必行。本文就醫(yī)學(xué)部清潔級動物實驗設(shè)施發(fā)展、運行與管理的現(xiàn)狀進行總結(jié)并對所存在的問題加以探討，以期能夠為科研人員提供更好的服務(wù)。

1 清潔級動物實驗設(shè)施發(fā)展歷史

北京大學(xué)實驗動物科學(xué)部于1984年12月成立，現(xiàn)擁有實驗動物設(shè)施約5 000m2，包括1984年建成的2 400m2的舊實驗動物樓、2002年投入使用的1 719m2的新實驗動物樓、科研及動物質(zhì)量監(jiān)測樓320m2及其他附屬設(shè)施約300m2。

由于在20世紀(jì)90年代末國內(nèi)的科研工作仍普遍應(yīng)用普通級的大鼠、小鼠進行試驗。因此，清潔級動物設(shè)施的前身是1997年9月成立的普通級動物實驗設(shè)施，位于監(jiān)測樓的1層。普通級動物實驗設(shè)施1997年最初為2名工作人員，設(shè)施的面積僅為約160m2，涉及動物實驗的單位僅為4個～5個，進行的動物實驗10項左右。1999年將舊動物樓的4層從繁育普通級大鼠、小鼠改為承接動物實驗，納入到動物實驗設(shè)施中，面積增加到約760m2，工作人員7人。隨著北京市實驗動物管理辦公室的“從2003年起必須使用清潔級及以上級別的嚙齒類動物進行實驗（教學(xué)用動物除外）”的規(guī)定出臺，普通級動物設(shè)施改造升級為清潔級動物實驗設(shè)施，取得了北京市科學(xué)技術(shù)委員會頒發(fā)的屏障環(huán)境大鼠、小鼠使用許可證。同時將舊動物樓的3層及新動物樓1層亦改為動物實驗設(shè)施，面積增加到約1 500m2，工作人員達到22人。2003年至今，我們對清潔級動物實驗設(shè)施、設(shè)備進行了一系列改造和更新，不斷改善動物實驗條件。如2004年對3、4層的墻面進行粉刷和裝修；2005年添置籠架、層流柜等設(shè)備。2006年更換了全部高效空氣過濾器；2007年添置超凈工作臺等設(shè)備；2009年對舊動物樓外立面進行改造及樓頂防水工程；2009年建立了轉(zhuǎn)基因動物服務(wù)平臺，現(xiàn)為分子心血管學(xué)教育部重點實驗室轉(zhuǎn)基因動物公共平臺；2010年-2013年舊動物樓添置了IVC動物飼養(yǎng)設(shè)備35余套，極大地改善了動物飼養(yǎng)條件；2013年將舊動物樓2層進行全面裝修改造，再次擴大了設(shè)施面積。目前累計設(shè)施面積已達到約2 000m2，工作人員達到30人，具有博士學(xué)位1人，本科學(xué)歷1人，大專學(xué)歷6人，高級技術(shù)工人4人。由此可見，10年的發(fā)展歷程中，設(shè)施面積擴大了12.5倍，人員增加了15倍。

清潔級動物實驗設(shè)施現(xiàn)為醫(yī)學(xué)部及附屬醫(yī)院提供基因修飾大鼠、小鼠的繁育及飼養(yǎng)管理服務(wù)約100項；每年協(xié)助100多個科室完成大鼠、小鼠動物實驗300項/次～400項/次。

2 清潔級動物實驗設(shè)施運行與管理現(xiàn)狀

清潔級動物實驗設(shè)施的管理涉及到設(shè)施與設(shè)備的運行管理、工作人員的管理及實驗人員的管理三大方面，三方面緊密結(jié)合，不可分割。

2.1 設(shè)施及設(shè)備管理

由于舊動物樓已建成30年，當(dāng)時的設(shè)計理念已不符合當(dāng)今的清潔級動物設(shè)施的發(fā)展要求。在現(xiàn)有的條件下，我們盡可能保證設(shè)施的正常有序的運行。進入清潔級動物實驗設(shè)施的一切物品都需要經(jīng)過滅菌、消毒后才可進入。能耐高溫高壓物品，如隔離服、墊料、籠具、水瓶等均經(jīng)高壓滅菌器滅菌。不能高壓的物品，可經(jīng)消毒液消毒的儀器設(shè)備，如跑臺、溫箱、血壓測定裝置等用消毒液擦拭后進入屏障環(huán)境。飼料采用Co60輻射滅菌的全價飼料。

每天定時觀察并記錄設(shè)施內(nèi)各動物實驗室的溫度、濕度以及各區(qū)域壓力差。

每天工作結(jié)束后，對設(shè)施內(nèi)的臺面、地面清潔后用次氯酸鈉消毒液擦拭消毒，每周六定期對環(huán)境進行噴霧消毒。為了避免細菌的耐藥性，過氧乙酸和新潔爾滅消毒液輪換使用［2］。

目前動物實驗設(shè)施中多為IVC籠具，IVC的維護、保養(yǎng)與管理非常重要。要求做到：①責(zé)任明確：定人管理、定期保養(yǎng)、定點使用、定期檢較防塵、防潮、防震、防脫、防松、防漏；②每天檢查IVC主機的參數(shù)，做好記錄，特別注意電壓；③檢查籠內(nèi)外壓差的數(shù)值，更換過濾膜。

更換機箱內(nèi)濾膜的程序為初效→中效→高效過濾膜。更換濾膜的時間初效為1個月～3個月，中效6個月～9個月，高效12個月～18個月。

設(shè)施內(nèi)的照明、門窗、超凈工作臺如出現(xiàn)問題及時維修，確保動物實驗不受影響。

動物尸體及廢棄物每日放在專用醫(yī)用廢棄物袋中，暫時保存在設(shè)施內(nèi)低溫冰柜中，每日由專門的工作人員負責(zé)運送到醫(yī)學(xué)部動物尸體房中存放，定期由專業(yè)的公司進行焚燒處理。

2.2 工作人員的管理

工作人員需持有北京市實驗動物協(xié)會頒發(fā)的北京市實驗動物從業(yè)人員崗位證書方能進行工作。需熟悉掌握屏障環(huán)境動物設(shè)施設(shè)備的基本性能和使用方法、保證系統(tǒng)正常運行的各種程序。定期對工作人員進行培訓(xùn)，樹立正確的操作規(guī)程和無菌操作觀念，加強服務(wù)意識教育，要求對待實驗人員態(tài)度和藹、耐心。每年一次對工作人員進行體檢。

工作人員日常工作應(yīng)嚴(yán)格按照實驗室的操作規(guī)程進行。飼養(yǎng)管理人員、洗刷消毒人員、高壓消毒人員、外圍輔助人員均按照相應(yīng)的工作職責(zé)和工作流程進行工作，而且要求互相配合。如有違規(guī)情況發(fā)生，除口頭批評教育外，給予一定的經(jīng)濟懲罰。

2.3 實驗人員的管理

實驗人員涉及面廣，流動性大，管理具有一定的難度。要求實驗人員需持有北京市實驗動物協(xié)會頒發(fā)的北京市實驗動物從業(yè)人員崗位證書。申請實驗時需到北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實驗動物科學(xué)部網(wǎng)站下載清潔級動物實驗申請表、并需簽署動物實驗知情同意書，填寫完整發(fā)送到相應(yīng)的郵箱，等待審核、批準(zhǔn)。我們制定了清潔級動物實驗室使用細則，制作成展板懸掛在各個樓層。包括動物實驗執(zhí)行程序、實驗人員須知、動物實驗室管理規(guī)定三個方面，要求實驗人員必須嚴(yán)格遵守，如果出現(xiàn)違規(guī)現(xiàn)象，經(jīng)工作人員及時提醒仍不改正，請導(dǎo)師協(xié)助解決，若仍不改正，將拒絕其進入設(shè)施。

為了嚴(yán)格控制人員的進出，最近新安裝了門禁系統(tǒng)，減少了人員的隨意進出，使管理更加有序。

3 存在的問題及分析

3.1 基因修飾大鼠、小鼠繁育管理中的問題

隨著基因修飾大鼠、小鼠的廣泛使用，如何管理是實驗動物管理人員需要面對的一個嶄新課題，也是一個難題。

3.1.1 目前基因修飾大鼠、小鼠的引進及繁育現(xiàn)狀

目前長期在清潔級動物設(shè)施中繁育的的基因修飾大鼠、小鼠已達100多個大類，來源相當(dāng)復(fù)雜，有的從國外進口，有的從國內(nèi)的科研院所、公司引進。我們要求引進的動物，必需具備官方正規(guī)的近3個月健康檢測報告方可進入清潔級動物實驗設(shè)施中。但動物實驗設(shè)施中人員流動大，基因修飾動物在設(shè)施中長期繁育，是非常不安全的。

3.1.2 正確的繁育保種方法 由于引進的動物數(shù)量較少，需要長期繁育的動物，應(yīng)在繁育到一定數(shù)量的情況下，通過剖腹凈化，進入實驗動物生產(chǎn)設(shè)施中保種，繁育。在生產(chǎn)設(shè)施中繁育保種的動物，13年來經(jīng)北京市實驗動物管理辦公室質(zhì)量檢測，全部合格，符合國家標(biāo)準(zhǔn)。當(dāng)實驗人員應(yīng)用時從生產(chǎn)設(shè)施中取出到動物實驗設(shè)施中進行實驗。但是這樣的做法可能加重了生產(chǎn)設(shè)施的負擔(dān)及實驗人員的經(jīng)濟負擔(dān)。

3.2 有機整合動物實驗設(shè)備

科研工作中，越來越多的實驗需要借助小動物活體成像儀、CT等實驗設(shè)備進行實驗，而我們不具備這樣的條件，實驗者必須將動物拿出屏障環(huán)境才可進行實驗，而動物一旦離開屏障環(huán)境，是不允許再進入的。但許多實驗需要在進行活體成像實驗后繼續(xù)進行，這樣為實驗人員帶來極大的不便。如果將醫(yī)學(xué)部現(xiàn)有的小動物活體成像儀等設(shè)備進行有機的整合，合理安排，安放在動物部屏障環(huán)境內(nèi)，將為廣大科研工作者提供諸多便利。

3.3 實驗動物從業(yè)人員素質(zhì)問題

由于飼養(yǎng)管理工作的性質(zhì)，飼養(yǎng)管理從業(yè)人員的整體素質(zhì)偏低是不可回避的事實。面對科研人員的動物實驗要求可能理解不透徹或不甚理解。因此，除加強對現(xiàn)有飼養(yǎng)管理人員的培訓(xùn)外，今后將更多的吸納具有大專以上學(xué)歷具有相關(guān)背景知識的人員從事動物實驗服務(wù)工作，根本上提高飼養(yǎng)人員素質(zhì)。

4 小結(jié)

綜上所述，北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部清潔級動物實驗設(shè)施已成為學(xué)校及附屬醫(yī)院科研條件重要組成部分，經(jīng)過10多年的發(fā)展，盡管面臨一些困難，但始終在良性循環(huán)的軌道上運轉(zhuǎn)。

［1］黃海定，曾 星，鄧時貴，等.大學(xué)附屬醫(yī)院動物實驗設(shè)施的運行管理［J］.現(xiàn)代醫(yī)院，2010，10（6）：119-121.

［2］黃文革，郭芬芬，陳鳳英，等.我校屏障系統(tǒng)動物實驗設(shè)施的綜合管理［J］.中國比較醫(yī)學(xué)雜志，2010，20（1）：170-172.