李建英 劉津民 曹海育 張玉紅 劉英權(quán)

(河北省石家莊市第一醫(yī)院皮膚科，河北 石家莊 050011)

現(xiàn)代醫(yī)藥

308 nm準(zhǔn)分子激光治療對白癜風(fēng)患者外周血Th1及Th2細(xì)胞因子的影響※

李建英 劉津民 曹海育 張玉紅1劉英權(quán)

(河北省石家莊市第一醫(yī)院皮膚科，河北 石家莊 050011)

目的研究308 nm準(zhǔn)分子激光對白癜風(fēng)患者外周血Th1型細(xì)胞因子干擾素γ(IFN-γ)和Th2型細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-4(IL-4)水平的影響，探討其可能的作用機(jī)制。方法50例白癜風(fēng)患者均采用308 nm準(zhǔn)分子激光治療，每周2次共治療24次。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)檢測50例白癜風(fēng)患者治療前、后及20 例正常健康者外周血IFN-γ及IL-4的水平，并統(tǒng)計(jì)臨床療效。結(jié)果治療組治療前IFN-γ水平較正常對照組升高，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；治療后較治療前明顯降低(P<0.05)，且與正常對照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。治療組治療前IL-4水平與正常對照組及本組治療后比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論白癜風(fēng)患者體內(nèi)Th1型細(xì)胞因子占優(yōu)勢，308 nm準(zhǔn)分子激光可恢復(fù)白癜風(fēng)患者Th1及Th2的平衡狀態(tài)。

白癜風(fēng)；激光，準(zhǔn)分子；干擾素Ⅱ型；白細(xì)胞介素 4

白癜風(fēng)是以黑素細(xì)胞特異性損傷為病理特征的疾病，臨床治療較為困難，其發(fā)病機(jī)制尚不清楚，近年來認(rèn)為白癜風(fēng)色素脫失的機(jī)制與免疫異常有密切關(guān)系，認(rèn)為是一種自身免疫疾病。308 nm 準(zhǔn)分子激光是目前治療白癜風(fēng)較為有效的方法。本研究采用308 nm 準(zhǔn)分子激光治療50例白癜風(fēng)，檢測其對白癜風(fēng)患者外周血Th1型細(xì)胞因子干擾素γ(IFN-γ)和Th2型細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-4(IL-4)水平，以探討其可能的作用機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將50例2008—2012年于我院皮膚科科門診就診的尋常型進(jìn)展期白癜風(fēng)患者設(shè)為治療組，男30例，女20例；年齡16～65歲，平均(39.2±6.5)歲；病程8 d～30年，平均(17.1±2.4)年；局限型20例，散發(fā)型12例，泛發(fā)型5例，肢端型13例；皮損分布于面、頸、肩、腰、背、腿、手足等部位。所有患者近1個(gè)月內(nèi)未接受過皮質(zhì)類固醇激素、紫外線、光感藥物治療，也未接受其他系統(tǒng)藥物治療。同時(shí)選擇本院體檢健康者20例為正常對照組，男12例，女8例；年齡16～62歲，平均(40.3±5.4)歲。2組年齡、性別比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 依據(jù)中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)皮膚性病專業(yè)委員會(huì)色素病學(xué)組2003年修訂的“白癜風(fēng)臨床分型及療效標(biāo)準(zhǔn)”[1]確診。

1.3 治療方法 所有白癜風(fēng)患者均采用308 nm準(zhǔn)分子激光(日本希蘭，型號(hào)0755-21356707)治療，初始劑量為100 mJ/cm2，首次治療后根據(jù)皮膚反應(yīng)調(diào)整劑量，308 nm 準(zhǔn)分子激光最小紅斑量(MED)測定及劑量選擇按文獻(xiàn)[2]進(jìn)行，每周2次，共治療24次。

1.4 檢測指標(biāo)及方法 所有患者均于治療前、治療結(jié)束當(dāng)日晨8：00空腹采外周靜脈血3 mL，靜置2 h，分離血清，置于-70 ℃冰箱內(nèi)備檢。IFN-γ及IL-4試劑由美國TPI公司生產(chǎn)，購自北京晶美生物工程有限公司，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定IFN-γ及IL-4，嚴(yán)格按照試劑盒說明步驟進(jìn)行。用美國Bio-Rad公司550型450 nm波長酶標(biāo)儀在450 nm處測定各標(biāo)本光密度(OD)值。以O(shè)D值為縱坐標(biāo)，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線測定各樣品IL-4及IFN-γ含量。正常對照組于治療前進(jìn)行檢測。

1.5 療效標(biāo)準(zhǔn) 痊愈：白斑全部消退，恢復(fù)正常膚色；顯效：白斑部分消退或縮小，恢復(fù)正常膚色的面積占皮損面積≥50%；好轉(zhuǎn)：白斑部分消退或縮??；無效：白斑無色素再生或范圍擴(kuò)大[1]。

2 結(jié) 果

2.1 治療組臨床療效 治療組50例，痊愈8例，顯效22例，好轉(zhuǎn)20例，顯效率60%，總有效率100%。

2.2 治療組與正常對照組IFN-γ及IL-4水平比較 見表1。

表1 治療組與正常對照組IFN-γ及

IL-4水平比較

治療組(n=50)治療前治療后對照組(n=20)IFN-γ76．18±28．35133．18±26．14?86．18±18．37△IL-485．23±13．1099．10±24．3594．89±22．89

與正常對照組比較，*P<0.05；與本組治療前比較，△P<0.05

由表1可見，治療組治療前IFN-γ水平較正常對照組升高，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；治療后較治療前明顯降低(P<0.05)，且與正常對照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。治療組治療前IL-4水平與正常對照組及治療后比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

3 討 論

近年來更多研究表明，白癜風(fēng)與自身免疫，尤其是細(xì)胞免疫功能紊亂密切相關(guān)[3]。不同的細(xì)胞因子、抗原呈遞細(xì)胞及不同的抗原劑量等環(huán)境因素作用下，Th0細(xì)胞可分別向Th1或Th2細(xì)胞分化，Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞在行使功能時(shí)存在不均一性。Th1細(xì)胞主要分泌IL-2、IFN-γ、IL-12、腫瘤壞死因子(TNF)-α和TNF-β，稱為Th1型細(xì)胞因子，并介導(dǎo)細(xì)胞免疫，如激活細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL)和巨噬細(xì)胞，誘導(dǎo)遲發(fā)型超敏反應(yīng)(DTH)，Th2細(xì)胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10和IL-13等，介導(dǎo)體液免疫，如激活B細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞[4]，在變態(tài)反應(yīng)中起主要作用[5]。Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞的相互平衡與否直接影響機(jī)體的免疫功能，且與疾病狀態(tài)密切相關(guān)。 本研究顯示，白癜風(fēng)患者IFN-γ水平較正常人升高(P<0.05)，IL-4水平正常(P>0.05)，說明其T細(xì)胞亞群失衡，細(xì)胞免疫功能異?？赡軈⑴c了白癜風(fēng)的發(fā)病過程。IFN-γ是最早發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子，可加強(qiáng)黑素細(xì)胞細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)的表達(dá)，ICAM-1可促進(jìn)白細(xì)胞與黑素細(xì)胞黏附，進(jìn)而引起黑素細(xì)胞的破壞。IFN-γ還是一種誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)的誘導(dǎo)因子，其通過產(chǎn)生大量一氧化氮(NO)引起黑素細(xì)胞自身破壞并導(dǎo)致皮膚色素脫失。

308 nm準(zhǔn)分子激光治療白癜風(fēng)機(jī)制尚不明了，推測可能為：①誘導(dǎo)皮損處病理性T淋巴細(xì)胞凋亡；②刺激黑素細(xì)胞增生，促進(jìn)黑素生成。而前者被認(rèn)為是最重要的治療機(jī)制之一[5]。本研究發(fā)現(xiàn)，白癜風(fēng)患者在進(jìn)行308 nm準(zhǔn)分子激光治療后血清IFN-γ水平較治療前明顯降低(P<0.05)，說明308 nm準(zhǔn)分子激光可通過降低血清IFN-γ水平調(diào)節(jié)白癜風(fēng)患者的免疫反應(yīng)，使黑素細(xì)胞能逐漸恢復(fù)，從而達(dá)到治療的目的。

綜上所述，白癜風(fēng)患者Th1/Th2平衡被打破，Th1型細(xì)胞因子占優(yōu)勢，這說明Th1型細(xì)胞因子主要參與了白癜風(fēng)的發(fā)病過程，而308 nm準(zhǔn)分子激光治療能使Th1/Th2恢復(fù)平衡狀態(tài)，此結(jié)論為308 nm準(zhǔn)分子激光治療白癜風(fēng)提供了新的證據(jù)。

[1] 中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)皮膚性病專業(yè)委員會(huì)色素病學(xué)組.白癜風(fēng)臨床分型及療效標(biāo)準(zhǔn)(2003年修訂稿)[J].中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)雜志，2004，3(1)：65.

[2] 楊慧蘭，劉仲榮，李雪梅，等.308nm準(zhǔn)分子激光治療白癜風(fēng)臨床研究[J].中華皮膚科雜志，2006，39(1)：35-37.

[3] Barona MI，Arrunátegui A，F(xiàn)alabella R.An epidemiologic case-control study in a population with vitiligo[J].J Am Acad Demar tol，1995，33(4)：621-625.

[4] Singh VK，Mehrotra S，Agarwal SS.The paradigm of Th1 and Th2 Cytokines：its relevance to autoimmunity and allergy[J].Immunol Res，1999，20(2)：147-161.

[5] Spencer JM，Nossa R，Ajmeri J.Treatment of vitiligo with the308-nm excimer laser：a pilot study[J].J Am Acad Dermatol，2002，46(5)：727-731.

(本文編輯：曹志娟)

Effectof308nmexcimerlasertherapyonTh1/Th2cytokinesinperipheralbloodofpatientswithvitiligo

LIJianying，LIUJinmin，CAOHaiyu，etal.

DepartmentofDermatology，TheFirstHospitalofShijiazhuanginHebeiProvince，Hebei，Shijiazhuang050000

ObjectiveTo study the level of Th1 cytokine(IFN-γ) and Th2 cytokine (IL-4) in peripheral blood of patients with vitiligo， and to explore the possible immune mechanism of 308nm excimer laser for vitiligo therapy.Methods50 cases of vitiligo were treated by 308nm excimer laser therapy， twice a week for 24 times.The level of IFN-γ and IL-4 in peripheral blood from 50 vitiligo patients before and after treatment and 20 healthy person in control group were measured by enzyme linked immunosorbent assay.ResultsThere was no difference between two groups on the level of IL-4 (P> 0.05).The level of IFN-γin vitiligo patients was higher than that in the control group (P<0.05); After 308nm excimer laser therapy the level of IFN-γ in vitiligo patients was discreased significanlty (P<0.05).There was no significant difference between two groups after treatment (P>0.05).ConclusionTh1 cytokine take advantage of vitiligo patients and involved in the pathogenesis of vitiligo.308nm excimer laser therapy can restore the Th1/Th2 balance.

Vitiligo; Laser; Excimer; Interferon-γ；Interleukin-4

※ 項(xiàng)目來源：2012年河北省科學(xué)技術(shù)研究與發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào)：12277724)

1 河北省石家莊市第一醫(yī)院理療科，河北 石家莊 050011

李建英(1977—)，女，主治醫(yī)師，碩士。從事皮膚科臨床工作。

R758.410.5；R454.21

A

1002-2619(2014)03-0479-02

2013-08-09)