王霖嬌++盛茂銀

摘要：為了研究4種生長(zhǎng)素對(duì)刺梨（Rosa roxbunghii Tratt）離體枝條生根的影響，建立刺梨簡(jiǎn)單高效離體繁殖技術(shù)，利用不同濃度（10、30、70、90 mg/L）的萘乙酸、赤霉素、吲哚乙酸和吲哚丁酸溶液，分別對(duì)一年生、二年生、多年生等3個(gè)時(shí)期的刺梨枝條進(jìn)行離體處理，在室溫（20～25 ℃）下培養(yǎng)15 d后測(cè)定其在不同濃度的4種生長(zhǎng)素處理下的生根情況。結(jié)果表明，不同時(shí)期刺梨枝條在不同激素溶液及同一激素不同濃度中的生根率均不相同。其中，二年生與多年生枝條生根率極顯著高于一年生枝條（P<0.01）；吲哚乙酸與吲哚丁酸對(duì)刺梨兩年生與多年生離體枝條生根效應(yīng)較好。10～70 mg/L的吲哚丁酸和吲哚乙酸對(duì)刺梨枝條的生根效應(yīng)顯著，生根率高、生根數(shù)較多，移栽土中的成活率較高，生長(zhǎng)良好。結(jié)合再生苗與移栽生長(zhǎng)情況，刺梨離體再生繁殖應(yīng)選用二年生離體枝條吲哚乙酸溶液50 mg/L處理。

關(guān)鍵詞：刺梨（Rosa roxbunghii Tratt）；離體繁殖；生根；生長(zhǎng)素

中圖分類號(hào)：S661.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2014）02-0441-03

Effects of Four Growth Hormones on Branch Cuttage of Thorn Pear

（Rosa roxburghii Tratt）

WANG Lin-jiao1a，SHENG Mao-yin1b，2

（1a.School of Vocation and Technology； 1b.Institute of South China Karst， Guizhou Normal University， Guiyang 550001， China； 2.The State Key Laboratory Incubation Base for Karst Mountain Ecology Environment of Guizhou Province， Guiyang 550001， China）

Abstract： Effects of four growth hormones on branch cuttage were studied and the simple and efficient technique for the in vitro propagation of thorn pear was developed. The annual， biennial and perennial in vitro branches of thorn pear were treated in different doses（10， 30， 50， 70， 90 mg/L） of NAA， GA3， IAA， and IBA， respectively. The rootage ratios were calculated after 15 days cultivating in room temperature（20～25 ℃）. The results showed that the rootage ability of biennial and perennial braches was significantly stronger than that of annual branches（P<0.01）. The rootage ratios of branches treated by IAA and IBA are significantly higher than that treatedly NAA and GA3. Especially， the 10～70 mg/L concentration of IBA and IAA had higher effect of rootage on branches at all three age stages than others. The regrowth survive form raised more easily. The studies indicated that the in vitro propagation of thorn pear could use the biennial branches treated by 50 mg/L IAA.

Key words： Rosa roxburghii Tratt； in vitro propagation； rooting； growth hormone

刺梨（Rosa roxbunghii Tratt）是薔薇科多年生落葉灌木，是云貴高原及攀西高原特有的野生資源。貴州省為刺梨主產(chǎn)區(qū)，年產(chǎn)量超過(guò)1 500萬(wàn)kg，云南省次之，川東南、桂西北、湘西、鄂西南、陜南均有分布[1]。刺梨的藥用價(jià)值很高，其花、葉、果均可入藥，具有健胃、消食、滋補(bǔ)、止瀉等功效，特別是刺梨富含超氧化物歧化酶（簡(jiǎn)稱SOD），SOD是國(guó)際公認(rèn)具有抗衰老、防癌作用的活性物質(zhì)，還具有抗病毒、抗輻射等作用，在心血管、消化系統(tǒng)和各種腫瘤疾病防治方面，其應(yīng)用十分廣泛[2]。刺梨果實(shí)同時(shí)也是加工保健食品的上等原料，其富含糖、維生素、胡蘿卜素、有機(jī)酸、20多種氨基酸和10余種對(duì)人體有益的微量元素[3]，尤其是維生素C含量極高，每100 g鮮果中含量841.58～3 541.13 mg[4]。刺梨也是很好的觀賞花卉和綠籬植物。

我國(guó)長(zhǎng)江流域氣候適合刺梨的生長(zhǎng)，刺梨加工品符合現(xiàn)代食品營(yíng)養(yǎng)、保健及綠色、有機(jī)的要求，加強(qiáng)刺梨生產(chǎn)、開發(fā)利用研究，發(fā)展我國(guó)的刺梨栽培與加工業(yè)，不僅可為消費(fèi)者提供優(yōu)質(zhì)的保健食品，同時(shí)對(duì)退耕還林及提高廣大山區(qū)群眾的生活水平具有重要意義[5]。隨著當(dāng)今國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)對(duì)保健食品和飲料需求量的不斷增加，刺梨產(chǎn)業(yè)的發(fā)展已展示出了廣闊的市場(chǎng)前景[6]。但目前刺梨還處于半野生生長(zhǎng)狀態(tài)，刺梨產(chǎn)品加工，完全依賴野生資源提供原料。盡管我國(guó)野生刺梨資源豐富，但野生資源分布分散，且資源的破壞日趨嚴(yán)重，可供利用資源難以滿足大規(guī)模加工的需要；且野生資源質(zhì)量良莠不齊，品質(zhì)較低，加工適應(yīng)性較差，難以保證產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定和提高[7，8]。因此，刺梨優(yōu)良品種的選育與人工種植研究迫在眉睫。本研究利用不同濃度4種生長(zhǎng)素分別對(duì)一年生、二年生、多年生刺梨枝條進(jìn)行離體繁殖研究，建立了刺梨高效簡(jiǎn)單離體繁殖技術(shù)體系，為刺梨人工種植等進(jìn)一步開發(fā)利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料及藥品

刺梨離體枝條來(lái)自于貴州省貞豐縣野生植株。萘乙酸（NAA）、赤霉素（GA3）、吲哚乙酸（IAA）、吲哚丁酸（IBA），均購(gòu)自上海研拓生物科技有限公司。

1.2 刺梨離體枝條的處理

將不同年齡段（一年生、二年生、多年生）的枝條剪下，每一年齡段枝條分成兩組：試驗(yàn)組和對(duì)照組。試驗(yàn)組枝條分別用浸有不同濃度（10、30、50、70、90 mg/L）藥品溶液（NAA、GA3、IAA和IBA）的干凈濕潤(rùn)棉紗布裹住下端，對(duì)照組的枝條用純水處理，每個(gè)處理至少有10個(gè)重復(fù)。上述處理完畢的枝條放在培養(yǎng)盤或培養(yǎng)杯中，再轉(zhuǎn)入透光容器內(nèi)，在24 ℃光照培養(yǎng)箱中進(jìn)行保濕培養(yǎng)。每天觀察生根情況，15 d后記錄各枝條的生根情況，統(tǒng)計(jì)各處理生根枝條數(shù)，計(jì)算生根率。待多數(shù)根長(zhǎng)到2～5 cm時(shí)，移栽到土壤中觀察其形態(tài)及生長(zhǎng)發(fā)育情況。

1.3 數(shù)據(jù)分析

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理刺梨離體枝條生根情況

2.2 不同年齡段刺梨枝條的生根效應(yīng)

將所有處理的刺梨離體枝條生根率按不同年齡段匯總計(jì)算平均生根率結(jié)果見表1。多重比較結(jié)果顯示，二年生與多年生刺梨枝條生根率極顯著高于一年生枝條的生根率（P<0.01），而二年生與多年生刺梨枝條兩者之間的生根率無(wú)顯著差異。

2.3 不同生長(zhǎng)素對(duì)刺梨枝條的生根效應(yīng)

將所有處理的刺梨離體枝條生根率按不同生長(zhǎng)素種類匯總計(jì)算平均生根率結(jié)果見表2。多重比較結(jié)果可以看出，吲哚丁酸和吲哚乙酸的平均生根率均極顯著高于萘乙酸和赤霉素（P<0.01），萘乙酸的平均生根率顯著高于赤霉素（P<0.05）。

2.4 4種生長(zhǎng)素處理的最佳刺梨生根枝條比較

吲哚乙酸與吲哚丁酸對(duì)刺梨二年生與多年生離體枝條生根效應(yīng)較好。當(dāng)處理兩年生離體枝條時(shí)，吲哚乙酸50 mg/L生根率最高；當(dāng)處理多年生離體枝條時(shí)，吲哚乙酸70 mg/L與吲哚丁酸30 mg/L生根率最高。結(jié)合再生苗與移栽生長(zhǎng)情況（圖1），刺梨離體再生繁殖應(yīng)選用兩年生離體枝條吲哚乙酸50 mg/L處理。

3 小結(jié)與討論

由于刺梨極高的藥食兩用價(jià)值，其被利用需求越來(lái)越廣泛，人工種植越來(lái)越重視，因而對(duì)刺梨的高效快速繁殖技術(shù)研究顯得尤為迫切[9]。但迄今為止，刺梨快速繁殖研究一直未能系統(tǒng)地開展，快速繁殖技術(shù)體系尚未建立。高相福[7]開展了刺梨組織培養(yǎng)研究結(jié)果顯示由于刺梨具有大量的SOD以及次生代謝物質(zhì)黃酮類化合物，導(dǎo)致組織培養(yǎng)過(guò)程容易褐化，認(rèn)為組織培養(yǎng)快繁技術(shù)不宜在刺梨產(chǎn)業(yè)實(shí)踐中推廣應(yīng)用。本研究首次系統(tǒng)研究了4種生長(zhǎng)素對(duì)刺梨離體枝條的生根效應(yīng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)刺梨二年生與多年生的離體枝條較一年生的離體枝條更適合作離體繁殖材料；10～70 mg/L的吲哚丁酸和吲哚乙酸處理枝條，生根數(shù)較其他濃度及其他生長(zhǎng)素處理的多，生根時(shí)間也較短，移栽到花盆土壤中后成活，開花、繁殖和結(jié)實(shí)均正常，而萘乙酸和赤霉素處理的離體生根枝條移栽到花盆土壤中后，其成活率低，成活的植株生長(zhǎng)狀況較差，表現(xiàn)為生長(zhǎng)不健壯、新枝很少、開花較少、葉片發(fā)黃。這一結(jié)果對(duì)建立刺梨枝條繁殖技術(shù)體系有重要的指導(dǎo)作用。

黃輝銓等[10]報(bào)道了吲哚乙酸和萘乙酸對(duì)溫州蜜柑嫩枝扦插效果試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)吲哚乙酸處理的蜜柑嫩枝生根率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于萘乙酸，而且發(fā)現(xiàn)吲哚乙酸在60～100 mg/L濃度時(shí)處理效果較佳。馬小軍等[11]對(duì)東北紅豆杉的研究表明，吲哚丁酸對(duì)枝條處理效果較吲哚乙酸好，而本研究中未見二者存在顯著差異。張長(zhǎng)芹等[12]對(duì)幾種高山長(zhǎng)綠杜鵑的扦插繁殖試驗(yàn)表明，嫩枝（尚未木質(zhì)化）不易生根，而老枝（已木質(zhì)化）易生根，與本研究結(jié)果一致。張以忠等[13]研究了4種生長(zhǎng)素對(duì)普通蕎麥枝條生根效應(yīng)，結(jié)果顯示吲哚乙酸與吲哚丁酸各濃度處理的生根效應(yīng)明顯好于萘乙酸和赤霉素，這和本研究結(jié)果一致；張以忠等[13]研究結(jié)果還顯示蕎麥嫩枝比老枝更容易生根，然而本研究卻顯示一年生的嫩枝較二年生、多年生的老枝不容易生根，由此可見，枝條的年齡段、是否木質(zhì)化在不同物種中對(duì)生根的影響是不同的。

參考文獻(xiàn)：

[1] XIANG Q S， XIAO H F， GUO S B， et al. In vitro antioxidant properties of Rosa roxburghii aqueous extracts[J]. Australian Journal of Crop Science，2012，6（5）：854-860.

[2] ZHANG C N， LIU X Z， QIANG H J， et al. Inhibitory effects of Rosa roxburghii Tratt juice on in vitro oxidative modification of low density lipoprotein and on the macrophage growth and cellular cholesteryl ester accumulation induced by oxidized low density lipoprotein[J]. Clinica Chimica Acta，2001，333（1-2）：37-43.

[3] WEI L， LI S Y， HUANG X E，et al. Inhibition of tumor growth in vitro by a combination of extracts from Rosa roxburghii Tratt and Fagopyrum cymosum[J]. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention，2012，13：2409-2414.

[4] 文曉鵬，鄧秀新.利用細(xì)胞學(xué)和分子標(biāo)記檢測(cè)刺梨愈傷組織的遺傳穩(wěn)定性[J].果樹學(xué)報(bào)， 2003，20（6）：467-470.

[5] 樊衛(wèi)國(guó)，安華明，劉國(guó)琴.養(yǎng)分和水分狀況對(duì)刺梨樹體硝酸還原酶活性與氮素營(yíng)養(yǎng)的影響[J]. 果樹學(xué)報(bào)，2007，24（2）：162-167.

[6] 文曉鵬，徐 強(qiáng)，樊衛(wèi)國(guó)，等.刺梨雜種F1代田間抗白粉病的遺傳分析初探[J].園藝學(xué)報(bào)， 2005，32（2）：304-306.

[7] 高相福.刺梨離體快繁研究[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，1994，7（2）：113-115.

[8] 王小平，雍洪俊，杜晉城，等.刺梨四倍體誘導(dǎo)及其ISSR分析[J].北方園藝，2010（17）：158-160.

[9] QIANG X， WEN X P， DENG X X. Isolation of TIR and nonTIR NBS-LRR resistance gene analogues and identification of molecular markers linked to a powdery mildew resistance locus in chestnut rose（Rosa roxburghii Tratt）[J]. Theoretical and Applied Genetics，2005，111（5）：819-830.

[10] 黃輝銓，王志強(qiáng)，董炳清.ABT生根粉對(duì)溫州蜜柑嫩枝扦插效果實(shí)驗(yàn)[J].江西林業(yè)科技，1994（5）：27-28.

[11] 馬小軍，丁萬(wàn)隆，陳 震.東北紅豆杉插枝繁殖的研究[J].中國(guó)中藥雜志，1994，19（6）：337-338.

[12] 張長(zhǎng)芹，馮寶鈞，劉昌禮，等.幾種高山常綠杜鵑的插枝繁殖實(shí)驗(yàn)[J].園藝學(xué)報(bào)，1994，21（3）：307-308.

[13] 張以忠，王霖嬌，白文中，等.四種生長(zhǎng)素對(duì)普通蕎麥枝條生根效應(yīng)的研究[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2004，32（2）：17-20.

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料及藥品

刺梨離體枝條來(lái)自于貴州省貞豐縣野生植株。萘乙酸（NAA）、赤霉素（GA3）、吲哚乙酸（IAA）、吲哚丁酸（IBA），均購(gòu)自上海研拓生物科技有限公司。

1.2 刺梨離體枝條的處理

將不同年齡段（一年生、二年生、多年生）的枝條剪下，每一年齡段枝條分成兩組：試驗(yàn)組和對(duì)照組。試驗(yàn)組枝條分別用浸有不同濃度（10、30、50、70、90 mg/L）藥品溶液（NAA、GA3、IAA和IBA）的干凈濕潤(rùn)棉紗布裹住下端，對(duì)照組的枝條用純水處理，每個(gè)處理至少有10個(gè)重復(fù)。上述處理完畢的枝條放在培養(yǎng)盤或培養(yǎng)杯中，再轉(zhuǎn)入透光容器內(nèi)，在24 ℃光照培養(yǎng)箱中進(jìn)行保濕培養(yǎng)。每天觀察生根情況，15 d后記錄各枝條的生根情況，統(tǒng)計(jì)各處理生根枝條數(shù)，計(jì)算生根率。待多數(shù)根長(zhǎng)到2～5 cm時(shí)，移栽到土壤中觀察其形態(tài)及生長(zhǎng)發(fā)育情況。

1.3 數(shù)據(jù)分析

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理刺梨離體枝條生根情況

2.2 不同年齡段刺梨枝條的生根效應(yīng)

將所有處理的刺梨離體枝條生根率按不同年齡段匯總計(jì)算平均生根率結(jié)果見表1。多重比較結(jié)果顯示，二年生與多年生刺梨枝條生根率極顯著高于一年生枝條的生根率（P<0.01），而二年生與多年生刺梨枝條兩者之間的生根率無(wú)顯著差異。

2.3 不同生長(zhǎng)素對(duì)刺梨枝條的生根效應(yīng)

將所有處理的刺梨離體枝條生根率按不同生長(zhǎng)素種類匯總計(jì)算平均生根率結(jié)果見表2。多重比較結(jié)果可以看出，吲哚丁酸和吲哚乙酸的平均生根率均極顯著高于萘乙酸和赤霉素（P<0.01），萘乙酸的平均生根率顯著高于赤霉素（P<0.05）。

2.4 4種生長(zhǎng)素處理的最佳刺梨生根枝條比較

吲哚乙酸與吲哚丁酸對(duì)刺梨二年生與多年生離體枝條生根效應(yīng)較好。當(dāng)處理兩年生離體枝條時(shí)，吲哚乙酸50 mg/L生根率最高；當(dāng)處理多年生離體枝條時(shí)，吲哚乙酸70 mg/L與吲哚丁酸30 mg/L生根率最高。結(jié)合再生苗與移栽生長(zhǎng)情況（圖1），刺梨離體再生繁殖應(yīng)選用兩年生離體枝條吲哚乙酸50 mg/L處理。

3 小結(jié)與討論

由于刺梨極高的藥食兩用價(jià)值，其被利用需求越來(lái)越廣泛，人工種植越來(lái)越重視，因而對(duì)刺梨的高效快速繁殖技術(shù)研究顯得尤為迫切[9]。但迄今為止，刺梨快速繁殖研究一直未能系統(tǒng)地開展，快速繁殖技術(shù)體系尚未建立。高相福[7]開展了刺梨組織培養(yǎng)研究結(jié)果顯示由于刺梨具有大量的SOD以及次生代謝物質(zhì)黃酮類化合物，導(dǎo)致組織培養(yǎng)過(guò)程容易褐化，認(rèn)為組織培養(yǎng)快繁技術(shù)不宜在刺梨產(chǎn)業(yè)實(shí)踐中推廣應(yīng)用。本研究首次系統(tǒng)研究了4種生長(zhǎng)素對(duì)刺梨離體枝條的生根效應(yīng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)刺梨二年生與多年生的離體枝條較一年生的離體枝條更適合作離體繁殖材料；10～70 mg/L的吲哚丁酸和吲哚乙酸處理枝條，生根數(shù)較其他濃度及其他生長(zhǎng)素處理的多，生根時(shí)間也較短，移栽到花盆土壤中后成活，開花、繁殖和結(jié)實(shí)均正常，而萘乙酸和赤霉素處理的離體生根枝條移栽到花盆土壤中后，其成活率低，成活的植株生長(zhǎng)狀況較差，表現(xiàn)為生長(zhǎng)不健壯、新枝很少、開花較少、葉片發(fā)黃。這一結(jié)果對(duì)建立刺梨枝條繁殖技術(shù)體系有重要的指導(dǎo)作用。

黃輝銓等[10]報(bào)道了吲哚乙酸和萘乙酸對(duì)溫州蜜柑嫩枝扦插效果試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)吲哚乙酸處理的蜜柑嫩枝生根率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于萘乙酸，而且發(fā)現(xiàn)吲哚乙酸在60～100 mg/L濃度時(shí)處理效果較佳。馬小軍等[11]對(duì)東北紅豆杉的研究表明，吲哚丁酸對(duì)枝條處理效果較吲哚乙酸好，而本研究中未見二者存在顯著差異。張長(zhǎng)芹等[12]對(duì)幾種高山長(zhǎng)綠杜鵑的扦插繁殖試驗(yàn)表明，嫩枝（尚未木質(zhì)化）不易生根，而老枝（已木質(zhì)化）易生根，與本研究結(jié)果一致。張以忠等[13]研究了4種生長(zhǎng)素對(duì)普通蕎麥枝條生根效應(yīng)，結(jié)果顯示吲哚乙酸與吲哚丁酸各濃度處理的生根效應(yīng)明顯好于萘乙酸和赤霉素，這和本研究結(jié)果一致；張以忠等[13]研究結(jié)果還顯示蕎麥嫩枝比老枝更容易生根，然而本研究卻顯示一年生的嫩枝較二年生、多年生的老枝不容易生根，由此可見，枝條的年齡段、是否木質(zhì)化在不同物種中對(duì)生根的影響是不同的。

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[3] WEI L， LI S Y， HUANG X E，et al. Inhibition of tumor growth in vitro by a combination of extracts from Rosa roxburghii Tratt and Fagopyrum cymosum[J]. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention，2012，13：2409-2414.

[4] 文曉鵬，鄧秀新.利用細(xì)胞學(xué)和分子標(biāo)記檢測(cè)刺梨愈傷組織的遺傳穩(wěn)定性[J].果樹學(xué)報(bào)， 2003，20（6）：467-470.

[5] 樊衛(wèi)國(guó)，安華明，劉國(guó)琴.養(yǎng)分和水分狀況對(duì)刺梨樹體硝酸還原酶活性與氮素營(yíng)養(yǎng)的影響[J]. 果樹學(xué)報(bào)，2007，24（2）：162-167.

[6] 文曉鵬，徐 強(qiáng)，樊衛(wèi)國(guó)，等.刺梨雜種F1代田間抗白粉病的遺傳分析初探[J].園藝學(xué)報(bào)， 2005，32（2）：304-306.

[7] 高相福.刺梨離體快繁研究[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，1994，7（2）：113-115.

[8] 王小平，雍洪俊，杜晉城，等.刺梨四倍體誘導(dǎo)及其ISSR分析[J].北方園藝，2010（17）：158-160.

[9] QIANG X， WEN X P， DENG X X. Isolation of TIR and nonTIR NBS-LRR resistance gene analogues and identification of molecular markers linked to a powdery mildew resistance locus in chestnut rose（Rosa roxburghii Tratt）[J]. Theoretical and Applied Genetics，2005，111（5）：819-830.

[10] 黃輝銓，王志強(qiáng)，董炳清.ABT生根粉對(duì)溫州蜜柑嫩枝扦插效果實(shí)驗(yàn)[J].江西林業(yè)科技，1994（5）：27-28.

[11] 馬小軍，丁萬(wàn)隆，陳 震.東北紅豆杉插枝繁殖的研究[J].中國(guó)中藥雜志，1994，19（6）：337-338.

[12] 張長(zhǎng)芹，馮寶鈞，劉昌禮，等.幾種高山常綠杜鵑的插枝繁殖實(shí)驗(yàn)[J].園藝學(xué)報(bào)，1994，21（3）：307-308.

[13] 張以忠，王霖嬌，白文中，等.四種生長(zhǎng)素對(duì)普通蕎麥枝條生根效應(yīng)的研究[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2004，32（2）：17-20.

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料及藥品

刺梨離體枝條來(lái)自于貴州省貞豐縣野生植株。萘乙酸（NAA）、赤霉素（GA3）、吲哚乙酸（IAA）、吲哚丁酸（IBA），均購(gòu)自上海研拓生物科技有限公司。

1.2 刺梨離體枝條的處理

將不同年齡段（一年生、二年生、多年生）的枝條剪下，每一年齡段枝條分成兩組：試驗(yàn)組和對(duì)照組。試驗(yàn)組枝條分別用浸有不同濃度（10、30、50、70、90 mg/L）藥品溶液（NAA、GA3、IAA和IBA）的干凈濕潤(rùn)棉紗布裹住下端，對(duì)照組的枝條用純水處理，每個(gè)處理至少有10個(gè)重復(fù)。上述處理完畢的枝條放在培養(yǎng)盤或培養(yǎng)杯中，再轉(zhuǎn)入透光容器內(nèi)，在24 ℃光照培養(yǎng)箱中進(jìn)行保濕培養(yǎng)。每天觀察生根情況，15 d后記錄各枝條的生根情況，統(tǒng)計(jì)各處理生根枝條數(shù)，計(jì)算生根率。待多數(shù)根長(zhǎng)到2～5 cm時(shí)，移栽到土壤中觀察其形態(tài)及生長(zhǎng)發(fā)育情況。

1.3 數(shù)據(jù)分析

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理刺梨離體枝條生根情況

2.2 不同年齡段刺梨枝條的生根效應(yīng)

將所有處理的刺梨離體枝條生根率按不同年齡段匯總計(jì)算平均生根率結(jié)果見表1。多重比較結(jié)果顯示，二年生與多年生刺梨枝條生根率極顯著高于一年生枝條的生根率（P<0.01），而二年生與多年生刺梨枝條兩者之間的生根率無(wú)顯著差異。

2.3 不同生長(zhǎng)素對(duì)刺梨枝條的生根效應(yīng)

將所有處理的刺梨離體枝條生根率按不同生長(zhǎng)素種類匯總計(jì)算平均生根率結(jié)果見表2。多重比較結(jié)果可以看出，吲哚丁酸和吲哚乙酸的平均生根率均極顯著高于萘乙酸和赤霉素（P<0.01），萘乙酸的平均生根率顯著高于赤霉素（P<0.05）。

2.4 4種生長(zhǎng)素處理的最佳刺梨生根枝條比較

吲哚乙酸與吲哚丁酸對(duì)刺梨二年生與多年生離體枝條生根效應(yīng)較好。當(dāng)處理兩年生離體枝條時(shí)，吲哚乙酸50 mg/L生根率最高；當(dāng)處理多年生離體枝條時(shí)，吲哚乙酸70 mg/L與吲哚丁酸30 mg/L生根率最高。結(jié)合再生苗與移栽生長(zhǎng)情況（圖1），刺梨離體再生繁殖應(yīng)選用兩年生離體枝條吲哚乙酸50 mg/L處理。

3 小結(jié)與討論

由于刺梨極高的藥食兩用價(jià)值，其被利用需求越來(lái)越廣泛，人工種植越來(lái)越重視，因而對(duì)刺梨的高效快速繁殖技術(shù)研究顯得尤為迫切[9]。但迄今為止，刺梨快速繁殖研究一直未能系統(tǒng)地開展，快速繁殖技術(shù)體系尚未建立。高相福[7]開展了刺梨組織培養(yǎng)研究結(jié)果顯示由于刺梨具有大量的SOD以及次生代謝物質(zhì)黃酮類化合物，導(dǎo)致組織培養(yǎng)過(guò)程容易褐化，認(rèn)為組織培養(yǎng)快繁技術(shù)不宜在刺梨產(chǎn)業(yè)實(shí)踐中推廣應(yīng)用。本研究首次系統(tǒng)研究了4種生長(zhǎng)素對(duì)刺梨離體枝條的生根效應(yīng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)刺梨二年生與多年生的離體枝條較一年生的離體枝條更適合作離體繁殖材料；10～70 mg/L的吲哚丁酸和吲哚乙酸處理枝條，生根數(shù)較其他濃度及其他生長(zhǎng)素處理的多，生根時(shí)間也較短，移栽到花盆土壤中后成活，開花、繁殖和結(jié)實(shí)均正常，而萘乙酸和赤霉素處理的離體生根枝條移栽到花盆土壤中后，其成活率低，成活的植株生長(zhǎng)狀況較差，表現(xiàn)為生長(zhǎng)不健壯、新枝很少、開花較少、葉片發(fā)黃。這一結(jié)果對(duì)建立刺梨枝條繁殖技術(shù)體系有重要的指導(dǎo)作用。

黃輝銓等[10]報(bào)道了吲哚乙酸和萘乙酸對(duì)溫州蜜柑嫩枝扦插效果試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)吲哚乙酸處理的蜜柑嫩枝生根率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于萘乙酸，而且發(fā)現(xiàn)吲哚乙酸在60～100 mg/L濃度時(shí)處理效果較佳。馬小軍等[11]對(duì)東北紅豆杉的研究表明，吲哚丁酸對(duì)枝條處理效果較吲哚乙酸好，而本研究中未見二者存在顯著差異。張長(zhǎng)芹等[12]對(duì)幾種高山長(zhǎng)綠杜鵑的扦插繁殖試驗(yàn)表明，嫩枝（尚未木質(zhì)化）不易生根，而老枝（已木質(zhì)化）易生根，與本研究結(jié)果一致。張以忠等[13]研究了4種生長(zhǎng)素對(duì)普通蕎麥枝條生根效應(yīng)，結(jié)果顯示吲哚乙酸與吲哚丁酸各濃度處理的生根效應(yīng)明顯好于萘乙酸和赤霉素，這和本研究結(jié)果一致；張以忠等[13]研究結(jié)果還顯示蕎麥嫩枝比老枝更容易生根，然而本研究卻顯示一年生的嫩枝較二年生、多年生的老枝不容易生根，由此可見，枝條的年齡段、是否木質(zhì)化在不同物種中對(duì)生根的影響是不同的。

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