摘要：植物激素在植物體內(nèi)含量甚微，而且存在著大量干擾物質(zhì)，這給提取、分離和定量分析帶來很大困難。本文對20世紀(jì)50年代至今，植物激素的提取、分離和定量分析所采取高效毛細(xì)管電泳（HPCE）的特點(diǎn)及發(fā)展應(yīng)用作綜合評述。

關(guān)鍵詞：植物激素：HPLE；HPCE；GC

中圖分類號：Q946.885 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

1 高效毛細(xì)管電泳（HPCE）的特點(diǎn)及發(fā)展應(yīng)用

1.1 PHCE的特點(diǎn)

1.1.1 儀器簡單

操作簡便 HPCE儀器構(gòu)造極其簡單，只要有1個高壓電源，1只毛細(xì)管，1個檢測器和2個緩沖溶液瓶，就能進(jìn)行HPCE實(shí)驗(yàn)。

1.1.2 分析速度快

分離效率高 由于毛細(xì)管能抑制溶液對流，具有良好的散熱性，允許在很高的電場下（可達(dá)400V/cm以上）進(jìn)行電泳，因此可在很短時間內(nèi)完成分離，分離效率可達(dá)105~106理論塔板數(shù)。

1.1.3 操作模式多

只要更換毛細(xì)管內(nèi)填充溶液的種類、濃度、酸度或添加劑等，就可以用同一臺儀器實(shí)現(xiàn)多種分離模式。

1.1.4實(shí)驗(yàn)成本低

消耗少，分離在水介質(zhì)中進(jìn)行，消耗的大多是價格較低的無機(jī)鹽類；毛細(xì)管長度僅60~70cm，內(nèi)徑70~75mm，容積僅125ml，進(jìn)樣量在NL級或ne級，實(shí)驗(yàn)成本低。

2 PHCE的發(fā)展應(yīng)用

2.1 PHCE的發(fā)展

到20世紀(jì)80年代，毛細(xì)管電泳技術(shù)取得了突破性的進(jìn)展。1981年，Johnsonburg和Taluka提出了在內(nèi)徑小于80μm的毛細(xì)管中，軸向擴(kuò)散是影響柱效的主要因素。他們使用75μm內(nèi)徑，100cm長的毛細(xì)管，柱上熒光檢測，30KV的高壓，分離了氨基酸和多肽物質(zhì)，獲得了40萬理論塔片數(shù)，并實(shí)現(xiàn)了正負(fù)離子的同時分離，此項(xiàng)工作被認(rèn)為是當(dāng)今毛細(xì)管電泳技術(shù)發(fā)展的里程碑。1984年，Terabit等提出一種新的毛細(xì)管電泳技術(shù)一膠束自動力學(xué)色譜（MEKC），彌補(bǔ)了CZE不能分離中性組分的缺陷，從而拓展了毛細(xì)管電泳的應(yīng)用范圍。1987年，Enhearten提出了毛細(xì)管等電聚焦電泳（CIEF）；Cohen和Charger發(fā)展了毛細(xì)管凝膠電泳（CGE），使得傳統(tǒng)的等電聚焦和凝膠電泳技術(shù)在一根毛細(xì)管中得以實(shí)現(xiàn)。

毛細(xì)管電泳技術(shù)的應(yīng)用是CE研究中的一大熱點(diǎn)，應(yīng)用研究報告約占文獻(xiàn)量的50%以上。毛細(xì)管電泳的應(yīng)用范圍十分廣泛，可分離無機(jī)離子、小分子有機(jī)物、氨基酸、肽、蛋白質(zhì)、核苷酸及藥物等，其中生物樣品的分離分析是CE應(yīng)用的一個重要領(lǐng)域。如人們采用毛細(xì)管電泳技術(shù)鑒定合成肽和蛋白質(zhì)的純度，繪制基因重組產(chǎn)物的指紋圖譜進(jìn)行藥用蛋白質(zhì)的質(zhì)量監(jiān)控，分析蛋白質(zhì)酶解或化學(xué)水解后的多肽片斷，獲取指紋圖譜進(jìn)行藥用蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)分析，以及在緩沖液中加入環(huán)糊精或金屬Cu2+等添加劑用于手性分子的分離等等。

Cohen等人首次采用聚丙稀酰胺凝膠毛細(xì)管電泳對DNA片斷進(jìn)行分析，達(dá)到了單個堿基的分離。采用激光誘導(dǎo)熒光檢測器，CE-PAGE（聚丙烯酰胺電泳）可在1h內(nèi)分離300個堿基，靈敏度可達(dá)10-20mol。

2.2 PHCE在植物激素分離、分析中的應(yīng)用

國內(nèi)用毛細(xì)管電泳進(jìn)行了2類激素7組分的同時分離，即4種常見的生長素：吲哚3-5酸（IBA）、吲哚3-丙酸（IPA）、吲哚-3-乙酸（IAA）、1-萘乙酸（NAA）與3種細(xì)胞激動素：N6-異成烯腺嘌呤（即玉米素zeatin.ZT）、N6-呋喃甲基腺嘌呤（KT）、6-氨基嘌呤（6-BAP）。在十二烷基硫酸鈉（SDS）作膠來的體系中，首次用葡萄礦和三乙醇胺作混合改進(jìn)劑，有效地改善了上述7種植物激素的分離度，13min內(nèi)獲基線分離。由于毛細(xì)管電泳樣品的預(yù)處理較為簡單，減少了樣品的損耗量，所以用MEKC方法測定較GC及HPLC方法優(yōu)越。

3 總結(jié)

高效液相色譜法，只要求樣品能制成溶液，而不需要?dú)饣?，因此不受樣品揮發(fā)性的約束。對于低揮發(fā)性、熱穩(wěn)定性差，分子量大的高分子化合物以及離子型化合物尤為有利，如氨基酸、蛋白質(zhì)、生物堿、核酸、筒紙、類脂、維生素及抗生素等。分子量較大，沸點(diǎn)較高的有機(jī)物以及無機(jī)鹽類，都可用高效液相色譜法進(jìn)行分析。

參考文獻(xiàn)

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作者簡介：周德寶（1961-），男，漢族，河北張家口人，內(nèi)蒙古科技大學(xué)包頭師范學(xué)院，副教授，研究方向：植物開花生理學(xué)。

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