高歡，王文娜，孫琦，張赫，楊曉虹，董雷，b※

(吉林大學a．藥學院；b．第一醫(yī)院，長春130021)

白蘞為葡萄科蛇葡萄屬植物白蘞[Ampelopsisjaponica(Thunb) Makino]的干燥塊根，又名白根、五爪藤、山地瓜等。首載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，能夠清熱解毒、消癰散結(jié)、生肌止痛。白蘞的化學成分包括甾醇及苷類[1，2]、有機酸類[3]、三萜類及蒽醌類等[1，4]。本試驗首次使用水蒸氣蒸餾法提取白蘞揮發(fā)油[5～8]，應用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)技術(shù)對白蘞揮發(fā)油進行化學成分分析，為白蘞藥材的進一步開發(fā)利用提供研究基礎。

1 材料與儀器

HP5988A型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國Hewlett-Packard公司)。藥材白蘞(吉林省長春市吉林大藥房，經(jīng)吉林大學生藥教研室王廣樹教授鑒定為白蘞的塊根)，所用試劑均為分析純。

2 實驗方法

2.1 白蘞揮發(fā)油的制備

按《中國藥典》(2010年版)[9]揮發(fā)油測定法(甲法)操作。稱取白蘞200g置于揮發(fā)油提取器中，加入500mL蒸餾水提取10h，經(jīng)乙醚萃取、無水硫酸鈉干燥后，揮凈乙醚得揮發(fā)油，計算提取率。

2.2 氣相色譜條件

色譜柱為HP-5MS 5% Phenyl Methyl Siloxane 60m×0.25mm×0.25μm彈性石英毛細管柱；進樣口溫度200℃，傳輸線溫度280℃；載氣為高純度氦氣；流速1.0mL/min；分流比40∶1；進樣量2μL；升溫程序：柱溫60℃，保持2min，以10℃/min升至120℃，保持3min，繼續(xù)以5℃/min升至280℃，保持10min，再以20℃/min升至320℃。

2.3 質(zhì)譜條件

離子源為EI源，電子轟擊能量70ev；離子源溫度230℃；加速電壓34.6V；分辨率2 500；掃描范圍50aμm～800aμm；倍增器電壓1 341V；NIST-98標準質(zhì)譜圖庫。

3 結(jié)果與討論

用毛細管氣相色譜-質(zhì)譜法分析樣品，得其總離子流圖(TIC)，見圖1。利用水蒸氣蒸餾法制備白蘞揮發(fā)油，得到淡黃色油狀物0.57g，提取率0.29%。本實驗從白蘞揮發(fā)油中分離鑒定出14個化合物，用峰面積歸一化法測定樣品中各組分的相對含量，經(jīng)計算機數(shù)據(jù)處理以及NIST-98標準質(zhì)譜圖庫檢索鑒定各種化學成分，確定出白蘞揮發(fā)油的化學組分，結(jié)果見表1。

圖1 白蘞揮發(fā)油總離子流圖

表1白蘞揮發(fā)油的化學成分

V Analysis chemical constituent of essential oil in Ampelopsis japonica(Thunb) Makino

本實驗從白蘞揮發(fā)油中分離鑒定出14個化合物，占揮發(fā)油總量的99.997%。其中芳姜黃酮(21.465%)、2-甲基-6-對甲苯基-2-庚烯醇(17.438%)和蒽(14.224%)為白蘞揮發(fā)油的主要成分。芳姜黃酮屬于萜烯類化合物，具有抗菌、抗氧化、抗蛇毒等多種生物活性。季明杰[10]通過DNA梯狀圖譜和流式細胞術(shù)證明，芳姜黃酮能夠選擇性地誘導腫瘤細胞凋亡，對白血病細胞作用效果尤為明顯；Lee[11]發(fā)現(xiàn)芳姜黃酮能夠有效抑制促凝集因素膠原質(zhì)和花生四烯酸的代謝，影響血小板凝集，進而預防血栓的形成。本實驗結(jié)果為進一步對白蘞的開發(fā)和利用提供了可靠的實驗數(shù)據(jù)和理論依據(jù)。

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