李小霞， 陳 鋒， 潘 慶， 陳翠英， 譚玉文， 雷小婷， 曹俊明

(1 華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，廣東 廣州 510642；2 廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 畜牧研究所，廣東 廣州 510640)

酵母硒對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)和抗氧化性能的影響

李小霞1， 陳 鋒1， 潘 慶1， 陳翠英1， 譚玉文1， 雷小婷1， 曹俊明2

(1 華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，廣東 廣州 510642；2 廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 畜牧研究所，廣東 廣州 510640)

【目的】研究飼料中添加不同水平酵母硒對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)和抗氧化性能的影響.【方法】選取初始體質(zhì)量為(0.41±0.01) g的凡納濱對(duì)蝦Litopenaeusvannamei720尾，隨機(jī)分為6個(gè)試驗(yàn)組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)40尾蝦，在室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)(容積250 L)中進(jìn)行為期56 d的生長(zhǎng)試驗(yàn).在基礎(chǔ)飼料中分別添加硒(酵母硒)0、0.15、0.30、0.45、0.60、1.00 mg·kg-1，制成6種不同硒水平的半純化飼料，實(shí)測(cè)飼料硒質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為0.25、0.41、0.56、0.68、0.84、1.20 mg·kg-1.【結(jié)果和結(jié)論】結(jié)果表明，添加酵母硒對(duì)凡納濱對(duì)蝦增質(zhì)量率、特定生長(zhǎng)率、飼料系數(shù)、成活率均無(wú)顯著影響(P>0.05)，隨著飼料硒水平的增加，凡納濱對(duì)蝦的增質(zhì)量率和特定生長(zhǎng)率不斷升高，在0.84 mg·kg-1硒組達(dá)到最大值.各試驗(yàn)組對(duì)蝦肝胰腺超氧化物歧化酶和總抗氧化能力均高于對(duì)照組，而丙二醛含量均低于對(duì)照組，但差異不顯著(P>0.05).以增質(zhì)量率和特定生長(zhǎng)率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，通過(guò)二次線性回歸分析表明，在該試驗(yàn)條件下凡納濱對(duì)蝦飼料中硒含量為0.98 mg·kg-1時(shí)其生長(zhǎng)性能最高.

凡納濱對(duì)蝦； 酵母硒； 生長(zhǎng)性能； 抗氧化能力

凡納濱對(duì)蝦Litopenaeusvannamei是世界養(yǎng)殖產(chǎn)量最高的三大優(yōu)良品種之一 ，隨著對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展，大規(guī)模和高密度的人工養(yǎng)殖使養(yǎng)殖環(huán)境日趨惡化，對(duì)蝦營(yíng)養(yǎng)代謝失衡，病害頻頻發(fā)生.研究發(fā)現(xiàn)，硒是維持人和動(dòng)物正常生長(zhǎng)及生理功能的必需微量營(yíng)養(yǎng)素之一，是谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)和含硒轉(zhuǎn)移核糖核酸(tRNA)的組成成分，對(duì)動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育、免疫機(jī)能和抗氧化發(fā)揮著重要作用，在動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)中已逐步得到廣泛的研究和應(yīng)用[1].研究表明，魚(yú)類硒缺乏會(huì)導(dǎo)致肌營(yíng)養(yǎng)不良、貧血甚至死亡[2]，但硒含量過(guò)高亦會(huì)產(chǎn)生毒害作用[3-4]；在飼料中添加適量的硒源，能顯著提高養(yǎng)殖動(dòng)物的生長(zhǎng)速度、成活率和抗氧化酶活性，增強(qiáng)免疫力[5-6].本試驗(yàn)擬在飼料中添加不同水平酵母硒，研究其對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)和抗氧化能力的影響，旨在豐富凡納濱對(duì)蝦硒營(yíng)養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，為合理利用酵母硒，科學(xué)配制凡納濱對(duì)蝦飼料提供理論依據(jù).

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)蝦與酵母硒

試驗(yàn)用凡納濱對(duì)蝦購(gòu)自正大集團(tuán)珠海蝦苗廠，為當(dāng)年蝦苗，酵母硒由廣東海大集團(tuán)股份有限公司提供，測(cè)定硒質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1 600 mg·kg-1.

1.2 試驗(yàn)飼料

根據(jù)凡納濱對(duì)蝦的營(yíng)養(yǎng)需求[7]，以魚(yú)粉、酪蛋白和明膠為主要蛋白源，魚(yú)油和大豆磷脂為脂肪源，玉米淀粉和豌豆蛋白粉為糖源配制基礎(chǔ)飼料.飼料配方及營(yíng)養(yǎng)組成見(jiàn)表1.以酵母硒為硒源，采用單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，在基礎(chǔ)飼料中分別添加硒(酵母硒)0、0.15、0.30、0.45、0.60和1.00 mg·kg-1，配制成6種試驗(yàn)飼料，實(shí)測(cè)飼料硒質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為0.25、0.41、0.56、0.68、0.84、1.20 mg·kg-1.飼料原料經(jīng)粉碎過(guò)60目篩后混合均勻，用SLX-80型雙螺桿擠壓機(jī)制成直徑為1.0 mm的顆粒飼料，在50 ℃烘箱中烘干，冷卻后放入密封袋中，-20 ℃冰箱中保存?zhèn)溆?

1.3 試驗(yàn)條件及飼養(yǎng)管理

養(yǎng)殖試驗(yàn)于2012年7—9月在室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中進(jìn)行(約250 L).試驗(yàn)開(kāi)始前將對(duì)蝦在室外水泥池中暫養(yǎng)2周，期間投喂基礎(chǔ)飼料.試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)，選取初始體質(zhì)量為(0.41±0.01) g幼蝦720尾，隨機(jī)分為6個(gè)處理組，每組3個(gè)重復(fù)，每重復(fù)40尾蝦.養(yǎng)殖周期為56 d，每天飽食投喂3次(08:30、14:30、20:00)，并在投喂0.5～1 h后，吸取殘餌，同時(shí)根據(jù)攝食情況及時(shí)調(diào)整投喂量，計(jì)算攝食量和飼料系數(shù).試驗(yàn)水源為經(jīng)沙濾、消毒后的淡化海水，鹽度3.5‰～5.5‰.試驗(yàn)期間，水溫25～32 ℃，溶解氧>5.00 mg·L-1，氨氮<0.20 mg·L-1, 亞硝酸氮<0.10 mg·L-1，pH 7.6～8.0，每3 d排污1次，每7 d換水1/4～1/3.

1.4 樣品采集與測(cè)定

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后禁食24 h，計(jì)數(shù)、稱質(zhì)量.計(jì)算其成活率、飼料系數(shù)、增質(zhì)量率以及特定生長(zhǎng)率.每桶隨機(jī)取15尾蝦做全蝦樣品，采用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方法AOAC(1993)[8]進(jìn)行體成分測(cè)定，水分用105 ℃常壓干燥法測(cè)定；蛋白質(zhì)含量用凱氏定氮法測(cè)定；脂肪含量用索氏石油醚抽提法測(cè)定；粗灰分用550 ℃高溫爐灼燒法測(cè)定.另每桶隨機(jī)取15尾蝦，稱質(zhì)量，剝離肝胰腺，勻漿后，在4 ℃條件下以3 500～4 000 r/min離心10 min，取上清液分裝，-80 ℃條件保存?zhèn)溆?對(duì)蝦肝胰腺中超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)、總抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛 (MDA)含量及勻漿液中總蛋白含量的測(cè)定計(jì)算方法參照南京建成生物工程研究所試劑盒說(shuō)明書(shū).

相關(guān)生長(zhǎng)指標(biāo)計(jì)算公式如下：

增質(zhì)量率=(mt-m0)/m0×100%,

成活率=終末尾數(shù)/初始尾數(shù)×100%,

特定生長(zhǎng)率= (lnmt-lnm0)/t×100%,

攝食量=總投喂量-殘餌量,

飼料系數(shù)=攝食量 /(mt+m1-m0),

肝胰指數(shù)=mh/mb×100%,

式中：m0—試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)蝦尾均質(zhì)量(g),m1—試驗(yàn)中死亡蝦體質(zhì)量,mt—試驗(yàn)結(jié)束時(shí)蝦尾均質(zhì)量(g),mh—蝦肝胰腺質(zhì)量,mb—蝦體質(zhì)量,t—養(yǎng)殖時(shí)間(d).

1.5 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示，采用SPSS 20.0版軟件進(jìn)行分析和統(tǒng)計(jì)，先對(duì)數(shù)據(jù)作單因素方差分析(ANOVA)，若處理組間差異顯著，再采用Duncan’s多重比較.

表1 飼料配方及營(yíng)養(yǎng)組成Tab.1 Composition and nutrient levels of the experimental diets

1) 復(fù)合礦物鹽原料由廣州海因特水產(chǎn)科技有限公司提供，每千克復(fù)合礦物鹽預(yù)混料中含有：NaCl 59.34 g、KCl 114.54 g、MgSO4·7H20 146.08 g、CuSO4·5H2O 0.84 g、FeSO4·5H2O 4.95 g、ZnSO4·7H2O 3.67 g、MnSO4·H2O 19.35 g、Ca(IO3)20.04 g、CoSO4·7H2O 0.50 g、沸石粉 397.76、Ca(H2PO4)2·H2O 252.93 g；2) 維生素預(yù)混料由廣州飛禧特水產(chǎn)科技有限公司提供：每千克多維預(yù)混料中含有:VA4×106IU、VE30 g 、VD2.0×106IU、VK310 g、VB15 g、VB215 g、VB68 g、VB1220 mg、煙酸40 g、泛酸鈣25 g、葉酸2.5 g、肌醇150 g、生物素80 mg、水分10%.

2 結(jié)果

2.1 酵母硒水平對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能的影響

飼料中添加不同水平的酵母硒對(duì)表2中所列凡納濱對(duì)蝦各項(xiàng)生長(zhǎng)性能指標(biāo)均無(wú)顯著影響(P>0.05)，但對(duì)蝦末均質(zhì)量、增質(zhì)量率、特定生長(zhǎng)率和成活率均高于對(duì)照組，且增質(zhì)量率和特定生長(zhǎng)率均以0.60 mg·kg-1硒組最高(分別提高了15.79%和7.78%)；添加酵母硒組飼料系數(shù)均較對(duì)照組下降，降低了8.08%～11.45%.采用多項(xiàng)式分析飼料酵母硒水平與凡納濱對(duì)蝦增質(zhì)量率、特定生長(zhǎng)率之間的相關(guān)關(guān)系.結(jié)果表明，凡納濱對(duì)蝦獲得最大增質(zhì)量率和最大特定生長(zhǎng)率時(shí)飼料中硒的最低質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.98 mg·kg-1.

表2 飼料酵母硒水平對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能的影響1)

1) 同列數(shù)據(jù)后無(wú)標(biāo)注字母者表示差異不顯著(P>0.05，Duncan’s法) .

2.2 酵母硒水平對(duì)凡納濱對(duì)蝦體成分和肝胰腺抗氧化指標(biāo)的影響

由表3可以看出，試驗(yàn)組全蝦體脂肪含量與對(duì)照組差異不顯著(P>0.05)；0.60 mg·kg-1硒添加組全蝦體蛋白含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，其他試驗(yàn)組與對(duì)照組均無(wú)顯著性差異(P>0.05).全蝦水分含量在0.60 mg·kg-1硒添加組呈現(xiàn)最高值，但各組間差異不顯著(P>0.05).飼料中添加酵母硒可提高凡納濱對(duì)蝦肝胰腺T-AOC活性，降低MDA含量， GSH-Px活性隨添加量的增加表現(xiàn)出先上升后下降的趨勢(shì)，但均未達(dá)到顯著水平(P>0.05).添加酵母硒對(duì)肝胰腺SOD活性有一定的影響，0.15、0.60 mg·kg-1硒添加組SOD活性均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，其余各試驗(yàn)組間差異不顯著(P>0.05).

表3飼料酵母硒水平對(duì)凡納濱對(duì)蝦體成分(濕質(zhì)量)和肝胰腺抗氧化指標(biāo)的影響1)

Tab.3Effectsofdietaryyeastseleniumlevelsonbodycomposition(wetmassbasis)andantioxidantindexesofhepatopancreasinLitopenaeusvannamei

w(酵母硒)/(mg·kg-1)w(水分)/%w(粗蛋白)/%w(粗脂肪)/%T-AOC活性/(U·mg-1)GSH-Px活性/(μmol·mg-1)SOD活性/(U·mg-1)b(MDA)/(nmol·mg-1)0.0077.08±0.46a15.68±0.00b0.68±0.04a0.66±0.40a529.23±78.64a43.80±4.50b5.49±1.10a0.1577.12±0.98a15.74±0.07b0.71±0.07a1.58±0.14a617.76±187.89a49.57±1.55a4.59±0.24a0.3077.35±0.52a15.45±0.06b0.64±0.02a1.44±0.62a612.94±108.06a48.08±3.14ab4.52±1.19a0.4577.47±0.66a15.68±0.15b0.85±0.00a1.60±1.13a423.69±28.55a43.22±2.56ab4.92±0.67a0.6077.89±0.52a16.17±0.03a0.76±0.05a1.38±0.06a450.11±45.05a49.29±0.86a4.72±0.17a1.0077.45±0.33a15.65±0.12b0.88±0.04a1.72±0.88a502.94±80.52a44.39±4.25ab4.49±1.67a

1) 同列數(shù)據(jù)后凡有一個(gè)相同小寫(xiě)字母者，表示差異不顯著(P>0.05，Duncan’s法) .

3 討論

硒是動(dòng)物生長(zhǎng)所必需的微量元素，對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物有促生長(zhǎng)作用，研究證明，硒可促進(jìn)生長(zhǎng)激素合成與分泌，從而加快動(dòng)物的生長(zhǎng)和蛋白質(zhì)合成[9].本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼料中硒質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.98 mg·kg-1時(shí)凡納濱對(duì)蝦的生長(zhǎng)性能最佳，特定生長(zhǎng)率和增質(zhì)量率均達(dá)到最大值，飼料系數(shù)最低.類似結(jié)論已有報(bào)道[10-11].研究發(fā)現(xiàn)，在異育銀鯽飼料中添加硒酵母可不同程度促進(jìn)異育銀鯽的生長(zhǎng)，提高飼料利用率[12].另外，在中國(guó)對(duì)蝦[13]試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，添加外源硒可顯著提高其增質(zhì)量率和飼料效率.這些研究結(jié)果均與本試驗(yàn)的結(jié)果有所不同，原因可能是試驗(yàn)對(duì)象、飼料原料、養(yǎng)殖條件、硒源等與本試驗(yàn)存在差異； 或者可能與飼料中魚(yú)粉量有關(guān).有學(xué)者指出，魚(yú)粉是飼料硒的重要來(lái)源[11].本試驗(yàn)飼料配方中含有10%的魚(yú)粉，可能使飼料中硒含量已經(jīng)達(dá)到凡納濱對(duì)蝦對(duì)硒的最小需求量，故再添加硒對(duì)其生長(zhǎng)和抗氧化性能無(wú)顯著影響.另外，Alam等[14]認(rèn)為影響營(yíng)養(yǎng)素作用效果的關(guān)鍵因素是吸收，不同動(dòng)物對(duì)不同來(lái)源的硒在腸道內(nèi)的吸收率是不同的.

飼料中硒水平對(duì)凡納濱對(duì)蝦體成分的影響表明，硒攝入的增加，增加了蝦體對(duì)飼料蛋白利用率，提高了蛋白質(zhì)效率.有研究表明，適量添加硒可提高草魚(yú)魚(yú)體和肌肉中的粗蛋白質(zhì)含量，降低粗脂肪含量[10].梁萌青等[4]研究發(fā)現(xiàn)，在鱸魚(yú)飼料中添加0.4 mg·kg-1硒可以提高魚(yú)體蛋白含量，但對(duì)脂肪、粗灰分和水分含量無(wú)顯著影響.儲(chǔ)霞玲等[15]在凡納濱對(duì)蝦飼料中聯(lián)合添加蛋氨酸硒和谷胱甘肽的試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，添加量0.1 mg·kg-1硒+120 mg·kg-1谷胱甘肽可顯著提高蝦體蛋白含量.本試驗(yàn)結(jié)果表明，添加適量酵母硒可顯著提高全蝦體蛋白含量，對(duì)體脂肪含量的影響不顯著.與前人在添加硒可提高體蛋白上的研究結(jié)果類似，可能是硒的添加影響了機(jī)體對(duì)蛋白的代謝，具體原因需做進(jìn)一步的研究.

硒的主要生物學(xué)功能是清除生物體內(nèi)過(guò)多的活性氧自由基，保護(hù)細(xì)胞膜的正常功能，防止細(xì)胞和亞細(xì)胞膜受到過(guò)氧化物的破壞.研究表明動(dòng)物體通過(guò)抗氧化或自由基防御系統(tǒng)能有效地清除脂質(zhì)過(guò)氧化物等活性氧，并終止自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，從而對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化作用的損傷進(jìn)行防御.肝胰腺GSH-Px、T-AOC、 SOD 活性和 MDA 含量是反映機(jī)體抗氧化能力的重要指標(biāo).本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼料中添加適量酵母硒可提高凡納濱對(duì)蝦機(jī)體抗氧化能力，但未達(dá)到顯著水平，這與趙吉偉等[11]在虹鱒上研究結(jié)論相似.有學(xué)者發(fā)現(xiàn)在飼料中添加適量有機(jī)硒對(duì)動(dòng)物的生長(zhǎng)和抗氧化性能有顯著影響[16-17]，這些添加硒對(duì)養(yǎng)殖動(dòng)物抗氧化能力的研究結(jié)果均與本試驗(yàn)的結(jié)果有所不同.表明不同養(yǎng)殖對(duì)象對(duì)硒源的吸收和機(jī)體抗氧化能力方面存在很大的差異.本試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明，在凡納濱對(duì)蝦飼料中補(bǔ)充添加適量的硒對(duì)機(jī)體抗氧化能力的改善有一定的促進(jìn)作用.

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【責(zé)任編輯柴 焰】

EffectsofyeastseleniumonthegrowthandantioxidativeperformanceinLitopenaeusvannamei

LI Xiaoxia1, CHEN Feng1, PAN Qing1, CHEN Cuiying1, TAN Yuwen1, LEI Xiaoting1, CAO Junming2

(1 College of Animal Science, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China;2 Institute of Animal Science, Guangdong Academy of Agricultural Sciences, Guangzhou 510640, China)

【Objective】 The effects of dietary yeast selenium on the growth and antioxidant performance were studied inLitopenaeusvannamei.【Method】 Seven hundred and twenty healthyLitopenaeusvannameiwith an initial average body mass of (0.41±0.01) g were randomly stocked into 6 groups with 3 replicates per group and 40 shrimps per replicate in re-circulated water system.The basal diet was supplemented with 0, 0.15, 0.30, 0.45, 0.60 and 1.00 mg·kg-1selenium (yeast selenium) respectively and these shrimps were fed with 6 semi-purified diets containing graded levels of 0.25, 0.41, 0.56, 0.68,0.84,1.20 mg·kg-1of selenium, respectively for 56 d.【Result and conclusion】 The results showed that mass gain rate (MGR), specific growth rate (SGR), feed conversion rate (FCR), survival rate (SR) had no significant difference among all groups (P>0.05), but with the increase of yeast selenium levels, MGR and SGR increased and the highest value was found in the 0.84 mg·kg-1group.The total antioxidative capacity (T-AOC) and superoxide dismutase (SOD) of shrimp in hepstopsncreas were higher than those of the control group, while the malondialdehyde (MDA) content was lower than that of the control group.But there were no significant differences (P>0.05).A quadratic linear regression analysis showed that using MGR and SGR as response criteria in cultured condition, the optimum dietary selenium content for the highest growth inLitopenaeusvannameiwas 0.98 mg·kg-1of dietary mass.

Litopenaeusvannamei; yeast selenium; growth; antioxidative performance

2013- 09- 04優(yōu)先出版時(shí)間2014- 09- 30

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李小霞(1985—)，女，博士研究生，E-mail：852551793@qq.com ；通信作者：潘 慶(1969—)，女，教授，博士，E-mail：qpan@scau.edu.cn

廣東省自然科學(xué)基金團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目(10351064001000000)

李小霞， 陳 鋒， 潘 慶，等.酵母硒對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)和抗氧化性能的影響[J].華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2014,35(6):108- 112.

S963.73

A

1001- 411X(2014)06- 0108- 05