李鯤鵬　朱磊　馬捷

[摘要] 目的 用外源性硫化氫后處理大鼠肺缺血再灌注損傷模型，檢測(cè)其對(duì)肺缺血再灌注損傷的影響。 方法 將24只健康SD大鼠，隨機(jī)分成3組，每組8只，分別為：假手術(shù)（Sham）組、肺缺血再灌注（I/R）組及I/R+硫氫化鈉（NaHS）干預(yù)組。在每組實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取大鼠肺組織，觀察肺組織病理學(xué)的變化，檢測(cè)大鼠肺濕/干重（W/D）比值，肺組織丙二醛（MDA）含量及超氧化物岐化酶（SOD）活性的測(cè)定，提取支氣管肺泡灌洗液（BALF）檢測(cè)BALF中白細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞百分比及肺通透性指數(shù)。結(jié)果 I/R組肺組織W/D值、MDA水平與Sham組比較顯著升高（P<0.05），而I/R+硫氫化鈉（NaHS）干預(yù)組明顯低于I/R組（P<0.05）；I/R組肺組織SOD活性與Sham組比較顯著降低（P<0.05）， I/R+硫氫化鈉（NaHS）干預(yù)組明顯高于I/R組（P<0.05）。肺組織病理結(jié)果表明，I/R+硫氫化鈉（NaHS）干預(yù)組與I/R組比較損傷減輕，肺泡腔內(nèi)炎性細(xì)胞減少。 結(jié)論 硫化氫后處理通過(guò)減輕肺水腫、降低氧自由基水平有關(guān)，對(duì)肺缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用。

[關(guān)鍵詞] 再灌注損傷；硫化氫；氧自由基；肺水腫

[中圖分類號(hào)] R363 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2014）13-0010-03

肺缺血/再灌注（Ischemia/Reperfusion，I/R）損傷往往出現(xiàn)于臨床肺移植、體外循環(huán)心臟手術(shù)、機(jī)體大出血等情況下，造成肺缺血，恢復(fù)灌注后，缺血所導(dǎo)致的損傷并沒(méi)有減輕，甚至更加嚴(yán)重[1]。如何降低肺缺血/再灌注損傷的危害，改善患者的預(yù)后，是如今尚需解決的重要問(wèn)題[2]。硫化氫（hydrogensulfide，H2S）具有類似NO和CO的某些生物學(xué)特性，在NO和CO之后被認(rèn)為是第3類內(nèi)源性氣體分子[3]。經(jīng)研究證實(shí)，其對(duì)多種臟器以及組織的缺血再灌注損傷有保護(hù)作用。在此研究中，通過(guò)建立大鼠在體肺缺血/再灌注模型， 以硫氫化鈉作為預(yù)處理藥物，研究硫化氫（H2S）后處理對(duì)肺缺血再灌注損傷的作用及機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

健康SD大鼠24只（山西醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供），體重220～280 g，雌雄不拘。

1.2 動(dòng)物模型復(fù)制

實(shí)驗(yàn)大鼠通過(guò)腹腔注射5%水合氯醛（0.7 mL/100 g），麻醉后取仰臥位固定于手術(shù)臺(tái)上。頸部正中切口，予氣管切開(kāi)插管，動(dòng)物呼吸機(jī)行機(jī)械通氣[吸入室內(nèi)空氣，呼吸頻率（50～60）次/min]。沿胸骨左緣切斷第3～5肋骨，打開(kāi)胸腔，游離左側(cè)肺門(mén)，切斷左側(cè)肺下韌帶。按Sekido[4]法復(fù)制在體大鼠肺缺血-再灌注模型，結(jié)扎阻斷左側(cè)肺門(mén)血管及支氣管，左肺血供及通氣終止30 min后，開(kāi)放左肺門(mén)予再灌注120 min。

1.3 實(shí)驗(yàn)分組

24只大鼠隨機(jī)分成以下3組，假手術(shù)組（Sham）、肺缺血再灌注組（I/R）及I/R+硫氫化鈉（NaHS）干預(yù)組，每組8只。I/R+硫氫化鈉（NaHS）干預(yù)組實(shí)驗(yàn)前5 d始每天腹腔注射NaHS（NaHS 20 μmol/kg，溶入0.3 mL生理鹽水），于實(shí)驗(yàn)前15 min再次給藥；Sham組和I/R組實(shí)驗(yàn)前5 d，每天經(jīng)腹腔注射0.3 mL生理鹽水；實(shí)驗(yàn)15 min再次注射。

1.4觀察指標(biāo)及檢測(cè)方法

1.4.1 肺組織濕/干重（W/D）值測(cè)定 大鼠處死后立即留取左肺部分肺組織測(cè)量濕重（W）并記錄，然后放入60℃恒溫烘箱烘干至恒重，48 h后測(cè)量干重（D），從而算得肺組織濕/干（W/D）值，W/D值可反映肺組織水腫情況。

1.4.2 肺組織勻漿中MDA含量、SOD活性的測(cè)定 左肺取部分肺組織凍存，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，按試劑盒的要求將肺組織制成勻漿， 3500 r/min離心10 min，取上清液，用分光光度計(jì)測(cè)反應(yīng)后的吸光度值，計(jì)算出MDA含量及SOD活性，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明操作。

1.4.3支氣管肺泡灌洗液（BALF）中肺通透性指數(shù)、白細(xì)胞（WBC）計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞（PMN）百分比及肺通透性指數(shù)（LPI）的測(cè)定 取左肺上葉，經(jīng)氣管用5 mL生理鹽水行左肺灌洗，收集支氣管肺泡灌洗液，以3000 r/min高速離心15 min取上清液，雙縮脲法測(cè)BALF及血清中蛋白含量，BALF中蛋白含量與血清蛋白含量之比為肺通透性指數(shù)。將BALF離心沉渣涂片，瑞氏染色，光鏡下行白細(xì)胞及PMN計(jì)數(shù)，求得PMN百分比。

1.4.4 病理學(xué)檢查 留取左肺部分肺組織行病理學(xué)分析，用10%甲醛固定肺組織標(biāo)本，然后常規(guī)石蠟包埋，切片，HE染色，觀察光鏡下病理學(xué)改變。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

所有結(jié)果均采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理，實(shí)驗(yàn)結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，實(shí)驗(yàn)數(shù)結(jié)果組間比較行方差分析和t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 肺組織W/D值

Sham組肺組織基本無(wú)水腫，而I/R組肺組織嚴(yán)重水腫，I/R組與Sham組比較W/D值明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），I/R+ NaHS組W/D值雖比Sham組有所升高（P<0.05），但與I/R組對(duì)比，W/D值明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。見(jiàn)表1。

表1 各組大鼠肺組織W /D值比較（x±s）

注：與Sham組比較，*P<0.05；與I/R組比較，#P<0.01

2.2 肺組織血漿丙二醛（MDA）含量及超氧化物岐化酶（SOD）活性

與Sham組比較，I/R組肺組織勻漿中MDA含量明顯增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）， I/R+ NaHS組MDA含量雖比Sham組有所升高（P<0.05），但與I/R組對(duì)比，肺組織勻漿中MDA含量明顯減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；與Sham組比較，I/R組肺組織勻漿中SOD活性明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），I/R+ NaHS組SOD活性雖比Sham組有所降低（P<0.05），但顯著高于I/R組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。見(jiàn)表2。

表2 各組血漿MDA含量及超氧化物岐化酶（SOD）活性（x±s）

注：與Sham組比較，*P<0.05；與I/R組比較，#P<0.01

2.3 肺通透性指數(shù)（LPI）和BALF中白細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞百分比

與Sham組比較，I/R組BALF中WBC總數(shù)及中性粒細(xì)胞百分比明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），I/R+ NaHS組BALF中WBC總數(shù)及中性粒細(xì)胞百分比雖比Sham組有所升高（P<0.05），但與I/R組對(duì)比BALF中WBC總數(shù)及中性粒細(xì)胞百分比明顯降低， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均<0.01）；與Sham組比較，I/R組肺通透指數(shù)明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），I/R+ NaHS組肺通透指數(shù)雖比Sham組有所升高（P<0.05）但與I/R組對(duì)比，肺通透指數(shù)明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。見(jiàn)表3。

表3 各組肺通透性指數(shù)及BALF中WBC計(jì)數(shù)、PMN百分比（x±s，n=8）

注：與Sham組比較，*P<0.05；與I/R組比較，#P<0.01

2.4 肺組織病理結(jié)果

Sham組肺泡腔完整性好，肺泡間隔均勻無(wú)增厚，肺泡壁光滑，無(wú)滲出物及炎細(xì)胞浸潤(rùn)（封三圖1）；I/R組出現(xiàn)明顯的肺組織水腫，毛細(xì)血管擴(kuò)張、充血，肺泡間隔增厚，肺泡腔內(nèi)充滿大量紅細(xì)胞及滲出物（封三圖2）；I/R+ NaHS組肺組織毛細(xì)血管輕微擴(kuò)張，與I/R組比較，肺泡間隔及肺泡水腫減輕，肺泡腔滲出物明顯減少（封三圖3）。

3 討論

H2S本是一種有毒氣體，但近些年發(fā)現(xiàn)H2S是一種新型氣體信號(hào)分子，對(duì)心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、消化道系統(tǒng)等均具有重要的調(diào)節(jié)作用[5]。新近研究證實(shí)，H2S對(duì)心臟[6]、肝臟[7]、腦[8]、小腸[9]缺血再灌注損傷有一定的保護(hù)作用，其機(jī)制可能與抗氧化凋亡提高缺血耐受性有關(guān)[10]。

肺缺血再灌注損傷（ischemia-reperfusion injury，I/R）的機(jī)制還不特別清晰，近年來(lái)認(rèn)為炎性介質(zhì)、氧自由基、內(nèi)皮細(xì)胞的損傷等機(jī)制在肺缺血再灌注損傷中有重要作用[11]。內(nèi)皮細(xì)胞的損傷引起肺毛細(xì)血管擴(kuò)張，從而通透性增高，引發(fā)肺組織水腫，肺組織濕/干重比值可反映肺水腫情況，再灌注后W/D比值，BALF中白細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞百分比及肺通透性指數(shù)均增高，而NaHS后處理后上述指標(biāo)明顯下降（P<0.05），其對(duì)肺缺血再灌注損傷產(chǎn)生了很好的效果。

近年來(lái)證明氧自由基和活性氧是引起缺血再灌注損傷的主要影響因素。與缺血再灌注損傷有關(guān)的氧自由基（OFR）有過(guò)氧化氫（H2O2）、超氧陰離子（O2-）[12]。正常生理狀態(tài)下，氧自由基所引起的損傷可被機(jī)體“抗氧化屏障”所抑制，然而缺血再灌注使組織產(chǎn)生過(guò)多的氧自由基，破壞了內(nèi)源性抗氧化系統(tǒng)，從而引起細(xì)胞壞死和組織的損傷。在此過(guò)程中，雙鍵脂肪酸在氧化后形成丙二醛，其含量可間接反映肺組織氧化損傷的情況。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，I/R組中MDA含量與Sham組相比顯著升高，表明肺缺血再灌注時(shí)，體內(nèi)大量的氧自由基積累，導(dǎo)致肺水腫。而NaHS處理后，MDA含量雖然比Sham組高，而與I/R組相比顯著下降（P<0.05）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明H2S處理后，可降低再灌注后血漿MDA的含量，能減輕氧自由基所引起的氧化損傷，從而達(dá)到一定的保護(hù)能力。SOD是機(jī)體的重要抗氧化活性酶，其活性水平能間接反映機(jī)體的抗氧化能力[13]。本實(shí)驗(yàn)中觀察到I/R組SOD活性與Sham組相比顯著下降，表明肺缺血再灌注后內(nèi)源性抗氧化活性酶消耗，從而導(dǎo)致氧自由基含量增加，破壞肺組織內(nèi)皮細(xì)胞，引起肺毛細(xì)血管擴(kuò)張，引起肺水腫，而NaHS處理后，SOD活性與I/R組相比顯著升高（P<0.05）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，H2S處理后可以提高機(jī)體內(nèi)源性抗氧化活性酶的活性，從而達(dá)到清除氧自由基的目的。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，外源性硫化氫可通過(guò)清除基體氧自由基，提高抗氧化酶活性，起到對(duì)肺缺血再灌注損傷起保護(hù)作用。然而對(duì)其劑量、給藥時(shí)間等尚需進(jìn)一步研究。

[參考文獻(xiàn)]

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[9] 劉浩，白曉斌，史松，等. 硫化氫對(duì)大鼠腸缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[J]. 西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2007， 28（6）：668-671.

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[12] Ruiz-Ginés JA，López-Ongil S，González-Rubio M，et al. Reac tive oxygen species induce proliferation of bovine aortic endo thelial cells[J]. J Cardiovasc Pharmaco，2000， 35（1）：109-113.

[13] 李穎川，姜禎. 尿蛋白酶抑制劑防治肺缺血再灌注損傷的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 復(fù)旦學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版）， 2004，31（2）：182-184.

（收稿日期：2014-02-25）

表2 各組血漿MDA含量及超氧化物岐化酶（SOD）活性（x±s）

注：與Sham組比較，*P<0.05；與I/R組比較，#P<0.01

2.3 肺通透性指數(shù)（LPI）和BALF中白細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞百分比

與Sham組比較，I/R組BALF中WBC總數(shù)及中性粒細(xì)胞百分比明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），I/R+ NaHS組BALF中WBC總數(shù)及中性粒細(xì)胞百分比雖比Sham組有所升高（P<0.05），但與I/R組對(duì)比BALF中WBC總數(shù)及中性粒細(xì)胞百分比明顯降低， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均<0.01）；與Sham組比較，I/R組肺通透指數(shù)明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），I/R+ NaHS組肺通透指數(shù)雖比Sham組有所升高（P<0.05）但與I/R組對(duì)比，肺通透指數(shù)明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。見(jiàn)表3。

表3 各組肺通透性指數(shù)及BALF中WBC計(jì)數(shù)、PMN百分比（x±s，n=8）

注：與Sham組比較，*P<0.05；與I/R組比較，#P<0.01

2.4 肺組織病理結(jié)果

Sham組肺泡腔完整性好，肺泡間隔均勻無(wú)增厚，肺泡壁光滑，無(wú)滲出物及炎細(xì)胞浸潤(rùn)（封三圖1）；I/R組出現(xiàn)明顯的肺組織水腫，毛細(xì)血管擴(kuò)張、充血，肺泡間隔增厚，肺泡腔內(nèi)充滿大量紅細(xì)胞及滲出物（封三圖2）；I/R+ NaHS組肺組織毛細(xì)血管輕微擴(kuò)張，與I/R組比較，肺泡間隔及肺泡水腫減輕，肺泡腔滲出物明顯減少（封三圖3）。

3 討論

H2S本是一種有毒氣體，但近些年發(fā)現(xiàn)H2S是一種新型氣體信號(hào)分子，對(duì)心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、消化道系統(tǒng)等均具有重要的調(diào)節(jié)作用[5]。新近研究證實(shí)，H2S對(duì)心臟[6]、肝臟[7]、腦[8]、小腸[9]缺血再灌注損傷有一定的保護(hù)作用，其機(jī)制可能與抗氧化凋亡提高缺血耐受性有關(guān)[10]。

肺缺血再灌注損傷（ischemia-reperfusion injury，I/R）的機(jī)制還不特別清晰，近年來(lái)認(rèn)為炎性介質(zhì)、氧自由基、內(nèi)皮細(xì)胞的損傷等機(jī)制在肺缺血再灌注損傷中有重要作用[11]。內(nèi)皮細(xì)胞的損傷引起肺毛細(xì)血管擴(kuò)張，從而通透性增高，引發(fā)肺組織水腫，肺組織濕/干重比值可反映肺水腫情況，再灌注后W/D比值，BALF中白細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞百分比及肺通透性指數(shù)均增高，而NaHS后處理后上述指標(biāo)明顯下降（P<0.05），其對(duì)肺缺血再灌注損傷產(chǎn)生了很好的效果。

近年來(lái)證明氧自由基和活性氧是引起缺血再灌注損傷的主要影響因素。與缺血再灌注損傷有關(guān)的氧自由基（OFR）有過(guò)氧化氫（H2O2）、超氧陰離子（O2-）[12]。正常生理狀態(tài)下，氧自由基所引起的損傷可被機(jī)體“抗氧化屏障”所抑制，然而缺血再灌注使組織產(chǎn)生過(guò)多的氧自由基，破壞了內(nèi)源性抗氧化系統(tǒng)，從而引起細(xì)胞壞死和組織的損傷。在此過(guò)程中，雙鍵脂肪酸在氧化后形成丙二醛，其含量可間接反映肺組織氧化損傷的情況。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，I/R組中MDA含量與Sham組相比顯著升高，表明肺缺血再灌注時(shí)，體內(nèi)大量的氧自由基積累，導(dǎo)致肺水腫。而NaHS處理后，MDA含量雖然比Sham組高，而與I/R組相比顯著下降（P<0.05）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明H2S處理后，可降低再灌注后血漿MDA的含量，能減輕氧自由基所引起的氧化損傷，從而達(dá)到一定的保護(hù)能力。SOD是機(jī)體的重要抗氧化活性酶，其活性水平能間接反映機(jī)體的抗氧化能力[13]。本實(shí)驗(yàn)中觀察到I/R組SOD活性與Sham組相比顯著下降，表明肺缺血再灌注后內(nèi)源性抗氧化活性酶消耗，從而導(dǎo)致氧自由基含量增加，破壞肺組織內(nèi)皮細(xì)胞，引起肺毛細(xì)血管擴(kuò)張，引起肺水腫，而NaHS處理后，SOD活性與I/R組相比顯著升高（P<0.05）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，H2S處理后可以提高機(jī)體內(nèi)源性抗氧化活性酶的活性，從而達(dá)到清除氧自由基的目的。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，外源性硫化氫可通過(guò)清除基體氧自由基，提高抗氧化酶活性，起到對(duì)肺缺血再灌注損傷起保護(hù)作用。然而對(duì)其劑量、給藥時(shí)間等尚需進(jìn)一步研究。

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[7] 杜津，王國(guó)林. 硫化氫對(duì)大鼠肝缺血再灌注損傷的影響[J]. 中華麻醉學(xué)雜志，2011，31（9）：1136-1138.

[8] 李國(guó)風(fēng)，李蘭芳，張勤增，等. 硫化氫對(duì)局灶性腦缺血損傷大鼠腦組織神經(jīng)元凋亡的影響[J]. 中國(guó)病理生理雜志，2012，（11）：2105-2106.

[9] 劉浩，白曉斌，史松，等. 硫化氫對(duì)大鼠腸缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[J]. 西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2007， 28（6）：668-671.

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（收稿日期：2014-02-25）

表2 各組血漿MDA含量及超氧化物岐化酶（SOD）活性（x±s）

注：與Sham組比較，*P<0.05；與I/R組比較，#P<0.01

2.3 肺通透性指數(shù)（LPI）和BALF中白細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞百分比

與Sham組比較，I/R組BALF中WBC總數(shù)及中性粒細(xì)胞百分比明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），I/R+ NaHS組BALF中WBC總數(shù)及中性粒細(xì)胞百分比雖比Sham組有所升高（P<0.05），但與I/R組對(duì)比BALF中WBC總數(shù)及中性粒細(xì)胞百分比明顯降低， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均<0.01）；與Sham組比較，I/R組肺通透指數(shù)明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），I/R+ NaHS組肺通透指數(shù)雖比Sham組有所升高（P<0.05）但與I/R組對(duì)比，肺通透指數(shù)明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。見(jiàn)表3。

表3 各組肺通透性指數(shù)及BALF中WBC計(jì)數(shù)、PMN百分比（x±s，n=8）

注：與Sham組比較，*P<0.05；與I/R組比較，#P<0.01

2.4 肺組織病理結(jié)果

Sham組肺泡腔完整性好，肺泡間隔均勻無(wú)增厚，肺泡壁光滑，無(wú)滲出物及炎細(xì)胞浸潤(rùn)（封三圖1）；I/R組出現(xiàn)明顯的肺組織水腫，毛細(xì)血管擴(kuò)張、充血，肺泡間隔增厚，肺泡腔內(nèi)充滿大量紅細(xì)胞及滲出物（封三圖2）；I/R+ NaHS組肺組織毛細(xì)血管輕微擴(kuò)張，與I/R組比較，肺泡間隔及肺泡水腫減輕，肺泡腔滲出物明顯減少（封三圖3）。

3 討論

H2S本是一種有毒氣體，但近些年發(fā)現(xiàn)H2S是一種新型氣體信號(hào)分子，對(duì)心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、消化道系統(tǒng)等均具有重要的調(diào)節(jié)作用[5]。新近研究證實(shí)，H2S對(duì)心臟[6]、肝臟[7]、腦[8]、小腸[9]缺血再灌注損傷有一定的保護(hù)作用，其機(jī)制可能與抗氧化凋亡提高缺血耐受性有關(guān)[10]。

肺缺血再灌注損傷（ischemia-reperfusion injury，I/R）的機(jī)制還不特別清晰，近年來(lái)認(rèn)為炎性介質(zhì)、氧自由基、內(nèi)皮細(xì)胞的損傷等機(jī)制在肺缺血再灌注損傷中有重要作用[11]。內(nèi)皮細(xì)胞的損傷引起肺毛細(xì)血管擴(kuò)張，從而通透性增高，引發(fā)肺組織水腫，肺組織濕/干重比值可反映肺水腫情況，再灌注后W/D比值，BALF中白細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞百分比及肺通透性指數(shù)均增高，而NaHS后處理后上述指標(biāo)明顯下降（P<0.05），其對(duì)肺缺血再灌注損傷產(chǎn)生了很好的效果。

近年來(lái)證明氧自由基和活性氧是引起缺血再灌注損傷的主要影響因素。與缺血再灌注損傷有關(guān)的氧自由基（OFR）有過(guò)氧化氫（H2O2）、超氧陰離子（O2-）[12]。正常生理狀態(tài)下，氧自由基所引起的損傷可被機(jī)體“抗氧化屏障”所抑制，然而缺血再灌注使組織產(chǎn)生過(guò)多的氧自由基，破壞了內(nèi)源性抗氧化系統(tǒng)，從而引起細(xì)胞壞死和組織的損傷。在此過(guò)程中，雙鍵脂肪酸在氧化后形成丙二醛，其含量可間接反映肺組織氧化損傷的情況。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，I/R組中MDA含量與Sham組相比顯著升高，表明肺缺血再灌注時(shí)，體內(nèi)大量的氧自由基積累，導(dǎo)致肺水腫。而NaHS處理后，MDA含量雖然比Sham組高，而與I/R組相比顯著下降（P<0.05）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明H2S處理后，可降低再灌注后血漿MDA的含量，能減輕氧自由基所引起的氧化損傷，從而達(dá)到一定的保護(hù)能力。SOD是機(jī)體的重要抗氧化活性酶，其活性水平能間接反映機(jī)體的抗氧化能力[13]。本實(shí)驗(yàn)中觀察到I/R組SOD活性與Sham組相比顯著下降，表明肺缺血再灌注后內(nèi)源性抗氧化活性酶消耗，從而導(dǎo)致氧自由基含量增加，破壞肺組織內(nèi)皮細(xì)胞，引起肺毛細(xì)血管擴(kuò)張，引起肺水腫，而NaHS處理后，SOD活性與I/R組相比顯著升高（P<0.05）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，H2S處理后可以提高機(jī)體內(nèi)源性抗氧化活性酶的活性，從而達(dá)到清除氧自由基的目的。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，外源性硫化氫可通過(guò)清除基體氧自由基，提高抗氧化酶活性，起到對(duì)肺缺血再灌注損傷起保護(hù)作用。然而對(duì)其劑量、給藥時(shí)間等尚需進(jìn)一步研究。

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（收稿日期：2014-02-25）