侯 均

(湖北省黃石市第二人民醫(yī)院，湖北 黃石 435002)

小兒氨酚黃那敏顆粒為復(fù)方制劑，組分為對(duì)乙酰氨基酚、馬來(lái)酸氯苯那敏、人工牛黃，用于小兒感冒引起的頭痛、發(fā)熱、咽喉痛、鼻塞等。國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)(試行)[1]僅對(duì)對(duì)乙酰氨基酚進(jìn)行了含量測(cè)定，未對(duì)馬來(lái)酸氯苯那敏進(jìn)行含量測(cè)定。為進(jìn)一步控制藥品質(zhì)量，筆者對(duì)馬來(lái)酸氯苯那敏進(jìn)行了含量測(cè)定，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

德國(guó)產(chǎn)KNAUER 型高效液相色譜儀(K-501 泵、K-2501 紫外檢測(cè)器);LAC-214 型電子天平。乙腈為色譜純(天津四友精細(xì)化學(xué)品有限公司);水為注射用水;磷酸、十二烷基硫酸鈉分析純(上海化學(xué)試劑采購(gòu)供應(yīng)站五聯(lián)化工廠);馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)為100047 -200305，供含量測(cè)定用);小兒氨酚黃那敏顆粒(黃石飛云制藥有限公司，批號(hào)為20060801，20060802，20060803)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱:Lichrospher C18柱(200 mm×4.6 mm，5 μm);流動(dòng)相:乙腈-0.5%十二烷基硫酸鈉溶液-磷酸(60 ∶40 ∶0.1);流速:1.0 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):210 nm;進(jìn)樣量:20 μL。理論板數(shù)按氯苯那敏峰計(jì)算應(yīng)不低于3 000。

2.2 溶液制備

稱取馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品適量，精密稱定，加流動(dòng)相稀釋成質(zhì)量濃度為10 μg/mL 的溶液，即得對(duì)照品溶液。取本品10 袋，稱定質(zhì)量，混勻，研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于0.5 mg 的馬來(lái)酸氯苯那敏)，置50 mL 容量瓶中，加流動(dòng)相40 mL，超聲處理(功率250 W，頻率33 kHz)30 min，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

專屬性試驗(yàn):取缺馬來(lái)酸氯苯那敏的陰性對(duì)照品，按供試品溶液的制備方法制得陰性對(duì)照品溶液，按擬訂色譜條件進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果陰性對(duì)照品溶液在馬來(lái)酸氯苯那敏峰位置處無(wú)吸收峰，色譜圖見(jiàn)圖1。

圖1 高效液相色譜圖

線性關(guān)系考察:精密量取馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品21.25 mg，置100 mL 容量瓶中，加流動(dòng)相適量溶解后稀釋至刻度，搖勻，精密量取3，5，10，15，20 mL，分別加流動(dòng)相至100 mL，搖勻，各進(jìn)樣20 μL，測(cè)定峰面積，以峰面積(Y)為縱坐標(biāo)、質(zhì)量濃度(X)為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程Y=0.205X-0.187，r=0.999 5(n=5)。結(jié)果表明，馬來(lái)酸氯苯那敏質(zhì)量濃度在6.37 ～42.50 μg/mL 范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系。

精密度試驗(yàn):取同一對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6 次，測(cè)定氯苯那敏峰面積。結(jié)果的RSD 為0.32%(n=6)，表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn):取同一供試品溶液，在室溫下放置0，2，4，8，12，24 h 后分別進(jìn)樣，測(cè)定氯苯那敏的峰面積。結(jié)果的RSD 為0.31%(n=6)，表明供試品溶液在24 h 內(nèi)穩(wěn)定性良好。

重復(fù)性試驗(yàn):取同一批(批號(hào)為20120801)樣品，依法測(cè)定6 次。結(jié)果馬來(lái)酸氯苯那敏含量為標(biāo)示量的98.01%，RSD 為0.33%(n=6)，表明方法重復(fù)性良好。

加樣回收試驗(yàn):精密稱取已測(cè)定含量的樣品9 份(批號(hào)為20120801，含量為161.2 μg/g)，精密加入對(duì)照品溶液2，3，4 mL(質(zhì)量濃度為152.92 μg/mL)，按供試品溶液制備方法進(jìn)行處理，測(cè)定含量，并計(jì)算回收率。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 馬來(lái)酸氯苯那敏加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n=9)

2.4 樣品含量測(cè)定

取樣品3 批，按擬訂方法測(cè)定樣品含量。結(jié)果批號(hào)為20120801，20120802，20120803 的3 批樣品中，馬來(lái)酸氯苯那敏的含量(標(biāo)示量)分別為97.99%，97.82%，97.48%，RSD 分別為0.68%，0.75%，0.72%。

3 討論

與文獻(xiàn)[2]報(bào)道的流動(dòng)相體系比較，采用乙腈-0.5%十二烷基硫酸鈉溶液-磷酸(60 ∶40 ∶0.1)流動(dòng)相體系所得色譜圖，馬來(lái)酸氯苯那敏的峰形優(yōu)，分離效果好，保留時(shí)間適中。

供試品溶液和對(duì)照品溶液中，馬來(lái)酸氯苯那敏呈解離狀態(tài)存在，故在色譜圖中出現(xiàn)有馬來(lái)酸峰。因此，在馬來(lái)酸氯苯那敏含量測(cè)定時(shí)以氯苯那敏峰面積來(lái)計(jì)算。

在預(yù)試驗(yàn)中，分別采用了加熱回流和超聲波提取的方法，以正交試驗(yàn)的方法對(duì)小兒氨酚黃那敏顆粒中馬來(lái)酸氯苯那敏含量進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果加熱回流和超聲波提取在含量上基本一致，為簡(jiǎn)化操作，選擇超聲波提取，根據(jù)正交試驗(yàn)結(jié)果確定了小兒氨酚黃那敏顆粒供試品溶液的制備方法。

[1] WS-10001 -(HD-0214)-2002，國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)(試行)[S].

[2] 翟 紅，丁子杰，趙紅旗，等. 反相高效液相色譜法測(cè)定咳特靈膠囊中馬來(lái)酸氯苯那敏的含量[J]. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2002，13(10):595-596.