吳健 劉才宇 汪德尚 潘祖忠 劉義新

摘要[目的]驗(yàn)證K系抑菌劑對(duì)紫長(zhǎng)茄細(xì)菌性枯萎病的防治效果。[方法]田間試驗(yàn)驗(yàn)證防治效果，實(shí)驗(yàn)室平板計(jì)數(shù)法進(jìn)行菌藥互作關(guān)系研究。[結(jié)果]室內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果表明，K3、K5濃度梯度為0、2、4、6、8、10 mg/L時(shí)，對(duì)病菌的抑制效果逐漸增強(qiáng)，不僅菌落個(gè)數(shù)依次減少，且菌落體積變小，6 mg/L以上時(shí)，無(wú)菌落生長(zhǎng)，即抑菌率達(dá)100%。在田間防效試驗(yàn)條件下，K3、K5抑菌劑對(duì)紫長(zhǎng)茄枯萎病防效顯著，K5防效達(dá)70%～75%；K3防效為65%～70%。[結(jié)論]K系抑菌劑對(duì)紫長(zhǎng)茄細(xì)菌性枯萎病有很好的防治效果。

關(guān)鍵詞紫長(zhǎng)茄；細(xì)菌性枯萎?。籏系抑菌劑

中圖分類號(hào)S436.3文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)0517-6611（2014）01-00071-02

作者簡(jiǎn)介吳?。?990- ），男，安徽安慶人，碩士研究生，研究方向：土壤生態(tài)-土傳病害控制，Email：wuj927@mail.ustc.edu.cn。*通訊作者，副教授，博士，碩士生導(dǎo)師，從事土壤生態(tài)研究，Email：liuyixin@ustc.edu.cn。

收稿日期20131209茄子黃萎病、枯萎病和青枯病均導(dǎo)致植株萎蔫，癥狀表現(xiàn)相似[1-3]，易被人們混淆。其中，黃萎病多在定植后發(fā)生，表現(xiàn)為自下而上枯萎，有些枝條發(fā)黃，有些則不[4]；枯萎病多在結(jié)果初期發(fā)生，也是自下而上枯萎，多呈現(xiàn)一片葉半邊黃半邊正?，F(xiàn)象[3]；青枯病發(fā)生后，葉色青綠呈開(kāi)水燙傷樣、后至枯萎[5]。三者病株維管束均有變褐現(xiàn)象，但濕度大時(shí)青枯病病株莖橫切面可擠出乳白色粘液[3]。

2013年舒城縣蔬菜基地的茄子出現(xiàn)局域萎蔫，從取回的病株上分離得到的病原主要為細(xì)菌，純化后，其菌落特征與青枯菌菌落相似，結(jié)合典型癥狀分析，判定該癥狀為細(xì)菌性枯萎病。中國(guó)科技大學(xué)土壤微生態(tài)課題組研究得出擬氨基多糖K系抑菌劑對(duì)煙草黑脛病和青枯病有較好的抑制作用和防治效果[5-6]；分析了全國(guó)多個(gè)地區(qū)的青枯菌多態(tài)性特征，并將這些菌的種內(nèi)變異加以聚類[7]；比較了農(nóng)用鏈霉素和K系抑菌劑對(duì)青枯菌的抑制率，結(jié)果表明，K系抑菌劑的效果顯著高于前者[8]；也曾將實(shí)驗(yàn)室分離純化的致病性青枯菌回接到植物體，繼而逐漸出現(xiàn)枯萎癥狀。筆者在以往試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，研究了K3、K5抑菌劑用于已出現(xiàn)萎蔫癥狀的紫長(zhǎng)茄上，并進(jìn)行了田間試驗(yàn)，旨在為紫長(zhǎng)茄細(xì)菌性枯萎病的防治提供科學(xué)依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料K3、K5抑菌劑（可溶粉劑）由中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)地空學(xué)院土壤微生態(tài)實(shí)驗(yàn)室研制；解析出K3實(shí)驗(yàn)分子式：C21H47O14N9S4；K5分子式待解析。試驗(yàn)田塊為安徽省六安市舒城縣現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技示范園蔬菜基地試驗(yàn)田。供試作物為紫長(zhǎng)茄，品種為黑豐長(zhǎng)美?？菸〔【?013年5月在安徽六安市舒城縣蔬菜基地紫長(zhǎng)茄細(xì)菌性枯萎病植物體上分離得到。

1.2方法

1.2.1室內(nèi)抑菌試驗(yàn)。

1.2.1.1菌懸液的配制。挑取斜面保存的枯萎病菌菌落，接入配好的營(yíng)養(yǎng)瓊脂（牛肉膏、蛋白胨）NA液體培養(yǎng)基[9-10]，放入35 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18 h，制成菌懸液。

1.2.1.2含藥培養(yǎng)基的制備。分別配制K3、K5抑菌劑（梯度為0、2、4、6、8、10 mg/L）的母液1 000 mg/L。分別取60.0、59.9、59.8、59.6、59.5、59.4 ml液體培養(yǎng)基，加入0.9 g瓊脂以后，與槍頭、培養(yǎng)皿、無(wú)菌水一起滅菌，冷卻至40～50 ℃后分別加入0.12、0.24、0.36、0.48、0.60 ml母液，每個(gè)濃度倒6個(gè)培養(yǎng)皿（3個(gè)備用），做標(biāo)記，待冷卻為固體培養(yǎng)基平板。

1.2.1.3抑菌效果的測(cè)定。將配制好的菌懸液稀釋為2×103 cfu/ml左右，在無(wú)菌條件下，用移液槍取80 μl稀釋液滴至制備好的固體培養(yǎng)基平板表面，并用涂布棒將其涂均勻，放置10～20 min后移入35 ℃恒溫箱中，18 h后觀察并記錄各平板表面菌落大小和個(gè)數(shù)。

1.2.2田間試驗(yàn)。

1.2.2.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)。共設(shè)置3個(gè)處理，每處理3次重復(fù)，共9個(gè)小區(qū)，每區(qū)20 m2。處理①（空白對(duì)照）：移栽后，按當(dāng)?shù)爻Ｒ?guī)灌清水定根，每株灌200 ml左右。處理②：移栽后，用K5小袋（10 g）對(duì)水50 kg，1/5 000倍灌根，每株200 ml左右。處理③：移栽后，用K3小袋（10 g）對(duì)水50 kg，1/5 000倍灌根，每株200 ml左右。

于2013年4月19日移植，移植當(dāng)天進(jìn)行了上述處理。于2013年5月22日分別追灌藥劑1次，用量同前。試驗(yàn)處理后，于發(fā)病中期和發(fā)病高峰期進(jìn)行了田間病情調(diào)查，分別為2013年6月19、7月17日，并將2次結(jié)果進(jìn)行比較，以分析藥劑對(duì)枯萎病的防治效果。

1.2.2.2藥效調(diào)查方法。藥效按小區(qū)調(diào)查，記錄每小區(qū)總株數(shù)、病級(jí)、病情指數(shù)。分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)如下：0級(jí)：植株健壯無(wú)??；Ⅰ級(jí)：植株頂端1～2片葉出現(xiàn)萎蔫現(xiàn)象；Ⅲ級(jí)：植株呈萎蔫葉片3～5片（晚間恢復(fù)）；Ⅴ級(jí)：植株有1/3葉片萎蔫或側(cè)枝萎蔫。Ⅶ級(jí)：植株有1/2葉、枝萎蔫，無(wú)明顯恢復(fù)；Ⅸ級(jí)：植株全株萎蔫枯死。

計(jì)算病株率、病情指數(shù)、防治效果公式如下：病情指數(shù)=∑（各級(jí)病株數(shù)×相對(duì)級(jí)數(shù)值）/（調(diào)查總株數(shù)×9）×100；發(fā)病率（%）=發(fā)病株數(shù)/調(diào)查總株數(shù)×100；病株防效（%）=（對(duì)照區(qū)病株數(shù)-施藥區(qū)病株數(shù)）/對(duì)照區(qū)病株數(shù)×100。

1.3數(shù)據(jù)分析采用Excel 2007、GraphPad Prism 5軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

2結(jié)果與分析

2.1室內(nèi)抑菌效果

2.1.1K3抑菌效果。從圖1、2可見(jiàn)，隨著K3濃度的增加，平板上菌落個(gè)數(shù)逐漸減少。0 mg/L時(shí)菌落個(gè)數(shù)為150余個(gè)，2、4 mg/L時(shí)菌落個(gè)數(shù)小于50個(gè)，6 mg/L時(shí)僅有25個(gè)菌落，>6 mg/L時(shí)無(wú)菌落出現(xiàn)，其中，2～6 mg/L時(shí)K3抑菌率60%以上，8 mg/L時(shí)K3的抑菌率達(dá)100%。