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      卡介菌多糖核酸對斷奶仔豬抗氧化和免疫活性的影響

      2014-07-11 07:40:18於敏等
      江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014年4期
      關(guān)鍵詞:斷奶仔豬抗氧化

      於敏等

      摘要:將96頭28日齡斷奶仔豬隨機分為4組,分別為卡介菌多糖核酸高劑量組(60 μg/kg)、中劑量組(30 μg/kg)、低劑量組(15 μg/kg)、空白對照組,仔豬按照分組要求注射給藥。分別于注射前、注射后5、10、15、20 d前腔靜脈采血,分離血清,測定血清中總超氧化物歧化酶(T-SOD)、脂質(zhì)過氧化物(LPO)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、IgG、IgM含量。結(jié)果表明:卡介菌多糖核酸能顯著提高仔豬血清中T-SOD、GSH-PX、IgG、IgM含量,顯著降低LPO含量,且這種抗氧化和免疫增強作用和用藥時間、劑量有相關(guān)性。

      關(guān)鍵詞:卡介菌多糖核酸;抗氧化;免疫活性;斷奶仔豬

      中圖分類號: S858.28 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號:1002-1302(2014)04-0152-03

      收稿日期:2013-08-25

      基金項目:江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院橫向課題(編號:PT1209)。

      作者簡介:於敏(1982—),女,江蘇南京人,碩士,講師,主要從事免疫增強劑開發(fā)及病理學(xué)研究。E-mail:42019802@qq.com??ń榫嗵呛怂幔˙CG-PSN) 是從卡介菌中經(jīng)熱酚法處理后提取的新型免疫調(diào)節(jié)劑,含有多糖、核酸等多種免疫活性物質(zhì)。BCG-PSN 具有免疫調(diào)節(jié)及抗炎作用,在改善免疫功能、抗過敏、抗感染方面具有良好療效[1-2]。仔豬斷奶是一個較強的應(yīng)激,包括仔豬與母豬隔離,新群體形成,從吃母乳轉(zhuǎn)成吃飼料,環(huán)境小氣候改變等。仔豬斷奶常伴有消化系統(tǒng)紊亂、免疫功能低下、嚴(yán)重腹瀉、生長停滯甚至死亡,給生產(chǎn)造成巨大經(jīng)濟損失[3]。雖然BCG-PSN對機體有免疫調(diào)節(jié)功能,但在仔豬斷奶應(yīng)激模式下是否具有免疫增強作用,以及能否降低仔豬腹瀉率卻未曾見報道。本研究以斷奶仔豬為對象,研究了BCG-PSN對斷奶仔豬腹瀉指標(biāo)、抗氧化和免疫功能的影響,旨在為解決生產(chǎn)上由于斷奶所產(chǎn)生的一系列問題提供依據(jù)。

      1材料與方法

      1.1試驗動物

      28日齡姜曲海豬斷奶仔豬96頭,購于江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院姜曲海種豬場,公母各半,常規(guī)飼養(yǎng),并按分組要求給予藥物。

      1.2試劑與儀器

      BCG-PSN為浙江萬馬藥業(yè)有限公司產(chǎn)品,批號:20110410,其中多糖核酸含量不少于0.3 g/L;酶標(biāo)儀,美國Biotek公司產(chǎn)品,型號:ELX800;紫外可見分光光度計,日本日立公司產(chǎn)品,型號:U-2910;超氧化物歧化酶(SOD)、脂質(zhì)過氧化物(LPO)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、IgG、IgM檢測試劑盒購于南京建成生物工程研究所。

      1.3試驗設(shè)計

      將96頭斷奶仔豬隨機分為4組,每組3圈,每圈8頭,分別為BCG-PSN高劑量組(Ⅰ組,60 μg/kg),BCG-PSN中劑量組(Ⅱ組,30 μg/kg),BCG-PSN低劑量組(Ⅲ組,15 μg/kg)、空白對照組(Ⅳ組),空白對照組用生理鹽水代替BCG-PSN。每組受試豬進(jìn)行連續(xù)7 d注射給藥,首次用藥前每頭豬空腹稱重,以確定給藥量。于首次用藥前以及用藥后5、10、15、20 d,在每圈隨機選取仔豬5頭,每組15頭,前腔靜脈采血,分離血清,檢測相應(yīng)指標(biāo),試驗期共20 d。

      1.4檢測指標(biāo)

      1.4.1觀察指標(biāo)試驗期間每天觀察受試豬的精神狀態(tài)、食欲、糞便、發(fā)病、死亡等情況。試驗結(jié)束后對每頭豬再次稱重,以確定增重情況。按下式計算腹瀉頻率:

      腹瀉頻率= ∑(腹瀉仔豬數(shù)×仔豬腹瀉時間)/(試驗仔豬數(shù)×正試期時間)×100%。

      1.4.2抗氧化指標(biāo)檢測用羥胺法測定血清中總超氧化物歧化酶(T-SOD)含量,LPO、GSH-PX含量檢測方法嚴(yán)格按照試劑盒說明進(jìn)行檢測。

      1.4.3免疫球蛋白檢測用免疫抑制法測定血清中IgG、IgM 含量。

      1.5數(shù)據(jù)分析

      試驗數(shù)據(jù)用SPSS 18.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計和方差分析。

      2結(jié)果與分析

      2.1觀察指標(biāo)

      在整個試驗期間,各試驗組豬未見明顯的異常臨床表現(xiàn),采食、行動、精神狀態(tài)、呼吸等均正常,部分豬腹瀉。

      由表1可以看出,在斷奶仔豬用藥前和用藥后,各試驗組間平均增重未見顯著差異(P>0.05),但BCG-PSN高劑量組、中劑量組的平均增重要大于對照組。

      3結(jié)論與討論

      仔豬斷奶后消化系統(tǒng)和免疫器官發(fā)育不完善,消化道中酶和胃酸的分泌量不足,正常的腸道微生態(tài)系統(tǒng)尚未建立,往往出現(xiàn)食欲差、消化不良、生長遲滯、飼料利用率低、抗病力弱、腹瀉、水腫等,給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大經(jīng)濟損失[4]。本研究表明,BCG-PSN處理下仔豬的腹瀉頻率顯著下降,平均增重也比對照組有提高,這可能跟BCG-PSN提高機體抗氧化能力和增強免疫力有關(guān)。

      動物機體內(nèi)SOD、GSH-PX在清除自由基、氧化損傷、維持細(xì)胞結(jié)構(gòu)方面起著重要作用。在應(yīng)激狀態(tài)下,血液中SOD、GSH-PX活性降低,而脂質(zhì)過氧化物L(fēng)PO含量升高[5-6]。本研究中,隨著BCG-PSN添加水平提高,給藥后5、10、15 d,血清中GSH-PX、T-SOD活性明顯升高,與對照組差異顯著,添加60、30 μg/kg的BCG-PSN能改善仔豬斷奶后抗氧化能力,緩解應(yīng)激造成的過氧化損傷,有利于仔豬生長。本研究中,用藥前,各試驗組仔豬血清中LPO含量沒有顯著差異;給藥5、10 d后,用藥組仔豬血清中LPO含量顯著下降,說明BCG-PSN能夠協(xié)同SOD、GSH-PX清除體內(nèi)脂質(zhì)過氧化物,抑制膜脂質(zhì)過氧化作用,減少自由基對機體的病理損傷,具有一定的抗氧化作用。

      IgG是血液中含量最高的免疫球蛋白,在抗體介導(dǎo)的防衛(wèi)機理中占主要地位,IgG比其他免疫球蛋白更易逸出血管,參加體表和組織間的防衛(wèi)[7]。本研究表明,BCG-PSN用藥組仔豬血清IgG含量在斷奶應(yīng)激后緩慢上升,但對照組卻下降,二者間差異顯著,說明對照組仔豬受斷奶應(yīng)激的影響較大,而BCG-PSN能減輕斷奶應(yīng)激,使機體在短時間內(nèi)建立免疫保護(hù)。IgM 由漿細(xì)胞分泌,在大多數(shù)家畜血清中的含量僅次于IgG[8]。本研究中斷奶前供試豬血清IgM 含量差異不顯著;用藥后5、10 d,BCG-PSN用藥組仔豬血清IgM含量明顯增高,而對照組則下降,二者間差異顯著;用藥后15、20 d,雖然用藥組和對照組沒有顯著差異,但用藥組IgM含量維持在高水平,表明BCG-PSN能夠提高機體免疫球蛋白的含量,且這種免疫增強作用和用藥劑量相關(guān),本研究中以高劑量組效果最為明顯。

      參考文獻(xiàn):

      [1]Sun J,Hou J,Li D,et al. Enhancement of HIV-1 DNA vaccine immunogenicity by BCG-PSN,a novel adjuvant[J]. Vaccine,2013,31(3):472-479.

      [2]寧云山,姜德建,劉珊珊.卡介苗及卡介菌多糖核酸提取物的免疫調(diào)節(jié)作用及臨床應(yīng)用[J]. 中國生物制品學(xué)雜志,2008,21(1):74-77.

      [3]邊傳周,王老七. 黃芪多糖對斷奶仔豬免疫功能及腹瀉的影響[J]. 畜牧與獸醫(yī),2005,37(1):10-12.

      [4]席鵬彬,林映才,蔣宗勇,等. 谷氨酰胺二肽對斷奶仔豬生長、免疫、抗氧化力和小腸粘膜形態(tài)的影響[J]. 動物營養(yǎng)學(xué)報,2007,19(2):135-141.

      [5]廖曉霞,葉均安. 早期斷奶仔豬的斷奶應(yīng)激與腹瀉研究[J]. 家畜生態(tài)學(xué)報,2005,26(3):74-77.

      [6]胡鵬,占秀安,郄彥昭,等. 母種豬飼糧添加DL-硒代蛋氨酸對后代乳豬胰臟硒含量、抗氧化能力、消化酶活性以及GSH-PX mRNA表達(dá)的影響[J]. 動物營養(yǎng)學(xué)報,2010,22(5):1361-1366.

      [7]邱小田,張蕓,劉培瓊,等. 品種與季節(jié)和日齡對仔豬血清中IgG含量的影響[J]. 中國畜牧雜志,2006,42(5):13-15.

      [8]辛凌翔,董靜,王宏宇,等. 卡介菌多糖核酸對IBDV感染雞的免疫活性研究[J]. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2010,33(6):75-80.endprint

      摘要:將96頭28日齡斷奶仔豬隨機分為4組,分別為卡介菌多糖核酸高劑量組(60 μg/kg)、中劑量組(30 μg/kg)、低劑量組(15 μg/kg)、空白對照組,仔豬按照分組要求注射給藥。分別于注射前、注射后5、10、15、20 d前腔靜脈采血,分離血清,測定血清中總超氧化物歧化酶(T-SOD)、脂質(zhì)過氧化物(LPO)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、IgG、IgM含量。結(jié)果表明:卡介菌多糖核酸能顯著提高仔豬血清中T-SOD、GSH-PX、IgG、IgM含量,顯著降低LPO含量,且這種抗氧化和免疫增強作用和用藥時間、劑量有相關(guān)性。

      關(guān)鍵詞:卡介菌多糖核酸;抗氧化;免疫活性;斷奶仔豬

      中圖分類號: S858.28 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號:1002-1302(2014)04-0152-03

      收稿日期:2013-08-25

      基金項目:江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院橫向課題(編號:PT1209)。

      作者簡介:於敏(1982—),女,江蘇南京人,碩士,講師,主要從事免疫增強劑開發(fā)及病理學(xué)研究。E-mail:42019802@qq.com??ń榫嗵呛怂幔˙CG-PSN) 是從卡介菌中經(jīng)熱酚法處理后提取的新型免疫調(diào)節(jié)劑,含有多糖、核酸等多種免疫活性物質(zhì)。BCG-PSN 具有免疫調(diào)節(jié)及抗炎作用,在改善免疫功能、抗過敏、抗感染方面具有良好療效[1-2]。仔豬斷奶是一個較強的應(yīng)激,包括仔豬與母豬隔離,新群體形成,從吃母乳轉(zhuǎn)成吃飼料,環(huán)境小氣候改變等。仔豬斷奶常伴有消化系統(tǒng)紊亂、免疫功能低下、嚴(yán)重腹瀉、生長停滯甚至死亡,給生產(chǎn)造成巨大經(jīng)濟損失[3]。雖然BCG-PSN對機體有免疫調(diào)節(jié)功能,但在仔豬斷奶應(yīng)激模式下是否具有免疫增強作用,以及能否降低仔豬腹瀉率卻未曾見報道。本研究以斷奶仔豬為對象,研究了BCG-PSN對斷奶仔豬腹瀉指標(biāo)、抗氧化和免疫功能的影響,旨在為解決生產(chǎn)上由于斷奶所產(chǎn)生的一系列問題提供依據(jù)。

      1材料與方法

      1.1試驗動物

      28日齡姜曲海豬斷奶仔豬96頭,購于江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院姜曲海種豬場,公母各半,常規(guī)飼養(yǎng),并按分組要求給予藥物。

      1.2試劑與儀器

      BCG-PSN為浙江萬馬藥業(yè)有限公司產(chǎn)品,批號:20110410,其中多糖核酸含量不少于0.3 g/L;酶標(biāo)儀,美國Biotek公司產(chǎn)品,型號:ELX800;紫外可見分光光度計,日本日立公司產(chǎn)品,型號:U-2910;超氧化物歧化酶(SOD)、脂質(zhì)過氧化物(LPO)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、IgG、IgM檢測試劑盒購于南京建成生物工程研究所。

      1.3試驗設(shè)計

      將96頭斷奶仔豬隨機分為4組,每組3圈,每圈8頭,分別為BCG-PSN高劑量組(Ⅰ組,60 μg/kg),BCG-PSN中劑量組(Ⅱ組,30 μg/kg),BCG-PSN低劑量組(Ⅲ組,15 μg/kg)、空白對照組(Ⅳ組),空白對照組用生理鹽水代替BCG-PSN。每組受試豬進(jìn)行連續(xù)7 d注射給藥,首次用藥前每頭豬空腹稱重,以確定給藥量。于首次用藥前以及用藥后5、10、15、20 d,在每圈隨機選取仔豬5頭,每組15頭,前腔靜脈采血,分離血清,檢測相應(yīng)指標(biāo),試驗期共20 d。

      1.4檢測指標(biāo)

      1.4.1觀察指標(biāo)試驗期間每天觀察受試豬的精神狀態(tài)、食欲、糞便、發(fā)病、死亡等情況。試驗結(jié)束后對每頭豬再次稱重,以確定增重情況。按下式計算腹瀉頻率:

      腹瀉頻率= ∑(腹瀉仔豬數(shù)×仔豬腹瀉時間)/(試驗仔豬數(shù)×正試期時間)×100%。

      1.4.2抗氧化指標(biāo)檢測用羥胺法測定血清中總超氧化物歧化酶(T-SOD)含量,LPO、GSH-PX含量檢測方法嚴(yán)格按照試劑盒說明進(jìn)行檢測。

      1.4.3免疫球蛋白檢測用免疫抑制法測定血清中IgG、IgM 含量。

      1.5數(shù)據(jù)分析

      試驗數(shù)據(jù)用SPSS 18.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計和方差分析。

      2結(jié)果與分析

      2.1觀察指標(biāo)

      在整個試驗期間,各試驗組豬未見明顯的異常臨床表現(xiàn),采食、行動、精神狀態(tài)、呼吸等均正常,部分豬腹瀉。

      由表1可以看出,在斷奶仔豬用藥前和用藥后,各試驗組間平均增重未見顯著差異(P>0.05),但BCG-PSN高劑量組、中劑量組的平均增重要大于對照組。

      3結(jié)論與討論

      仔豬斷奶后消化系統(tǒng)和免疫器官發(fā)育不完善,消化道中酶和胃酸的分泌量不足,正常的腸道微生態(tài)系統(tǒng)尚未建立,往往出現(xiàn)食欲差、消化不良、生長遲滯、飼料利用率低、抗病力弱、腹瀉、水腫等,給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大經(jīng)濟損失[4]。本研究表明,BCG-PSN處理下仔豬的腹瀉頻率顯著下降,平均增重也比對照組有提高,這可能跟BCG-PSN提高機體抗氧化能力和增強免疫力有關(guān)。

      動物機體內(nèi)SOD、GSH-PX在清除自由基、氧化損傷、維持細(xì)胞結(jié)構(gòu)方面起著重要作用。在應(yīng)激狀態(tài)下,血液中SOD、GSH-PX活性降低,而脂質(zhì)過氧化物L(fēng)PO含量升高[5-6]。本研究中,隨著BCG-PSN添加水平提高,給藥后5、10、15 d,血清中GSH-PX、T-SOD活性明顯升高,與對照組差異顯著,添加60、30 μg/kg的BCG-PSN能改善仔豬斷奶后抗氧化能力,緩解應(yīng)激造成的過氧化損傷,有利于仔豬生長。本研究中,用藥前,各試驗組仔豬血清中LPO含量沒有顯著差異;給藥5、10 d后,用藥組仔豬血清中LPO含量顯著下降,說明BCG-PSN能夠協(xié)同SOD、GSH-PX清除體內(nèi)脂質(zhì)過氧化物,抑制膜脂質(zhì)過氧化作用,減少自由基對機體的病理損傷,具有一定的抗氧化作用。

      IgG是血液中含量最高的免疫球蛋白,在抗體介導(dǎo)的防衛(wèi)機理中占主要地位,IgG比其他免疫球蛋白更易逸出血管,參加體表和組織間的防衛(wèi)[7]。本研究表明,BCG-PSN用藥組仔豬血清IgG含量在斷奶應(yīng)激后緩慢上升,但對照組卻下降,二者間差異顯著,說明對照組仔豬受斷奶應(yīng)激的影響較大,而BCG-PSN能減輕斷奶應(yīng)激,使機體在短時間內(nèi)建立免疫保護(hù)。IgM 由漿細(xì)胞分泌,在大多數(shù)家畜血清中的含量僅次于IgG[8]。本研究中斷奶前供試豬血清IgM 含量差異不顯著;用藥后5、10 d,BCG-PSN用藥組仔豬血清IgM含量明顯增高,而對照組則下降,二者間差異顯著;用藥后15、20 d,雖然用藥組和對照組沒有顯著差異,但用藥組IgM含量維持在高水平,表明BCG-PSN能夠提高機體免疫球蛋白的含量,且這種免疫增強作用和用藥劑量相關(guān),本研究中以高劑量組效果最為明顯。

      參考文獻(xiàn):

      [1]Sun J,Hou J,Li D,et al. Enhancement of HIV-1 DNA vaccine immunogenicity by BCG-PSN,a novel adjuvant[J]. Vaccine,2013,31(3):472-479.

      [2]寧云山,姜德建,劉珊珊.卡介苗及卡介菌多糖核酸提取物的免疫調(diào)節(jié)作用及臨床應(yīng)用[J]. 中國生物制品學(xué)雜志,2008,21(1):74-77.

      [3]邊傳周,王老七. 黃芪多糖對斷奶仔豬免疫功能及腹瀉的影響[J]. 畜牧與獸醫(yī),2005,37(1):10-12.

      [4]席鵬彬,林映才,蔣宗勇,等. 谷氨酰胺二肽對斷奶仔豬生長、免疫、抗氧化力和小腸粘膜形態(tài)的影響[J]. 動物營養(yǎng)學(xué)報,2007,19(2):135-141.

      [5]廖曉霞,葉均安. 早期斷奶仔豬的斷奶應(yīng)激與腹瀉研究[J]. 家畜生態(tài)學(xué)報,2005,26(3):74-77.

      [6]胡鵬,占秀安,郄彥昭,等. 母種豬飼糧添加DL-硒代蛋氨酸對后代乳豬胰臟硒含量、抗氧化能力、消化酶活性以及GSH-PX mRNA表達(dá)的影響[J]. 動物營養(yǎng)學(xué)報,2010,22(5):1361-1366.

      [7]邱小田,張蕓,劉培瓊,等. 品種與季節(jié)和日齡對仔豬血清中IgG含量的影響[J]. 中國畜牧雜志,2006,42(5):13-15.

      [8]辛凌翔,董靜,王宏宇,等. 卡介菌多糖核酸對IBDV感染雞的免疫活性研究[J]. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2010,33(6):75-80.endprint

      摘要:將96頭28日齡斷奶仔豬隨機分為4組,分別為卡介菌多糖核酸高劑量組(60 μg/kg)、中劑量組(30 μg/kg)、低劑量組(15 μg/kg)、空白對照組,仔豬按照分組要求注射給藥。分別于注射前、注射后5、10、15、20 d前腔靜脈采血,分離血清,測定血清中總超氧化物歧化酶(T-SOD)、脂質(zhì)過氧化物(LPO)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、IgG、IgM含量。結(jié)果表明:卡介菌多糖核酸能顯著提高仔豬血清中T-SOD、GSH-PX、IgG、IgM含量,顯著降低LPO含量,且這種抗氧化和免疫增強作用和用藥時間、劑量有相關(guān)性。

      關(guān)鍵詞:卡介菌多糖核酸;抗氧化;免疫活性;斷奶仔豬

      中圖分類號: S858.28 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號:1002-1302(2014)04-0152-03

      收稿日期:2013-08-25

      基金項目:江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院橫向課題(編號:PT1209)。

      作者簡介:於敏(1982—),女,江蘇南京人,碩士,講師,主要從事免疫增強劑開發(fā)及病理學(xué)研究。E-mail:42019802@qq.com??ń榫嗵呛怂幔˙CG-PSN) 是從卡介菌中經(jīng)熱酚法處理后提取的新型免疫調(diào)節(jié)劑,含有多糖、核酸等多種免疫活性物質(zhì)。BCG-PSN 具有免疫調(diào)節(jié)及抗炎作用,在改善免疫功能、抗過敏、抗感染方面具有良好療效[1-2]。仔豬斷奶是一個較強的應(yīng)激,包括仔豬與母豬隔離,新群體形成,從吃母乳轉(zhuǎn)成吃飼料,環(huán)境小氣候改變等。仔豬斷奶常伴有消化系統(tǒng)紊亂、免疫功能低下、嚴(yán)重腹瀉、生長停滯甚至死亡,給生產(chǎn)造成巨大經(jīng)濟損失[3]。雖然BCG-PSN對機體有免疫調(diào)節(jié)功能,但在仔豬斷奶應(yīng)激模式下是否具有免疫增強作用,以及能否降低仔豬腹瀉率卻未曾見報道。本研究以斷奶仔豬為對象,研究了BCG-PSN對斷奶仔豬腹瀉指標(biāo)、抗氧化和免疫功能的影響,旨在為解決生產(chǎn)上由于斷奶所產(chǎn)生的一系列問題提供依據(jù)。

      1材料與方法

      1.1試驗動物

      28日齡姜曲海豬斷奶仔豬96頭,購于江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院姜曲海種豬場,公母各半,常規(guī)飼養(yǎng),并按分組要求給予藥物。

      1.2試劑與儀器

      BCG-PSN為浙江萬馬藥業(yè)有限公司產(chǎn)品,批號:20110410,其中多糖核酸含量不少于0.3 g/L;酶標(biāo)儀,美國Biotek公司產(chǎn)品,型號:ELX800;紫外可見分光光度計,日本日立公司產(chǎn)品,型號:U-2910;超氧化物歧化酶(SOD)、脂質(zhì)過氧化物(LPO)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、IgG、IgM檢測試劑盒購于南京建成生物工程研究所。

      1.3試驗設(shè)計

      將96頭斷奶仔豬隨機分為4組,每組3圈,每圈8頭,分別為BCG-PSN高劑量組(Ⅰ組,60 μg/kg),BCG-PSN中劑量組(Ⅱ組,30 μg/kg),BCG-PSN低劑量組(Ⅲ組,15 μg/kg)、空白對照組(Ⅳ組),空白對照組用生理鹽水代替BCG-PSN。每組受試豬進(jìn)行連續(xù)7 d注射給藥,首次用藥前每頭豬空腹稱重,以確定給藥量。于首次用藥前以及用藥后5、10、15、20 d,在每圈隨機選取仔豬5頭,每組15頭,前腔靜脈采血,分離血清,檢測相應(yīng)指標(biāo),試驗期共20 d。

      1.4檢測指標(biāo)

      1.4.1觀察指標(biāo)試驗期間每天觀察受試豬的精神狀態(tài)、食欲、糞便、發(fā)病、死亡等情況。試驗結(jié)束后對每頭豬再次稱重,以確定增重情況。按下式計算腹瀉頻率:

      腹瀉頻率= ∑(腹瀉仔豬數(shù)×仔豬腹瀉時間)/(試驗仔豬數(shù)×正試期時間)×100%。

      1.4.2抗氧化指標(biāo)檢測用羥胺法測定血清中總超氧化物歧化酶(T-SOD)含量,LPO、GSH-PX含量檢測方法嚴(yán)格按照試劑盒說明進(jìn)行檢測。

      1.4.3免疫球蛋白檢測用免疫抑制法測定血清中IgG、IgM 含量。

      1.5數(shù)據(jù)分析

      試驗數(shù)據(jù)用SPSS 18.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計和方差分析。

      2結(jié)果與分析

      2.1觀察指標(biāo)

      在整個試驗期間,各試驗組豬未見明顯的異常臨床表現(xiàn),采食、行動、精神狀態(tài)、呼吸等均正常,部分豬腹瀉。

      由表1可以看出,在斷奶仔豬用藥前和用藥后,各試驗組間平均增重未見顯著差異(P>0.05),但BCG-PSN高劑量組、中劑量組的平均增重要大于對照組。

      3結(jié)論與討論

      仔豬斷奶后消化系統(tǒng)和免疫器官發(fā)育不完善,消化道中酶和胃酸的分泌量不足,正常的腸道微生態(tài)系統(tǒng)尚未建立,往往出現(xiàn)食欲差、消化不良、生長遲滯、飼料利用率低、抗病力弱、腹瀉、水腫等,給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大經(jīng)濟損失[4]。本研究表明,BCG-PSN處理下仔豬的腹瀉頻率顯著下降,平均增重也比對照組有提高,這可能跟BCG-PSN提高機體抗氧化能力和增強免疫力有關(guān)。

      動物機體內(nèi)SOD、GSH-PX在清除自由基、氧化損傷、維持細(xì)胞結(jié)構(gòu)方面起著重要作用。在應(yīng)激狀態(tài)下,血液中SOD、GSH-PX活性降低,而脂質(zhì)過氧化物L(fēng)PO含量升高[5-6]。本研究中,隨著BCG-PSN添加水平提高,給藥后5、10、15 d,血清中GSH-PX、T-SOD活性明顯升高,與對照組差異顯著,添加60、30 μg/kg的BCG-PSN能改善仔豬斷奶后抗氧化能力,緩解應(yīng)激造成的過氧化損傷,有利于仔豬生長。本研究中,用藥前,各試驗組仔豬血清中LPO含量沒有顯著差異;給藥5、10 d后,用藥組仔豬血清中LPO含量顯著下降,說明BCG-PSN能夠協(xié)同SOD、GSH-PX清除體內(nèi)脂質(zhì)過氧化物,抑制膜脂質(zhì)過氧化作用,減少自由基對機體的病理損傷,具有一定的抗氧化作用。

      IgG是血液中含量最高的免疫球蛋白,在抗體介導(dǎo)的防衛(wèi)機理中占主要地位,IgG比其他免疫球蛋白更易逸出血管,參加體表和組織間的防衛(wèi)[7]。本研究表明,BCG-PSN用藥組仔豬血清IgG含量在斷奶應(yīng)激后緩慢上升,但對照組卻下降,二者間差異顯著,說明對照組仔豬受斷奶應(yīng)激的影響較大,而BCG-PSN能減輕斷奶應(yīng)激,使機體在短時間內(nèi)建立免疫保護(hù)。IgM 由漿細(xì)胞分泌,在大多數(shù)家畜血清中的含量僅次于IgG[8]。本研究中斷奶前供試豬血清IgM 含量差異不顯著;用藥后5、10 d,BCG-PSN用藥組仔豬血清IgM含量明顯增高,而對照組則下降,二者間差異顯著;用藥后15、20 d,雖然用藥組和對照組沒有顯著差異,但用藥組IgM含量維持在高水平,表明BCG-PSN能夠提高機體免疫球蛋白的含量,且這種免疫增強作用和用藥劑量相關(guān),本研究中以高劑量組效果最為明顯。

      參考文獻(xiàn):

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