尿單核細(xì)胞趨化蛋白?1在2型糖尿病早期腎損傷中的意義

史恒川 劉俊恒 朱建一

尿單核細(xì)胞趨化蛋白?1在2型糖尿病早期腎損傷中的意義

史恒川 劉俊恒 朱建一

目的探討老年2型糖尿病不同腎病分期患者尿單核細(xì)胞趨化蛋白?1（UMCP?1）的變化及其臨床意義。方法測定85例老年2型糖尿病腎病患者（2型糖尿病組）和30例健康體檢者（對照組）UMCP?1、尿微量白蛋白（UALB）、血清總膽固醇（TC）、血清甘油三酯（TG）、血清低密度脂蛋白膽固醇（LDL?C）、血清高密度脂蛋白膽固醇（HDL?C）以及糖化血紅蛋白（HbA1c）水平，同時按UALB水平將2型糖尿病患者分為3組：蛋白尿正常組、微量白蛋白尿組、臨床白蛋白尿組，將各組間檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行分析比較。結(jié)果老年2型糖尿病組UMCP?1水平明顯高于對照組（P＜0.01），在糖尿病腎病各分組中，UMCP?1水平比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），UMCP?1水平隨著蛋白尿程度的增加而升高（r＝0.524，P＜0.05），且在蛋白尿正常組患者UMCP?1水平也明顯高于對照組。結(jié)論UMCP?1水平升高提示炎癥反應(yīng)在2型糖尿病腎病的發(fā)生和發(fā)展中起著重要作用，且早于UALB發(fā)生變化，可作為早期診斷2型糖尿病腎病的有效指標(biāo)。

2型糖尿??；腎病；尿單核細(xì)胞趨化蛋白?1；白蛋白尿

糖尿病腎病（diabetic nephropathy，DN）是糖尿?。―M）最嚴(yán)重的并發(fā)癥之一，是導(dǎo)致病人死亡的重要因素。研究顯示炎癥因子參與了DN演變的全過程，單核細(xì)胞趨化蛋白?1（MCP?1）是一種重要的炎癥趨化刺激因子，在DN發(fā)展過程中起著重要作用［［1?4］，本文通過觀察2型糖尿?。═2DM）患者尿MCP?1（UMCP? 1）水平變化，來探討它們之間的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選擇2013年3～10月本院內(nèi)分泌科住院及門診就診的T2DM患者85例，均符合1999年世界衛(wèi)生組織（WHO）的糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)，男44例，女41例。排除心臟、肝臟及其他感染性疾病，排除原發(fā)性和除糖尿病以外的繼發(fā)性腎臟疾病，腎功能正常，近2周未服用過他汀類藥物、醛固酮受體拮抗劑、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑（ACEI）、血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑（ARB）類藥物和胰島素增敏劑等。85例糖尿病患者根據(jù)其尿白蛋白／肌酐比值（ACR）分為3組：蛋白尿正常組：ACR＜30 mg／g，32例，其中男17例，女15例；年齡51～82歲，平均（62.5± 10.8）歲；微量白蛋白尿組：30 mg／g≤ACR＜300 mg／g，28例，其中男15例，女13例；年齡52～85歲，平均（66.8±9.1）歲；臨床白蛋白尿組：ACR＞300 mg／g，25例，男12例，女13例，年齡51～81歲，平均（68.5±14.3）歲。選擇同期來我院健康體檢者30例作為對照，年齡50～79歲，平均（65.5±14.8）歲，男16例，女14例。體檢無糖尿病，無感染性疾病、腫瘤及免疫性疾病，肝、腎功能正常。

1.2 研究方法

1.2.1 記錄各組中所有研究對象的性別、年齡、病程、身高、體質(zhì)量，計(jì)算體質(zhì)量指數(shù)（BMI）并進(jìn)行比較分析。

1.2.2 受檢者清晨取空腹靜脈血2份，1份分離血清用于檢測總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL?C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL?C）；另1份抗凝血用于檢測糖化血紅蛋白（HbA1c）；同時收集受檢者的晨尿用于檢測尿微量白蛋白（UALB）、尿肌酐（UCr）及UMCP?1的濃度。UMCP?1檢測采用ELISA法，用GENESISRPM 150全自動酶免疫系統(tǒng)檢測。試劑購自美國R＆D Systems公司，嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作，根據(jù)不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品測定的OD值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算各樣品的濃度。TC、TG、LDL?C、 HDL?C在Roche Modular P800模塊式全自動生化儀上完成測試。試劑為法國Roche公司產(chǎn)品；UALB采用免疫比濁法，UCr采用酶法，在德國拜耳DCA?2000分析儀上進(jìn)行檢測，HbA1c采用離子交換層析法，在Sysmex G7分析儀上進(jìn)行檢測。為了減少受檢者尿量收集對測定結(jié)果的影響，UALB及UMCP?1的濃度采用除以UCr的相應(yīng)結(jié)果來表示。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。所有數(shù)據(jù)均以s表示，數(shù)據(jù)的相關(guān)分析采用直線相關(guān)分析；多組間比較采用單因素方差分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 T2DM組與對照組各組間臨床資料比較 T2DM各組與對照組在性別、年齡指標(biāo)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），T2DM組中蛋白尿正常組、微量白蛋白尿組、臨床白蛋白尿組BMI分別為22.34±3.06、23.02± 2.75、23.61±3.3，與對照組BMI（22.45±2.23）相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。與蛋白尿正常組病程（4.2±1.6）年相比，微量白蛋白尿組病程為（6.5±3.1）年、臨床白蛋白尿組病程為（8.2±3.8）年，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

2.2 T2DM組與對照組各組間檢測數(shù)據(jù)比較 蛋白尿正常組、微量白蛋白尿組、臨床白蛋白尿組TC、LDL?C、HbA1c、UMCP?1水平均明顯高于對照組（P＜0.01）。臨床白蛋白尿組TC、LDL?C、HbA1c、UMCP?1水平也明顯高于蛋白尿正常組和微量白蛋白尿組（P＜0.01或P＜0.05），見表1。

表1 T2DM各組與對照組各組間檢測數(shù)據(jù)比較（s）

表1 T2DM各組與對照組各組間檢測數(shù)據(jù)比較（s）

注：與對照組比較，??P＜0.01；與蛋白尿正常組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01；與微量白蛋白尿組相比，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01

組別TC（mmol／L）LDL?C（mmol／L）HbA1c（%）UMCP?1（ng／g）UALB／UCr（mg／g）對照組（n＝30）3.98±0.72 1.77±0.28 4.4±1.12 83.15±8.05 7.9±2.6蛋白尿正常組（n＝32）5.01±1.11??2.88±0.72??7.25±2.32??275.47±14.83??12.8±6.5??微量白蛋白尿組（n＝28）5.54±0.91??△3.41±1.01??△8.95±2.04??△687.63±52.77??△△94.7±65.6△△臨床白蛋白尿組（n＝25）5.97±0.61??△△4.03±1.21??△△▲10.81±3.11??△△▲1024.73±135.61??△△▲465.8±100.2▲▲

2.3 UMCP?1與UALB、HbA1c及血脂的相關(guān)性分析

UMCP?1與UALB、HbA1c、TC呈顯著正相關(guān)（r值分別為0.524、0.367、0.598，P＜0.01或P＜0.05），與TG、HDL?C無相關(guān)性。

3 討論

3.1 DN起病早期無任何臨床表現(xiàn)，一旦出現(xiàn)持續(xù)性蛋白尿，則腎功能將持續(xù)性減退直至末期腎功能衰竭導(dǎo)致病人死亡。早期的診斷和治療能明顯改善DN的預(yù)后，降低病死率。UALB、超敏C反應(yīng)蛋白（Hs?CRP）與腎臟早期損傷的明顯相關(guān)，在老年DN預(yù)測中有一定的意義［5］，但在臨床工作中我們發(fā)現(xiàn)早期腎臟損傷患者UALB、Hs?CRP水平可在正常范圍以內(nèi)，而Hs?CRP在炎癥感染時也會升高，給臨床診斷帶來一定的困難。

3.2 大量研究顯示，DN的發(fā)生及發(fā)展是多因素綜合作用的結(jié)果，炎癥因子參與了DN的演變［1?3］。MCP?1是一種重要的炎癥趨化刺激因子，屬于CC趨化因子家族中的一員，它由內(nèi)皮細(xì)胞、腎系膜細(xì)胞、腎小管上皮細(xì)胞及炎癥刺激下的單核／巨噬細(xì)胞分泌。MCP?1的主要功能是趨化血循環(huán)中的單核細(xì)胞進(jìn)入內(nèi)膜下，活化成巨噬細(xì)胞。正常腎組織多種細(xì)胞可分泌微量的MCP?1，趨化少量單核細(xì)胞在腎組織浸潤，吞噬有害物質(zhì)，減輕組織損傷。T2DM引起的代謝紊亂可刺激腎組織異常表達(dá)MCP?1，研究發(fā)現(xiàn)，糖尿病大鼠腎組織MCP?1 mRNA和蛋白表達(dá)增加，UMCP?1排泄也明顯增加，其水平可反映腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞表達(dá)和分泌MCP?1的能力和腎小管間質(zhì)病變的程度［4］。Morii等［6］發(fā)現(xiàn)，MCP?1通過趨化聚集單核／巨噬細(xì)胞到腎小管間質(zhì)介導(dǎo)腎臟間質(zhì)炎癥、腎小管萎縮和間質(zhì)纖維化從而促進(jìn)DN的發(fā)展。MCP?1通過釋放蛋白水解酶和氧活性物質(zhì)趨化和激活單核／巨噬細(xì)胞，導(dǎo)致腎小球結(jié)構(gòu)損傷，在腎小球動脈壁產(chǎn)生局部慢性炎癥；同時活化的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的各種炎癥細(xì)胞因子和黏附分又正反饋上調(diào)MCP?1的表達(dá)，使細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）合成分泌增多，加重炎癥部位損傷，加速DN的發(fā)展。本研究結(jié)果顯示，T2DM患者各組UMCP?1水平顯著高于對照組，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），提示MCP?1在DN的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)當(dāng)糖尿病患者處于正常蛋白尿期時，UMCP?1的濃度已明顯上升，因此可以通過檢測UMCP?1的濃度來監(jiān)測早期糖尿病腎臟損傷。同時隨著尿蛋白排泄的增加，UMCP?1的水平也逐步升高，UMCP?1水平與尿白蛋白排泄水平呈顯著正相關(guān)（r＝0.524，P＜0.05），表明持續(xù)的蛋白尿也是導(dǎo)致DN進(jìn)展的重要危險因素之一［7］。本組資料也顯示，UMCP?1與HbA1c呈明顯正相關(guān)（r＝0.367，P＜0.05），提示慢性高血糖可刺激腎組織細(xì)胞中MCP?1合成和分泌增加，促進(jìn)DN的發(fā)展［8］。T2DM患者常常存在脂質(zhì)代謝紊亂，本組資料亦顯示，DM患者TC、LDL?C都明顯高于正常對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），在DN患者中，LDL易被氧化為氧化修飾的低密度脂蛋白（oxidized LDL，OX?LDL），LDL、OX?LDL均可刺激MCP?1mRNA表達(dá)，促使系膜細(xì)胞產(chǎn)生MCP?1，引起腎小球內(nèi)募集過多活化的單核細(xì)胞，導(dǎo)致腎小球硬化的發(fā)生。因此，檢測T2DM患者中LDL的水平也可以很好地監(jiān)測其腎臟損傷程度。

3.3 MCP?1作為一種重要的炎癥趨化刺激因子在DN的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用，在T2DM患者早期腎臟損傷時UMCP?1濃度明顯上升且早于UALB濃度的變化，其敏感度高于傳統(tǒng)的UALB檢測［9］，檢測UMCP?1對于DN的早期診斷和干預(yù)具有重要的臨床意義。

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Significance of urinary monocyte chemotactic protein?1 in the determ ination of early renal injury in the patients w ith type 2 diabetesmellitus

SHIHeng?chuan，LIU Jun?heng，ZHU Jian?yi．Department ofClinical Laboratory，Jiangsu Province Official Hospital，Nanjing 210024，China

ObjectiveTo observe the changes of urine monocyte chemotactic protein?1（UMCP?1）in the elderly patients with type 2 diabetesmellitus with different diabetic nephropathy stages.M ethodsEighty?five cases of elderly type 2 diabetic nephropathy patients and 30 healthy controlswere enrolled in this study.The levels of UMCP?1，urinary al?bumin，serum total cholesterol（TC），triglyceride（TG），serum low?density lipoprotein cholesterol（LDL?C），serum high?density lipoprotein cholesterol（HDL?C）and glycosylated hemoglobin（HbA1c）were detected.According to the level of microalbuminuria，the patients with type 2 diabetesmellituswere divided into three groups：normal albuminuria group，mi?croalbuminuria group，the clinical albuminuria group，and the test datawere analyzed and compared between the groups.ResultsThe UMCP?1 level in the elderly patients with type 2 diabetesmellitus was significantly higher than that in the control group（P＜0.01）.The UMCP?1 level increased with the increase of the degree of proteinuria in the patientswith di?abetic nephropathy（r＝0.524，P＜0.05），and the level of UMCP?1was also significantly increased in the patientswith type 2 diabetesmellitus with normal albuminuria.ConclusionsThe increase of UMCP?1 level suggests that inflammatory re?sponsemight play an important role in the occurrence and developmentof diabetic nephropathy in type 2 diabetesmellitus，and the change of UMCP?1 occurs earlier than urine albumin.Therefore，UMCP?1 might be used as a valid indicator for early diagnosis of type 2 diabetic nephropathy.

type 2 diabetesmellitus；nephropathy；urinemonocyte chemotactic protein?1；albuminuria

R 587.2

A

10.3969／j.issn.1003?9198.2014.07.011

2013?11?08）

210024江蘇省南京市，江蘇省省級機(jī)關(guān)醫(yī)院檢驗(yàn)科