錢國平(云南省陸良縣草山飼料站,云南陸良 655600)
近年來,我國及周邊國家小反芻獸疫疫情多發(fā),呈地方性流行。2007年,我國西藏阿里地區(qū)首次發(fā)生小反芻獸疫疫情。2013年12月份以來,我國新疆、甘肅、內蒙古、寧夏等省區(qū)先后發(fā)生小反芻獸疫疫情,本病1942年首次在象牙海岸發(fā)生,其后,非洲的塞內加爾、加納、多哥、貝寧等有本病報道,尼日利亞的綿羊和山羊中也發(fā)生了本病,并造成了重大損失。亞洲的一些國家也報道了本病,根據國際獸疫局(OIE)1993年《世界動物衛(wèi)生》報道,孟加拉國的山羊有本病發(fā)生,印度德拉邦和馬哈拉施特拉邦的部分地區(qū)綿羊中發(fā)生了類似牛瘟的疾病,最后確診為小反芻獸疫,此后,泰米爾拉德邦也有受到感染報道。本病流行猖撅,發(fā)病率和死亡率均很高,對山羊生產和畜牧經濟造成嚴重損失。
小反芻獸疫病毒在分類上屬副粘病毒科,麻疹病毒屬。本病毒只有一個抗原型,其抗原性與牛瘟病毒接近。經交叉血清中和試驗和補體結合試驗指出,補體結合抗體和中和抗體對小反芻獸疫病毒和牛瘟病毒都發(fā)生陽性反應,但對異源病毒的效價不如對同源病毒的效價高。有人用瓊脂擴散試驗觀察到同源和異源系統(tǒng)都有兩條沉淀線,證明有共同抗原,但因在沉淀線接合處出現(xiàn)交叉,所以認為兩者的抗原不是完全相同的。用株麻疹疫苗免疫山羊,不能抵抗小反芻獸瘟病毒的攻擊,而用犬瘟熱疫苗免疫可以抵抗小反芻獸瘟病毒的攻擊,但不能完全保護。
病毒粒子呈近球形,大小為120~300納米,有囊膜,囊膜上有纖突,為單股負鏈RNA病毒。用猴、牛、綿羊、山羊、馬、豬、犬、貓、雞、豚鼠等動物的紅細胞進行血凝試驗均未證實有血凝活性。病毒對乙醚敏感,在PH 3.0條件下3小時滅活,嗅脫氧尿昔對病毒無作用。病毒懸液在37℃的半衰期約為2小時,在50℃半小時即死亡。實驗感染山羊尸體,在4℃保存8天后,從淋巴結內可見到本病毒,但滴度明顯下降。對外界環(huán)境的抵抗力較弱,一般消毒藥均能殺死病毒。
本病的傳染源主要為患病動物和隱性感染動物,處于亞臨床型的病羊尤為危險。病畜的分泌物和排泄物均含有病毒。病毒存在于發(fā)熱期的血液、淋巴結、眼結膜、鼻咽部、胃腸道黏膜、肺臟等組織中,隨分泌物和排泄物排出。山羊試驗表明,自體溫升高第一天(注射后第四天),在眼結膜和咽喉分泌物中檢出病毒,在第二天從鼻汁和唾液中檢出病毒。糞便中病毒出現(xiàn)較晚,但滴度很高。
本病主要通過直接和間接接觸傳染或呼吸道飛沫傳染。自然條件下,主要通過病羊與健羊的直接接觸而感染,尚無間接接觸感染病例的報告。病毒侵入門戶可能是鼻-咽途徑。
本病以山羊的易感性最高,其次是綿羊和美國白尾鹿。病羊接觸的牛及偶蹄類野生動物多呈隱性感染。但是野生動物在本病流行病學上起著某種作用并不是不可能的。
本病是一種地方性流行病,2~18月齡的幼齡羊較成年羊易感,而哺乳期羔羊有較強的抵抗力。不同品種羊的易感性存有差異,以山羊中的小型品種尤為易感。主要發(fā)生在雨季和干冷季節(jié),常以零星疫點的形式發(fā)生,而在某些年份則呈現(xiàn)暴發(fā)流行,繼之有5~6年的緩和期。在暴發(fā)本病時,死亡率可達70%~80%。
小反芻獸疫潛伏期為4~5天,最長21天。自然發(fā)病僅見于山羊和綿羊。山羊發(fā)病嚴重,綿羊也偶有嚴重病例發(fā)生。一些康復山羊的唇部形成口瘡樣病變。感染動物臨診癥狀與牛瘟病牛相似。急性型體溫可上升至41℃,并持續(xù)3~5天。感染動物煩躁不安,背毛無光,口鼻干燥,食欲減退。流黏液膿性鼻液,呼出惡臭氣體。在發(fā)熱的前4天,口腔黏膜充血,頰黏膜進行性廣泛性損害、導致多涎,隨后出現(xiàn)壞死性病灶,開始口腔黏膜出現(xiàn)小的粗糙的紅色淺表壞死病灶,以后變成粉紅色,感染部位包括下唇、下齒齦等處。嚴重病例可見壞死病灶波及齒墊、腭、頰部及其乳頭、舌頭等處。后期出現(xiàn)帶血水樣腹瀉,嚴重脫水,消瘦,隨之體溫下降。出現(xiàn)咳嗽、呼吸異常。發(fā)病率高達100%,在嚴重暴發(fā)時,死亡率為100%,在輕度發(fā)生時,死亡率不超過50%。幼年動物發(fā)病嚴重,發(fā)病率和死亡都很高,為我國劃定的一類疾病。
尸體剖檢病變與牛瘟病牛相似,病變從口腔直到瘤、網胃口,患畜可見結膜炎、壞死性口炎等肉眼病變,嚴重病例可蔓延到硬腭及咽喉部。皺胃常出現(xiàn)病變,而瘤胃、網胃、瓣胃很少出現(xiàn)病變,病變部常出現(xiàn)有規(guī)則、有輪廓的糜爛,創(chuàng)面紅色、出血。腸可見糜爛或出血,特征性出血或斑馬條紋常見于大腸,特別在結腸、直腸結合處,淋巴結腫大,脾有壞死性病變。在鼻甲、喉、氣管等處有出血斑。還可見支氣管肺炎的典型病變。因本病毒對胃腸道淋巴細胞及上皮細胞具有特殊的親和力,故能引起特征性病變。一般在感染細胞中出現(xiàn)嗜酸性胞漿包涵體及多核巨細胞。在淋巴組織中,小反芻獸疫病毒可引起淋巴細胞壞死。脾臟、扁桃體、淋巴結細胞被破壞。含嗜酸性胞漿包涵體的多核巨細胞出現(xiàn),極少有核內包涵體。在消化系統(tǒng),病毒引起馬爾基氏層深部的上皮細胞發(fā)生壞死,感染細胞產生核固縮和核破裂,在表皮生發(fā)層形成含有嗜酸性胞漿包涵體的多核巨細胞。
本病主要引起山羊發(fā)病,綿羊較少發(fā)病,而牛等其他偶蹄獸呈隱性感染。病程急劇,高溫稽留,流鼻液和眼淚,口腔和舌部糜爛即可作出初步診斷。要確診尚需實驗室診斷。
在發(fā)病5天前的體溫升高期間,采取病料有可能分離到病原?;钛虿扇⊙汉捅丘つ?死羊則采取淋巴結、扁桃體、脾臟、腸黏膜、肺臟作病料。
為了獲得成功,常采取數(shù)份病料混合一起,接種敏感細胞進行培養(yǎng)。常用的原代細胞有山羊和綿羊胎腎細胞、犢牛腎細胞、羊膜細胞、猴腎細胞。傳代細胞有 MDKBC,MS,BHK12,Vero,BSC。一般于 6~15天出現(xiàn)細胞病變。其特點是出現(xiàn)多核細胞,細胞中央為一團細胞質,周圍有一個折光的環(huán),因而呈“鐘面”狀。核的數(shù)目隨所用細胞培養(yǎng)物的種類而異,在山羊和綿羊胚胎腎細胞培養(yǎng)物內可達100個。感染細胞常有核內嗜酸性包涵體(1~6個),其周圍有一較亮的暈環(huán),也有以暈環(huán)圍繞的胞漿內包涵體。
用電鏡觀察病毒繁殖,接種后10~30分鐘可見一個吸附期,2~6小時是隱蔽期,1~7天病毒以芽生外出。當多核細胞出現(xiàn),芽生停止。
病毒鑒定可根據理化特性、病毒形態(tài)與結構、補體結合試驗、瓊脂擴散試驗、對流免疫電泳、ELISA、間接熒光抗體試驗和血清中和試驗進行。此外,用小反芻獸瘟F基因引物對被檢所有組織樣品或細胞培養(yǎng)收獲物中提取的RNA作RT-PCR也可作出確診。還可以皮下、靜脈、氣霧接種無特異抗體的不滿1歲的幼山羊來分離病毒。
6.3.1 瓊脂免疫擴散試驗:用死亡不久或瀕死宰殺病羊淋巴結或脾臟,對以家兔制備的抗血清進行瓊脂免疫擴散試驗。如病料中有本病毒抗原則出現(xiàn)沉淀線,但不能與牛瘟相區(qū)別。
6.3.2 免疫熒光試驗:用抗牛瘟和抗小反芻獸瘟單克隆抗體和抗小鼠1gG熒光抗體進行間接熒光抗體染色,在熒光顯微鏡下,腸和淋巴結標本呈現(xiàn)熒光。
6.3.3 補體結合試驗:按常規(guī)法進行。本法多用于流行病學調查。缺點是同麻疹屬的其他病毒有交叉反應,而且只表示近期的感染。但一般異源系統(tǒng)的效價較低。
6.3.4 中和試驗:血清中和試驗可用于流行病學調查,而且可以區(qū)分真性小反芻獸瘟和牛瘟病毒的感染(同源系統(tǒng)和異源系統(tǒng)的效價不同)。
6.3.5 對流免疫電泳:用腸系膜淋巴結抽提物與高免血清進行,根據沉淀線進行判定。對流免疫電泳雖比瓊脂免疫擴散試驗的敏感性有了提高,但也不能區(qū)分小反芻獸瘟與牛瘟。
6.3.6 免疫酶聯(lián)吸附試驗:常用雙抗夾心ELISA和競爭ELISA檢測標本抗原。
本病應與綿羊和山羊的真性牛瘟、巴氏桿菌病、山羊傳染性胸膜肺炎、藍舌病、羊傳染性膿疤相鑒別。本病主要發(fā)生在雨季,病畜多為山羊,綿羊較少發(fā)病。與病羊接觸的牛及大型偶蹄類野生動物呈隱性感染,與牛瘟不難區(qū)分。山羊巴氏桿菌病和山羊傳染性胸膜肺炎是以呼吸系統(tǒng)的癥狀為主,無口腔和舌部糜爛。藍舌病主要感染綿羊,而山羊較少發(fā)病。羊傳染性膿疤舌無潰爛,也無發(fā)熱和大量腹瀉的癥狀。
發(fā)病初使用抗生素和磺胺類藥物可對癥治療和預防繼發(fā)感染,刀豆素(自刀豆和豌豆等籽粒中提取而得的一種植物凝集素)+頭孢類藥物+羊疫清(主要成分:苯唑西林鈉,載體為羊同源精制血清抗體)/羊肽樂(主要成分:同源精制血清抗體球蛋白),其方法是:先用生理鹽水將刀豆素和頭孢稀釋后混合注射,觀察20分鐘后再注射羊疫清或羊肽樂(20毫升用于治療100千克體重,預防可以用到200千克體重),一般注射2次即可,如果病情嚴重最多打3針,這個方案治療羊小反芻獸疫可有達到90%以上。世界動物衛(wèi)生組織將其列為法定報告動物疫病,我國將其列為一類動物疫病,一旦發(fā)生本病,必須按《中華人民共和國動物防疫法》、《重大動物疫情處置條例》、《國家突發(fā)重大動物疫情應急預案》和《國家小反芻獸疫應急預案》的相關規(guī)定進行處置。對本病的防控主要靠疫苗免疫。
7.2.1 養(yǎng)殖戶應在當?shù)匦竽莲F醫(yī)部門指導下,建立健全防疫制度。做好日常飼養(yǎng)管理和消毒工作,外來人員和車輛進場前應徹底消毒。嚴格執(zhí)行動物防疫有關法律法規(guī),嚴禁從疫區(qū)引進羊只,對外來羊只,尤其是來源于活羊交易市場的羊調入后必須隔離觀察30天以上,經臨床診斷和血清學檢查確認健康無病,方可混群飼養(yǎng)。發(fā)現(xiàn)疑似小反芻獸疫患病動物后,應立即隔離疑似患病動物,限制其移動,加強消毒,并立即向當?shù)孬F醫(yī)主管部門或動物疫病預防控制機構報告。
7.2.2 畜牧獸醫(yī)部門應采取以下防控措施
一是指導養(yǎng)羊場戶和牧場加強防疫管理,切實提高生產安全水平。
二是抓好疫區(qū)和高風險區(qū)免疫。嚴格按照農業(yè)部要求開展小反芻獸疫強制免疫工作特別是新生羔羊的補免。
三是加強羊等易感動物的監(jiān)測排查,及時發(fā)現(xiàn)和消除隱患。
四是強化活羊調運監(jiān)管,臨時關閉羊群來源復雜、風險較大的交易市場。
五是做好各項應急準備工作。一旦發(fā)現(xiàn)病羊或病原學陽性,必須嚴格按預案和規(guī)范要求,堅決徹底拔除疫點;疫區(qū)內健康動物應就近定點監(jiān)督屠宰,產品盡可能就近消費;對受威脅區(qū)開展緊急免疫。
六是加強邊境地區(qū)防控,防范境外疫情傳入。